Спосіб відбору ембріогенних бутонів для біотехнології культури ізольованих мікроспор озимого ріпаку
Номер патенту: 20078
Опубліковано: 15.01.2007
Автори: Климчук Микола Миколайович, Климчук Сергій Миколайович, Попель Сергій Любомирович
Формула / Реферат
Спосіб відбору ембріогенних бутонів для біотехнології культури ізольованих мікроспор озимого ріпаку, що включає визначення оптимального розміру ембріогенних бутонів озимого ріпаку для ізоляції мікроспор шляхом цитологічного вивчення фази розвитку мікроспор у кожної рослини-донора за допомогою світлового мікроскопа, який відрізняється тим, що додатково включає візуальний відбір бутонів з розміром 3-5 мм, що мають зелені чи прозорі (не жовті) пиляки та пелюстки, із співвідношенням розміру пиляка і розміру пелюстки як 2:3 з цитологічним обстеженням тільки однієї типової рослини кожного генотипу донорських рослин.
Текст
Спосіб відбору ембріогенних бутонів для біотехнології культури ізольованих мікроспор озимого ріпаку, що включає визначення оптимального роз 3 20078 4 ядерній фазі (Фіг.1, 2) мають тонкі стінки, прозорі, ції. без жовтого кольору, ядро в центрі клітини і дуже Для практичної перевірки запропонованого дифузне. Звичайно стінки спори не дуже розвинуті способу були використані масові тестування росна цій стадії. лин-донорів із порівнянням фази розвитку мікроСпори в середньоядерній фазі мають розвинуспор і оптимального розміру ембріогенних бутонів. ту зовнішню оболонку, світло-жовтого кольору. Результати проведених досліджень засвідчуЯдро в центрі більш компактного розміру (Фіг.3). ють, що запропонованим способом з використанВ середньоядерній фазі оболонка чітко видна, ням візуального методу відбору можливо отримузабарвлена в насичений жовтий колір; ядра змівати значні обсяги ембріогенних бутонів із щені до периферії клітини, в основному прилеглі стабільними показниками цитологічного розвитку до однієї з тонших долей клітини (Фіг.4). мікроспор в пізній одноядерній фазі. В найближчий час після середньоядерної фаДаний спосіб може мати як промислове застози, ядро мікроспори проходить два швидких діленсування у селекції на якість озимого ріпаку, де дуня. Перше ділення метафази відбувається параже важливо за допомогою ДР зафіксувати окремі лельно біля найближчої стінки спори. Після господарсько-важливі ознаки, так і в науководілення два ядра можна легко розрізнити морфодослідних роботах, де мікроспори озимого ріпаку є логічно. Генеративне ядро залишається порівняно однією з ідеальних одноклітинних моделей для мале і виглядає з досить високою густиною, а ветеоретичних і практичних досліджень в генетиці і гетативне ядро швидко збільшується в розмірах і фізіології олійних культур. стає дифузним (Фіг.5). Перелік Фіг. креслення: Генеративне ядро проходить ще через одне Фіг.1. Ранні одноядерні спори в тетраді. ділення, в метафазі лежить перпендикулярно до Фіг.2. Рання одноядерна фаза: найближчої стінки. В результаті утворюються два - ядро в центрі; малих, ідентичних спермоядра. Вегетативне ядро - екзина бліда. в основному важко бачити на цій стадії (Фіг.6). Фіг.3. Середня одноядерна фаза Як встановлено внаслідок досліджень, мікро- ядро в центрі; спори здатні до ембріогенезису в стадії на Фіг.4, і - екзина тонка; ідентифікувавши їх перший раз в цій стадії, розмір - добре розвинуті лобні долі. бутонів для подальшого масового їх відбору стаФіг.4. Пізня одноядерна фаза новить 3-5мм (Фіг.7). - ядро на периферії; Спосіб конкретного використання. - екзина жовта; Рослини-донори вирощують у кліматичній ка- спора з трьома лобними долями. мері з контрольованим мікрокліматом зі слідуючиФіг.5. Двоядерна фаза ми умовами: - генеративне ядро густе в центрі; 1) 16 годинний фотоперіод (приблизно 10 000 - вегетативне ядро велике і дифузне. люкс на 1м 2 фотосинтетичної радіації); Фіг.6. Триядерна фаза 2) 14°С в періоді світло/темно; - два дуже густих малих спермії; 3) підживлення мінеральними добривами і по- вегетативне ядро не розрізняється. лив щотижнево; Фіг.7 Відбір бутонів. 4) без використання фунгіцидів та інсектициСписок літератури; дів; 1. Dunwell J. M. Pollen, ovule and embrio culture 5) всі відмерлі листки та відкриті бутони квітів as a tool in plant breeding // L.A. Withers and P.G. постійно видаляються; Alderson (Eds.), Plant Tissue and its Agriculture Ap6) рослинам надається достатньо місця для plications. - London: Butterworths, 1985. - P.375-404. росту і розвитку. 2. Kott L.S., Polsony L., Ellis B. and Bewersdorf Для культури ізольованих мікроспор попереW.D. Cytological aspects of isolated microspore culдньо відбирають рослини (за 3-5 днів) з розміром ture of Brassica napus // Can. J. Bot. 66, 1988. бутонів 3-5мм, що мають зелені чи прозорі (не pp.1658-1664. жовті) пильники та пелюстки, із співвідношенням 3. In vitro haploid production in higher plants / розміру пильника/пелюстки як 2/3. Проводять циeditors Mohan Jain S., Sopory S.K., Veilleux R.E.. тологічний аналіз однієї типової рослини кожного Vol.1. - Fundamental aspects and methods. - London: генотипу. Зрізання бутонів проводиться в післяKluwer Academic Publisher, 1996. - 356p. обідній час. Більші і менші бутони зрізаються з 4. Lichter, R. Induction of haploid plants from isoкитиці. Бутони поміщаються в скляні пробірки з lated pollen of Brassica napus Z. // Pflanzenphysiol. кришечками і зберігаються в холодильнику протяVol.105. - 1982 - P.427-434. гом 12 год для подальшої поверхневої стериліза 5 20078 6 7 Комп’ютерна в ерстка В. Мацело 20078 8 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethod of selecting embryogenic buds for biotechnology of isolated microspore culture of winter rape
Автори англійськоюКlуmсhuк Mykola Mykolaiovych, Кlуmсhuк Serhii Mykolaiovych
Назва патенту російськоюСпособ отбора эмбриогенных бутонов для биотехнологии культуры изолированных микроспор озимого рапса
Автори російськоюКлимчук Николай Николаевич, Климчук Сергей Николаевич
МПК / Мітки
Мітки: відбору, ембріогенних, ріпаку, ізольованих, бутонів, мікроспор, культури, спосіб, озимого, біотехнології
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/4-20078-sposib-vidboru-embriogennikh-butoniv-dlya-biotekhnologi-kulturi-izolovanikh-mikrospor-ozimogo-ripaku.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб відбору ембріогенних бутонів для біотехнології культури ізольованих мікроспор озимого ріпаку</a>
Попередній патент: Пружна муфта
Наступний патент: Спосіб лікування хворих з рецидивними та рецидивуючими пахвинними грижами після виконаної раніше грижопластики по постемпському
Випадковий патент: Спосіб лікування регматогенних відшарувань сітківки