Застосування амінового тесту як способу визначення наявності крові менструального походження на речових доказах

Реферат: UA 118155 U UA 118155 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до біології і медицини, а саме до судової медицини і може бути використана для судово-медичного встановлення крові менструального походження. Відомий спосіб визначення крові менструального походження за наявністю піхвового епітелію в крові ("Судово-медична цитологія". Старовойтова P.O., В.Д. Мішалов В.Д., Г.Ф. Кривда Г.Ф. Одеса, 2007 - С. 167-168). Згідно з цим способом для приготування цитологічних препаратів вирізку тканини розмірами 1,5×1,5см екстрагують 25 %-ним розчином оцтової кислоти протягом 24-48 годин. Надалі проводять струшування пробірок з витяжками із плями протягом 5-10 хвилин. Наступним кроком є фарбування по Маку, для встановлення глікогенвмісних клітин. Заключним етапом є дослідження клітинного складу препаратів при фарбуванні акриди новим оранжевим та фарбування азур-еозиновою сумішшю з метою виявлення X-хроматину в ядрах клітин і статево специфічних виростів у ядрах сегментоядерних лейкоцитів, що є ознаками наявності менструальної крові. Недоліками цього способу є те, що він є довготривалий, потребує підготовки і при цьому специфічні клітини вдається виявити тільки в 50 % (за даними Зайцевої Є.І. "Цитологическая характеристика менструального происхождения крови в высохших пятнах" // Лабораторные исследования объектов судебно-медицинской экспертизы. - Горький. - 1985 - С. 68-73). Відомий також спосіб емісійного спектрального аналізу з встановлення крові менструального походження за хімічними елементами крові ("Определение менструальной крови в пятне методом эмиссионного спектрального анализа" // Табакман М.Н. Судебномедицинская экспертиза. 1963 - №1 - С. 10-12). При використані емісійного спектрального аналізу з тканини з плямами крові вирізають ділянки, однакові за ступенем просякнутості, яку визначали за різницею ваги тканини з плямою і без плями крові, розміром 5×5 см і вагою 1-1,5 г. Таких же розмірів беруть контрольні шматочки тканини. Всі 3 об'єкти одночасно (для ідентичності умов) спалюють протягом 15 хвилин в муфельній печі при 380-400° до стану обвуглювання і розтирають в ступці до отримання однорідного пудроподібного порошку. Потім 25 мг отриманого порошку поміщають в поглиблення нижнього вугільного електрода і спалюють в дузі змінного струму при 7А протягом 30 секунд (спектрограф ІСП-22, генератор ПС-9). Спектр фіксують на пластинках (тип П) через триступеневий послаблювач, розшифровують, використовуючи спектр заліза і визначають інтенсивність почорніння ліній макро- і мікроелементів при обліку почорніння фону (мікрофотометр МФ-2). На кожну пластинку знімають по 5-8 спектрів плям периферичної і менструальної крові і контрольної тканини. Відношення ліній Са до ліній Na і Сu до Са (тобто відносні їх показники) в плямах периферичної і менструальної крові постійні, специфічні і відрізняються один від одного, що підтверджує наявність менструальної крові. Недоліками цього способу є те, що спосіб довготривалий, потребує проведення проб та підготовки, потребує розшифровки спектрограм і при цьому існує можливість не виявлення спектральних елементів, оскільки одні лінії накладаються на інші, визначаються також хімічні елементи, які є неспецифічними для менструальної крові. Відомо, що до складу менструальної крові окрім власне крові, входить слизовий секрет залоз шийки матки, вміст піхви: секрет залоз піхви і тканин ендометрію. Нечисленні роботи і наші власні дані свідчать, що вагінальний вміст складається з рідинного і клітинного компонентів, слизу, що продукується цервікальними залозами, трансудату, десквамованого епітелію піхви і матки, лейкоцитів та мікроорганізмів. У процесі метаболізму анаеробних мікроорганізмів утворюється ряд речовин, що належать до класу летких амінів (метиламін, диметиламін, триметиламін, фенілетиламін, ізобутиламін, путресцин, кадаверин) і летючі коротколанцюжні жирні кислоти. Ці сполуки мають неприємний запах "несвіжої риби", так званий аміновий запах. У нормі ці сполуки присутні у вагінальній рідині, але в дуже малих концентраціях. Для їх виявлення застосовують аміновий тест, дансіловий метод (визначення в водному розчині) і парофазний аналіз або газову хроматографію. Відомий аміновий тест (("Бактериальный вагиноз". Е.Ф. Кира - СПб. "Нева-Люкс", 2001. - 364 с.), що полягає у виявленні аміноутворюючої флори у виділеннях з піхви. В медичній галузі його застосовують в гінекологічній практиці для комплексної діагностиці бактеріального вагінозу (гарднерельозу) у виділеннях піхви. Здійснюють його наступнимчином: на предметне скельце наносять виділення з піхви, додають декілька крапель 5-10 %-ного розчину гідроокису калію і через 5-7 хвилин органолептично визначають наявність амінів. Тест рахується позитивним, якщо при цьому змішуванні з'являється запах риби, який пов'язаний з виділенням амінів, котрі утворюються в порожнині піхви в результаті життєдіяльності гарднерели та іншої аміноутворюючої флори. 1 UA 118155 U 5 10 В основу корисної моделі поставлена задача створення способу визначення наявності менструальної крові на речових доказах шляхом застосування амінового тесту, який використовується для визначення амінів у виділеннях піхви в комплексній діагностиці бактеріального вагінозу, при дослідженні вирізок з тканини з плямами крові речових доказів, що забезпечує швидкий, об'єктивний результат та легкий у виконанні спосіб. Поставлена задача вирішується тим, що застосовують аміновий тест як спосіб визначення наявності крові менструальної походження на речових доказах. Спосіб здійснюють наступним чином. На вирізку з речовим доказом, а саме тканину з плямою крові, розмірами 1,5×1,5см, додають декілька крапель 5-10 %-ного розчину гідроокису калію (КОН). Через 5-7 хвилин при позитивному результаті органолептично визначають наявність неприємного амінового запаху (гнилої риби), який зумовлений присутністю летючих амінів, зокрема триметиламіну, який і надає менструальній крові специфічного запаху. За цим специфічним запахом визначають наявність саме крові менструального походження на речових доказах. 15 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Застосування амінового тесту як способу визначення наявності крові менструального походження на речових доказах. 20 Комп’ютерна верстка Л. Ціхановська Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2