Диглюкозиламонієва сіль етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти, яка проявляє протизапальну, аналгетичну, гастропротекторну та антибактеріальну активність

Оши, d99otо vw MKI: C07H5/06, A 61 К 31/70 Диглюкозиламонієва сіль етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти, що проявляє протизапальну, аналгетичну, гастропротекторну та антибактеріальну активність. Даний винахід відноситься до хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема до синтезу диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти формули: с А .о Г" ҐОС2 Н5 N=C N С-С 6- н б" ос2н5 NH3 сн2он яка проявляє протизапальну, аналгетичну, гастропротекторну та антибактеріальну активність. Пошук нових протизапальних, аналгетичних, гастропротекторних та антибактеріальних засобів є актуальною проблемою сучасної медицини. В якості препаратів порівняння за фармакологічною активністю використовували вольтарен, індометацин, аналгін, де-нол та циметидин (Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Медицина, 1997. - Т.1. - С. 161, 172, 173, 285, 314). Головним недоліком препаратів порівнянння є моноспрямованість фармакологічної дії, досить висока токсичність та наявність побічних ефектів. За прототип обрана глюкозиламонійна сіль етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти, яка проявляє аналгетичну, антиалергічну, протишокову та ранозагоюючу активність і є структурним аналогом (Пат. №1471528 СССР МКИ4 С07Н5/06, А 61 К 31/70; 1992). 2 Перевагою запропонованої сполуки є її комплексна фармакологічна дія, яка перевищує за протизапальною активністю вольтарен, індометацин, прототип у 61,9, 210,5, та 11,16 рази відповідно; за аналгетичною дією вольтарен, аналгін, індометацин, прототип у 19,9, 110,7, 155 та 2,15 рази відповідно; за гастропротекторною активність перевищує дію циметидину в 2 рази, а також проявляє антибактеріальний ефект у відношенні Helicobacter pylori, Campylobacter jejuni та Campylobacter fetus на рівні прототипу, та перевищує активність де-нола в 1,7 рази. В основу винаходу постановлено завдання по створенню нової хімічної сполуки, що проявляє високу протизапальну, аналгетичну, гастропротекторну та антибактеріальну активність. Речовина, яка заявляється, утворена взаємодією етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду з 0-(+)-глюкозаміном у співвідношенні 1:2. Встановлене завдання вирішується синтезом нової хімічної сполуки диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти. Отримана сполука має білий колір, погано розчинна у воді, 95% етанолі, мало розчинна у ДМФА та оцтовій кислоті. Структура диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти підтверджена за допомогою елементного аналізу, ІЧ-спектрів, якісними реакціями. Винахід ілюструється наступним прикладом: Приклад 1: 3,51 г (0,01 моль) етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти розчиняють в 50 мл диметилформаміду, нагрівають до 40 °С та додають 50 мл етанолу (розчин "А"). Одночасно готують розчин "Б": 0,8 г (0,02 моль) натрію гідрат окису розчиняють в 80 мл води, додають 4,3 г (0,02 моль) Б-(+)-глюкозаміну гідрохлориду і нагрівають до 40 °С. Розчин "Б" при перемішуванні додають до розчину "А", суміш охолоджують протягом 10 годин. Осад, що випав, отфільтровують, промивають водою, сушать. Вихід 5,13 г C27H4iN5Oi7 72,5%. Т. топл. > 300°С М.м. 707,648 Знайдено: С, % 45,9К H,%JL73, N,% 9,95 Розраховано: С, % 45,83, Н,% 5,84, N,% 9,90 14- спектр у КВг, см"1: 3320 (ион), 3260 (uNH), 2990, 2950, 2900 (u+NH3), 1715 (uco-ефір), 1690, 1610 (осо-амід), 1580, 1505, 1450 (u_N=c_0), 1530, 1420 (ис~с), 1060, 1030 (Dc-o-c). Приклад 2: Вивчення протизапальної активності диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти проводилося за методою формалінового та карагенінового набряку на щурах. Результати вивчення протизапальної активності та токсичності диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти, прототипу, вольтарену, індометацину описані у таблиці №1. Як видно з даних таблиці №1, диглюкозиламонієва сіль етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти має виражену протизапальну активність та по широчині терапевтичної дії перевищує вольтарен, індометацин у 61,9 та 210,5 рази, а прототип у 2,15 рази. Вона менш токсична ніж вольтарен, індометацин та прототип у 62,1, 111,1 та 1,16 рази відповідно. Приклад 3: Вивчення аналгетичної активності диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти проводилося за методою "оцтових корчей" у білих лабораторних мишей масою 18-20 г. Результати вивчення аналгетичної активності та токсичності диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти, прототипу, вольтарену, індометацину та аналгіну описані у таблиці №2. Таблиця № 1 Протизапальна активність в умовах експериментального формалінового і карагенінового запалення та гостра токсичність диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти, прототипу, вольтарену та індометацину Сполуки ED5o в умовах ED5o в умовах формалінового карагенінового в умовах перо умовах перо запалення, запалення, мг/кг рального вве рального вве індекс за дення, мг/кг 5220 652,5 індометацином 210,5 мг/кг Диглюкозиламонієва сіль етилового ефіру 4-карб LD5o для мишей LD50 для щурів в Терапевтичний Відносний те дення, мг/кг 4650 індекс* LD5o/ED5O рапевтичний 5,6 8 Прототип 15,2 16,4 3900 4500 274,4 88,5 Вольтарен 8 8 350 84 10,5 3,4 Індометацин 2 15 30 47 3,1 1 етоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти Терапевтичний індекс розрахован за результатами дослідів на щурах Таблиця 2 Аналгетична активність диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти у порівнянні з прототипом, вольтареном, індометацином та аналгіном Сполука Диглюкозиламоніева сіль етилового ефіру 4карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти Прототип Вольтарен Аналгін Індометацин ED5o за аналгетичним ефектом, мг/кг LD50 для мишей, мг/кг Терапевтичний індекс Відносний терапевтичний індекс за індометацином 2,0 4650 2325,0 155,0 3,6 3,0 55,0 2,0 3900 350 1197 30 1083,3 116,6 21,8 15,0 72,2 7,8 1,4 1,0 Як видно за даними таблиці №2, диглюкозиламонієва сіль етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти за широтою аналгетичної дії перевищує препарати порівняння: вольтарен, аналгін, індометацин в 19,9, 110,7, 155 рази відповідно, а прототип в 2,15 рази. Приклад 4: Антибактеріальну дію диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти вивчали за відношенням до шлункової кислотостійкої бактерії Helicobacter pylori, та кишкових бактерій роду кампілобактер Campylobacter jejuni та Campylobacter fetus методом дифузії в агар. Результати вивчення антибактеріальної дії диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти, прототипу та де-нолу описані у таблиці №3. Таблиця З Антибактеріальна активність диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти, прототипу та де-нолу у відношенні до Helicobacter pylori, Campylobacter jejuni та Campylobacter fetus Сполуки Розведення Диглюкозиламонієва сіль етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти Прототип Де-нол 1% 1% 1% Діаметр зоны затримки росту мікроорганізмів, мм Н. pylori С. jejuni С. fetus ЗО ЗО ЗО 32 18 32 17 ЗО 18 Встановлено, що диглюкозиламонієва сіль етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти має антибактеріальну, зокрема антихеликобактерну активність, яка перевищує в 1,7 раза препарат порівняння де-нол, та має антибактеріальний ефект на рівні прототипу. Приклад 5: Гастропротекторну активність диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти вивчали на алкогольно-преднізолоновому ураженні слизової оболонки шлунку щурів, яку викликали сполученим введенням 80% етилового спирту з розрахунку 0,8 мл на 100 г маси тіла тварин та преднізолону в дозі 20 мг/кг. Результати вивчення гастропротекторної дії диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти, прототипу та циметидину описані у таблиці №4. Досліди показали, що гастропротекторна дія диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти перевищує активність циметидина на 49%, а прототипа на 17,6%. Таблиця 4 Гастропротекторна активність в умовах алкогольно-преднізолонового ураження шлунку щурів диглюкозиламонієвої солі етилового ефіру 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти, прототипу та циметидину Сполуки Доза, мг/кг % тварин з виразками Кількість вира- Площа виразок Вираковий Гастропро зок на одну індекс текторна активність, % 96,6 20,0 50,0 тварину 0,7±0,10* Прототип 20,0 55,56 1,6±0,56* Контрольні тварини — Циметидин 50,0 Диглюкозиламонієва сіль етилового ефіру в балах 1,4±0,41* 0,70 7,8±2,20* 4,32 4-карбетоксиоксанілоілгідразиду щавлевої кислоти 100,0 77,8 * - р