Етиловий ефір 4-карбетоксіоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти, який проявляє анальгетичну, протизапальну, антибактеріальну та фунгістатичну активність

Етиловий ефір 4карбетоксіоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти формули: 2 3 11847 лікарських форм: таблеток, капсул, м'яких лікарських засобів тощо. Поставлене завдання вирішується шляхом синтезу етилового ефіру 4карбетоксиоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти формули COOC2 H5 NHCOCONHNHCOCOOC2 H5 , (І) який проявляє анальгетичну, протизапальну, антибактеріальну та фунгістатичну активність. Сполука, яка заявляється, утворена взаємодією гідразиду 4-карбетоксиоксанілової кислоти з етоксалілхлоридом в середовищі ДМФА у співвідношенні 1:1,5. Етиловий ефір 4-карбетоксиоксанілоїлгідразид щавлевої кислоти це білого кольору кристалічна речовина, розчинна в діоксані, диметилформаміді, диметилсульфоксиді, етанолі при нагріванні, нерозчинна у воді, гексані. Будова та індивідуальність сполуки підтверджена за допомогою елементного аналізу, ІЧ-, ПМР-спектрів та методом хроматографії у тонкому шарі сорбенту. Корисна модель ілюструється наступними прикладами: Приклад 1 До розчину 2,61г (0,01моль) гідразиду 4карбетоксиоксанілової кислоти в 5мл ДМФА краплями додають 2,04г (0,015моль) етоксалілхлориду, ретельно перемішуючи реакційну суміш до повного розчинення гідразиду. Після чого, реакційну масу фільтрують і фільтрат розбавляють п'ятикратною кількістю води. Осад, що утворився відфільтровують, промивають водою, сушать. Кристалізують із етанолу. Вихід 2,28 г (65%) Т.топл.217-219°С Брутто-формула: С15Н17N3С7 М. м. 351, 32 4 Знайдено: С,%: 51,30; N,%: 12,01; Н,%: 4,91 Вирахувано: С,%: 51,28; N,%: 11,96; Н,%: 4,88 ІЧ-спектр у КВr, см-1: 3382, 2996, 1730, 1708, 1698, 1610, 1546, 1377, 1297, 1182, 1103, 1042, 974, 773 ПМР-спектр (м.ч.): 10,77 (2Н, с, NHCOCONH), 7,99-7,91 (4Н, кв, Аr-Н) 4,35 (2Н, м, АrСООСН2СН3), 4,20 (2Н, м, NHNHCOCOOCH2CH3), 1,30-1,24 (6Н, м, СН3 2). Rf=0,59 в системі розчинників етанол - діоксан - хлороформ - гексан (2:0,5:0,5:2). Приклад 2 Анальгетичну дію етилового ефіру 4карбетокси-оксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти (І) в порівнянні з вольтареном та анальгіном вивчали на моделі оцтовокислих корчів у щурів, яка дозволяє опосередковано оцінити вплив речовин на синтез та визволення медіаторів болю: брадикініну, серотоніну, гістаміну, простагландинів. Оцінку периферичної анальгетичної дії нової сполуки І та препаратів порівняння вольтарену, анальгіну проводили на білих щурах масою 180200г по 6 тварин у групі. Корчі викликали внутрішньочеревним введенням 0,7% розчину оцтової кислоти з розрахунку 1,0мл на 100г маси тварини через 30хв після внутрішньошлункового введення досліджуваних речовин. З метою визначення ЕД50 на цій моделі заявлену сполуку І вводили перорально в дозах 1,0, 5,0 та 10,0мг/кг. Контрольна група тварин одержувала еквівалентну кількість розчинника. Введення альгогену викликало розвиток корчів. Підрахунок кількості "корчів" починали через 15хв після введення оцтової кислоти та проводили протягом 15 хвилин. Анальгетичну активність заявленої сполуки І та препаратів порівняння оцінювали за їх здатністю зменшувати кількість корчів у дослідній групі щурів у порівнянні з контрольною і виражали у %. Величини ЕД50 та їх довірчі інтервали розраховували з використанням метода найменших квадратів. Результати експерименту наведені у таблиці 1. Таблиця 1 Анальгетична активність та токсичність етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти (І), прототипу в порівнянні з вольтареном та анальгіном Сполука І Прототип Вольт арен Анальгін 2727,27 DL50, мг/кг (в/шлунково) 0,55 >1500 Відносний терапевтичний індекс за анальгіном >125,33 72,00 21,76 DE50, мг/кг 3,31 1,00 T.I. Dl50 DE 50 Не виявляє 5,00 55,0 360 1197 Результати проведеного дослідження свідчать про те, що сполука І виявляє виражену анальгетичну дію, його DE50=0,55мг/кг та переважає DE50 препарату порівняння вольтрену, яка дорівнює 5мг/кг, у 9,1 рази. Враховуючи вищенаведене, можна зробити припущення про пригнічення новим похідним (І) медіаторів болю, таких як гістамін, серотонін, брадикінін та простагландини. За широ тою терапевтичного ефекту сполука І перевищує вольтарен в 37,86 рази, а анальгін в 125,33 рази. Прототип анальгетичної дії не проявляє. Приклад 3 Протизапальну дію нової сполуки в порівнянні з вольтареном вивчали на моделі ексудативного карагенінового набряку стопи у білих щурів масою 180-200г. Набряк викликали субплантарним вве 5 11847 денням 0,1мл 1% розчину карагеніну в одну із задніх кінцівок тварин дослідних та контрольних груп через 1 годину після введення препарату порівняння вольтарену у дозі 8,0мг/кг DE50 антиексудативної дії та заявленої сполуки у дозі DE50=1,1мг/кг. Контрольна група щурів одержувала еквівалентну кількість розчинника. Про розвиток набряку судили за збільшенням об'єму стопи, який 6 вимірювали в динаміці через 1; 2; 3; 4 і 5 годин за допомогою механічного онкометра. Протизапальну дію нової сполуки І та препарату порівняння виражали у % і визначали за здатністю зменшувати набряки у дослідних тварин в порівнянні з контрольними. Результати дослідження наведені в таблиці 2. Таблиця 2 Протизапальна активність та токсичність етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти (І), прототипу в порівнянні з вольтареном І Прототип Вольтарен DE50, мг/кг DL50, мг/кг (в/шлунково) 1,1 6,40 8,00 Сполука >1500 8130 360 Результати проведеного дослідження свідчать про значну протизапальну дію нової сполуки - її DE50 дорівнює 1,1мг/кг та переважає DE50 препарату порівняння вольтарену у 7,3 рази (8мг/кг). За широтою терапевтичної дії етиловий ефір 4карбетоксиоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти (І) перевищує вольтарен в 30,3 рази, а прототип в 1,07 рази. T.I. Dl50 DE 50 1363,64 1270,31 45,00 Відносний терапевтичний індекс за вольтареном 30,30 28,23 1 Приклад 4 Антибактеріальну дію етилового ефіру 4карбетоксиоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти вивчали за відношенням до шлункової кислотостійкої бактерії Helicobacter pylori, та кишкових бактерії роду кампілобактер Campylobacter jejuni i Campylobacter festus методом дифузії в агар. Результати вивчення антибактеріальної дії етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти та де-нолу описані у таблиці 3. Таблиця 3 Антибактеріальна активність етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти (І), прототипу та де-нолу у відношенні Helicobacter pylori, Campylobacter jejuni та Campylobacter festus Сполука І Прототип Де-нол Діаметр зони затримки росту мікроорганізмів, мм Н. pylori С. jejuni С. festus 32 32 32 15 17 14 18 17 18 Розведення 1% 1% 1% Встановлено, що етиловий ефір 4карбетоксиоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти (І) має антибактеріальну активність, яка перевищує в 1,78-1,88 рази препарат де-нол та в 1,882,29 рази прототип. Приклад 5 Фунгістатичну активність етилового ефіру 4карбетоксиоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти (І) вивчено на рідкому живильному середовищі Сабуро методом серійних розведень по відношенню штаммів Candida albicans та Trichophyton gipseum. Результати вивчення протигрибкової дії етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти (І), прототипу та гризеофульвіну описані в таблиці 4. Таблиця 4 Фунгістатична активність етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти (І), прототипу та гризеофульвіну Сполука І Прототип Гризеофульвін Candida albicans 31,2 Штами грибів МПК (мкг/мл) Trichophyton gipseum 31,2 Не виявляє 400 Як видно за даними таблиці 4 сполука І за фунгістатичною активністю відносно штаму Trichophyton gipseum перевищує гризеофульвін у 12,82 рази, а також інгібує ріст грибів Candida albicans в концентрації 31,2мкг/мл. Прототип такої дії не проявляє. Таким чином, заявлена сполука - етиловий ефір 4-карбетокси-оксанілоїлгідразиду щавлевої Комп’ютерна верстка А. Попік кислоти проявляє комплексну біологічну дію при низькій токсичності і можуть знайти застосування в терапевтичній практиці для лікування патологічних станів, що супроводжуються набряком, больовим синдромом, виразкової хвороби шлунку, асоційованої з хелікобактерною інфекцією, а також при грибкових інфекціях. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601