Спосіб одержання днк-вмісного вуглецевого гемосорбенту

Изобретение относится к области гемосорбции, конкретно к технологии получения гемоиммуносорбентов, может быть использовано для лечения иммунозависимых заболеваний, патогенез которых связан с присутствием в крови повышенного количества антиДНК-антител и позволяет повысить в 80 раз содержание ДНК в гемосорбенте при сохранении его сорбционных характеристик. Сущность способа з а ключается в обработке углеродного г е мосорбента раствором ДНК в физиологическом растворе хлорида натрия при их массовом соотношении, равном 5060:1 г последующую сушку и УФ-облуче7 ниє в абсолютном спирте в течение 30-35 мин. 1 з.гі. ф-лы, 3 т а б л . . ОЭ 19-Ї I 1398160 (V по бензолу 0,9 с м э / г , размер гранул 0,4-0,6 мм) смешивают с 7 мл 0,9%-ного раствора NaCl, содержащего 15 мг тимусной ДНК теленка с о отношение ДНК : гемосорбент=1:50, помещают на чашку Петри и высушивают в токе холодного воздуха, а затем ресуспендируют в 20 мл абсолютного этанола и облучают под ультрафиолетовой лампой ДБ-30 на расстоянии 10 см от источника в течение 30 мин. После удаления спирта на воронке Бюхнера полученный адсорбент промывают растворами по примеру 1. В э т а ноле и полученных элюатах определяют концентрацию ДНК по методу Спирина. Целью изобретения является повыВ результате получают гемосорбент, шение содержания ДНК в гемосорбенте при сохранении его сорбциоиных хараксодержащий на 1 г углеродной матритеристик . цы 17,0 мг ДНК. 2 0 П р и м е р 3 . 750 мг синтетиП р и м е р 1. 750 мг синтетического активированного угля СКН-2К V5 ческого активированного угля СКС /Vs по бензолу 1,0 с м 3 / г , размер гранул по бензолу 0,75 г, размер гранул 0,5-1 мм) смешивают с 10 мл 0,9%-ного 0,6-1,2 мм/ смешивают с 7 мл 0,9%-нораствора- NaCl в содержащего 12,7 мг 25 го раствора NaCl, содержащего 12,5 мг тимусной ДНК теленка,(массовое с о тимусной ДНК т е л е н к а , помещают на отношение ДНК игемосорбента равно чашку Петри и высушивают в токе хо1:60^ помещают на чашку Петри и вылодного воздуха, а затем ресуспенсушивают в токе холодного воздуха, "дируют в 20 мл абсолютного этанола а затем ресуспендируют в 20 мл абсои облучают под ультрафиолетовой ламлютного этанолу и облучают под ультра' 30 пой ДБ-30 на расстоянии 10 см от и с і точника в течение 30 мин. После удафиолетовой лампой ДБ-30 на расстоянии ления спирта на воронке Бюхнера полу10 см от источника в течение не меченный адсорбент промывают растворанее 30 мин, а затем удаляют спирт на -.- ми по примеру 1 . В этаноле и элюатах вор онке Бюхнера. определяют концентрацию ДНК по метоДля определения прочности связыду Спирина. В результате получают вания ДНК с матрицей полученный соргемосорбент, содержащий 13,5 мг ДНК бент промывают на той же воронке на 1 г углеродной матрицы. 50 мл 0,15 М раствора NaCl, 50 мл ДО П р и м е р 4 . К 750 мл угля 1,5 М раствора NaCl и 6 М раствора СКН-2К, 750 мг угля СКС и 750 мг мочевины. Б этаноле и перечисленных угля СУГС соответственно прибавляют элюатах определяют концентрацию ДНК 7 мл раствора ДНК (2 мг ДНК в 1 мл по методу Спирина. Количество иммофизиологического раствора NaCl) и билизированной ДНК вычисляют в примерах 1-3 как разницу между исходным ее дс контактируют в течение 3 ч при комнатной температуре. Через каждый час количеством 9 нанесенным на сорбент, определяют концентрацию ДНК в р а с т в о и количеством препарата, обнаруженре по методу Спирина, которая привеном в этаноле и элюатах, которое придена в табл. 2. ведено п табл. 1. Как видно из примера 4, без УФТаким образом, на углеродной матоблучения иммобилизовать ДНК на углерице зафиксировано 12,7-0,24 мг = родный носитель не удается, концент* 12,56 мг ДНК, что составляет 98% рация ДНК в контактирующем растворе от исходного количества материала. остается на исходном уровне. На 1 г углеродной матрицы удается П р и м е р 5. Проводят излучение иммобилизировать около 16 мг нативкинетики поглощения витамина В п ной ДИК. (м.м, 1355 дальтон) для определения П р и м е р 2. 750 мг синтетиадсорбционной способности полученных ческого активированного угля СУГС по предлагаемому способу сорбентов в Изобретение относится к области гемосорбции, конкретно к технологии получения гемоиммуносорбентов, и может быть использовано для лечения иммунезависимых заболеваний, например, системной красной волчанки и ревматоидного артрита, патогенез к о торых связан с присутствием в- крови повышенного количества анти-ДНК-анти- IQ т е л . Известно, что в подобных случаях очистка крови на специфических адсорбентах, содержащих иммобилизированную ДНК, ведет к снижению концентрации анти-ДНК -антител и улучшению ]с клинического состояния пациентов. 4 1398160 Ф о р м у л а и з о б р е т е н и ясравнении с известным способом и и с ходных углеродных гемосорбентов 1. Способ получения ДНК-содержаСКН-2 К. Витамин Ъп как специальное щего углеродного гемосорбента, вклюмолекулярное вещество очень хорошо чающий обработку углеродного гемопоглощается исходными углеродными сорбента раствором ДНК, последующую адсорбентами, поэтому по степени его сушку и промывку готового продукта, адсорбции можно однозначно судить о т л и ч а ю щ и й с я тем, ч т о , с о сохранении исходных сорбционных целью повышения содержания ДНК в характеристик синтезированных гемо- •0 гемосорбенте при сохранении его сорбJ сорбентов. Результаты по кинетике ционных характеристик, обработку в е поглощения Ъп различными гемосордут раствором ДНК в физиологическом бентами приведены в табл. 3. растворе хлорида натрия, а после . сушки сорбент подвергают ультрафио15 летовому облучению в абсолютном спирКак видно из приведенных данных, те. полученных по предлагаемому способу, ДНК-содержащие гемосорбенты почти 2, Способ по п. t , о т л и ч а ю полностью сохраняют поглотительные щ и й с я тем, что обработку ведут свойства исходной матрицы и содержат при массовом соотношении ДНК и у г л е ЛУ/ в 80 раз больше ДНК на единицу ве-^20 родного гемосорбента равном 1:/50— са углеродного носителя. 60/. Т а б л и ц а Вид раствора Содержание ДНК, мг/мл раствора I СКН-2К Абсолютный спирт 1 СУГС скс 0 ,16 0 ,15 0 , 1 5 М NaCl о. 14 о, 05 0 ,08 0 ,05 1,5 М NaCl 0 0 0 6 М мочевины 0 0 0 Т а б л и ц а Тип с о р б е н т а 2 Концентрация ДНК, м г / м л , з а в р е м я , м и н 60 120 СКН-2К 180 1,87 СКС 1,9 СУГС 1,9 ' 1,8; 1.9 1,9 1,9 1,9 1398160 Т а б л и ц а .Тип сорбента Количество ДНК на 1 г матрицы, мг 3 •Количество витамина В12 /мкг/, поглощенное углем в стандартных условиях из раствора, содержащего 1000 мкг препарата, в течение инкубации (мин) 30 Углеродная матрица СКН-2К 60 250 500 750 820 ДИК-содержащий сорбент СКН-2К/синтезированный по предлагаемому способу/ 16 230 480 700 720 ДНК-содержащий сорбент синтезированный по известному способу 0,2 30 47 65 85 Редактор Е. Полионова Составитель Т. Чиликина Техред М.Дидык Корректор 0. Кравцова Заказ 391/ДСП Тираж 396 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„, д . 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г . Ужгород, ул. Проектная, 4