Біопрепарат для лікування і профілактики захворювань слизових оболонок і шкірних покривів

Біопрепарат для лікування і профілактики захворювань слизових оболонок і шкірних покривів, що містить штам мікроорганізму та стабілізатор, який складається з сахарози і желатини, який відрізняється тим, що як штам мікроорганізму він містить штам Aerococcus viridans 167 при такому вмісті компонентів, мас.%: Штам Aerococcus viridans 167 (у кількості не менше 4*108 кл/г) 3-7; Стабілізатор: Сахароза 87-89; Желатин 6-8. Винахід належить до медичної фармакології, зокрема до виробництва лікувальних препаратів для лікування хворих з гострими і хронічними захворюваннями слизових оболонок і шкірних покривів переважно стафілококової етіології: фурункули, карбункули, гідраденіти, мастити і т.д. Виявляє терапевтичний ефект також при інфекціях, що обумовлені іншими умовно-патогенними бактеріями. Препарат справляє лікувально-профілактичну дію при дизбактеріозах кишечнику, бактеріоносіях, хронічних колітах. У теперішній час відома велика кількість біопрепаратів для внутрішнього вживання, які створені на основі штамів мікроорганізмів, наприклад, біфідум-, лакто- і колібактерін, що містять штам йпредставники індігенної кишкової мікрофлори людини. Біфідумбактерін - це ліофілізована жива культура одного з трьох виробничих штамів: B.bifidum791, B.bifidum-1 та B.bifidum ЛВА-3. Використовується переважно при порушенні кишкової анаеробної флори. Головним фактором ефективності цього препарату є антагоністична активність, обумовлена сильним кислотоутворюванням, продук цією лізоцима. Створюючи кислу середу в кишечнику, препарат стримує розмноження патогенної і умовно-патогенної флори, нормалізує обмінні процеси [1]. При порушенні кишечної аеробної мікрофлори перевага віддається лактобактеріну. Виробничими штамами цього препарату виступають дві культури: L.fermentum 90T-CU та L.plantarum 8P-A3. Механізм дії лактобактеріну in VIVO близький до біфідумбактеріну і обумовлюється сильним кислотоутворюванням. Лактобактерін ефективно діє при лікуванні гострих та хронічних кишкових інфекцій, корекції дисбактеріозів, сприяє процесам репарації слизової оболонки кишечнику [1]. У переважної кількості випадків показанням до застосування колібактеріну є дизбактеріоз. Препарат вживають також при хронічних формах дизентерії на фоні дизбактеріозу, при долікуванні реконвалєцентов у випадку загрози переходу процесу у хронічний та для попередження бактеріоносії. Основою для виготовлення колібактеріну служить штам М-17, який виділен з живої культури антагоністично активної кишкової палички [1]. Основним недоліком згаданих препаратів є те, що їх галузь застосування обмежується лікуваль (19) UA (11) 32120 (13) C2 (21) 98126882 (22) 25.12.1998 (24) 15.10.2002 (46) 15.12.2000, Бюл. № 7, 2000 р. (72) Кременчуцький Геннадій Миколайович, Серебряков Микола Дмитрович, Бицький Володимир Васильович, Лебідь Микола Семенович, Хрипунов Валерій Петрович, Онда Любов Володимирівна (73) Товариство з обмеженою відповідальністю "Віріданс" (56) SU, A1, 1491885, 07.07.1989RU,C1, 2088656, 27.08.1997 Горбунова М.Л., Лобанова Е.И, Дрозд Т.И., Турлюн С.А., Маганчук В.П., "Влияние Aerococcus viridans на биологические свойства Staphylococcus aureus", Микробиологический журнал, 1989, том 51, № 5, С. 77-81Горбунова М. Л., Дрозд Т.Е., Ковальчук В.К., Тр усов В.И., Сопиль 3 32120 4 ним і профілактичним впливом при кишкових інфевостей, зменшувалась кількість клітин в одній дозі. кціях та порушенні кишкової мікрофлори, завдяки Проведеною роботою встановлено, що при тому, що препарати містять штами-представники складі: виключно індігенної кишкової мікрофлори і виявШтам Aerococcus viridans 167 (у ляють антогоністичну дію і антагоністичну спромокількості не менш 4 * 108Кл/г) 3 - 7; жність до колонізації тільки до слизових оболонок Стабілізатор: кишечнику. Сахароза 87 - 89; Відомий біопрепарат, який містить аналогічно Желатин 6 – 8, тому, що заявляється, штам мікроорганізму та вказаним співвідношенням забезпечується високі стабілізатор, який складається із сахарози і желаадгезійні властивості, антагоністична активність, тина [2]. Крім того, до складу відомого біопрепаразалишається стійким високий рівень оксидної акту входить сухий залишок середовища росту з тивності з шаром зони окислення крохмалю навкобіологічно активними речовинами. ло штри ху аерокока не менше 25мм. Цей біопрепарат є найбільш близьким до заБіфункціональність препарату, що заявляєтьявляемого за сукупністю суттєвих ознак і його вибся, обумовлена його адгезійними властивостями, рано прототипом. комплексом біологічно активних речовин, що синВиробничим штамом прототипу виступає штам тезуються аерококами, які складають основу преLactobacillus acidophilus, який визначає спектр його парату і визначають його активність. вживання - сприяння нормалізації мікрофлори Штам Aerococcus viridans 167 належить до ІІ слизових оболонок. відділу, роду Aerococcus група 17, виду Aerococcus Співвідношення компонентів відомого препаviridans n. Штам виділений із грудного молока і рату таке, об.%: уявляє собою поліморфні грам позитивні кокі, розШтам Lactobacillus acidophilus 58; ташовані попарно, скупченнями і ріже одиночно. Стабілізатор: Одиночні клітини правильно круглої форми, сереСахароза 10; дніх та більш крупних розмірів, не утворюють спор Желатин 1; і капсул, нерухомі. Мїкроаерофільні. Оптимум теСухий залишок середовища росту з мпературного росту (36 ± 1)°С. На м'ясобіологічно активними речовинами 31. пептонному бульйоні зростають, утворюючи повеШтам лактобактерій вирощують на рідкорхневу зону. Оптимальний ріст аерококів спостеріму середовищі росту з pH 6,2 - 6,4 на протязі 36 гається через 24 години при (36 ± 1)°С на м'ясогодин у термостаті в бактеріологічних пробірках, пептонному агарі. які містять не менш 0 - 10мл середовища. ОптиСклад середовища для культивування штамів мальна температура 37,5°С. Посівна доза - 1 мл такий: 36-годинної культури. Склад середовища для виАгар мікробіологічний ГОСТ 17206-84 22г; рощування штаму Lactobacillus acidophilus такий: Глюкоза ГОСТ 6038-79 40г; К2НРО4 2г; Пептон сухий ферментативний для БаMgSO4 0,2г; ктеріологічного призначення ГОСТ Цистеін (НСІ) 0,2г; 13805-76 10г; Цитрат амонію 2г; Вода дистильована ГОСТ 6709-72 1л. Ацетат натрію 5г; Для приготування середовища дистильовану Глюкоза 20г; воду змішують з пептоном та агаром. Суміш виMnSO4 37,9г; тримують 20 - 30 хвилин при кімнатної температурі Пептон 10г; для набухання агару і кип’ятять 15 - 20 хвилин до Дріжджовий автол ізат (Di fco) 5г. його повного розплавлення. Далі 30% розчином Печінковий відвар 100мл; оцтової кислоти встановлюють рН = 3,8. Після гоТвін-80 1мл; динного відстоювання середовище декантують Дистильована вода до 500мл; через ватно-марлевий фільтр і додають глюкозу, Гідролізат молока, pH 6,2 500мл. після чого стерилізують при температурі (110 ± Далі суспензію мікроорганізмів центрифугують 1)°С на протязі 30 хвилин. при 300 об./хв. На протязі 15 хвилин. Осадок реНа поживному середовищі виростають колонії суспензують в стабілізаторі і одержану суміш роздіаметром 0,5 - 2,0мм у вигляді плоских безбарвливають до ампул, після чого піддають ліофільноних дисків. По скінченні строку інкубації здійснюму висушуванню. Після ліофільного висушування ють змив мікробної маси у асептичних умовах ампула, що містить одну дозу препарату, повинна шляхом додання водного розчину стабілізатора. мати не менш 103 життєздатних клітин. Мікробну суспензію збирають у бутель і провадять В основу винаходу поставлено задачу створибактеріоскопічний та бактеріологічний контроль ти біопрепарат з високим адгезійними властивосчистоти культури. тями і широким спектром антагоністичної дії на Препарат розливають по 1 або 2 дози в ампуоснові штаму Aerococcus viridans 167, що дозволи типа ШП-5-НС-1 або ШП-5-НС-3 по ОСТ 64-2лить застосувати біопрепарат для лікування та 485-85 або по 25 - 30 доз у пляшки (ОСТ 10782-85) профілактики захворювань як слизових оболонок, ємністю 250мл, ліофілізують у вакуум-сушильних так і шкіряних покривів. апаратах і герметизують. Одна доза (1мл) містить Всі випадки проведення аналогії з прототипом не менш 2 * 108 життєздатних аерококів. Аякий містив сахарози 10% та желатину 1% не прибактерін уявляє собою висушені ліофільно живі звели до позитивного результату. Залишалось вегетативні клітини бактерій, стабілізатор - желазниження активності, зниження адгезійних властитин і сахарозу, сухі компоненти поживного середо 5 32120 6 вища і біологічно активні речовини, що продуцюмогенна суспензія. А-бактерін зберігає увесь комються штамом: антиоксидантні ферменти, аміноплекс біологічної активності штамів, що складають кислоти, лізоцим, антибіотики, екзополісахариди, його основу. Нешкідливий у дозах, які у десять лектатооксидазу. разів перевищують рекомендовані для лікування. Препарат розчинюється протягом двох хвилин Препарат зберігають у сухому захищеному від при періодичному потрушуванні пляшки або ампусвітла місці при температурі (4 - 10)°С. Термін ли після додання розчинителя (кип'ячена або дисзберігання - два роки. У таблиці 1 наведені показтильована вода, 0,9% розчин хлориду натрію) із ники антимікробної активності прототипу та препарозрахунку 1мл розчинителя на одну дозу препарату, що заявляється. рату. При розчиненні утворюється непрозора гоТаблиця 1 № п/п 1. 2. Компоненти, мас.% Штам мікроорганізму Сахароза Aerococcus viridans 167 ПРОТОТИП 1 90 3. 3 89 4. 5. 6. 5 7 9 88 8786 Біопрепарат, що заявляється, випробували в стоматологічної клініці при лікуванні запалень слизових оболонок порожнини рота, зокрема гострого виразкового гінгівостоматиту. Для лікування були укомплектовані дві групи хворих: основна - 29 хворих і контрольна - 25 хворих. У контрольній групі хворих лікування провадили загальноприйнятими лікувальними препаратами з урахуванням клінічної течії захворювання і Желатин 9 8 7 6 5 Антимікробна активність, мм Тест-штам Vibrio NAG 29 30 31 33 30 30 фази раневого процесу. В основній групі після первісної обробки на уражені галузі накладали ватні тампони, змочені препаратом, що заявляється, на фізіологічному розчині хлориду натрію на 15-20 хвилин, після чого у важких випадках течії захворювання вживали ротові ванночки 1% водного розчину нікотинової кислоти. Про ефективність препарату свідчать показники таблиці 2. Таблиця 2 № пп. І ІІ Клінічна течія Середня ступінь течії, днів Різниця в днях T P Важка ступінь течії, днів Різниця в днях T P Очищення виразки Основна група Контрольна груМ± m па М ± m 1,83 ± 0,2 3,27 ± 0,36 1,44 3,5 < 0,001 2,7 ± 0,19 4,0 ± 0,33 1,3 3,41 < 0,001 При цьому: М ± m середнє значення величини і помилка; t критерій Ст'юдента (певність); p імовірність помилки. Біопрепарат був використай у відділенні патології немовлят. Дитина мала опрілості третього ступеня з некротичними змінами. Після зрошування пораз розчином біопрепарату відзначалося швидке загоювання з подальшою епітелізацією без застосу Епітелізація Основна група Контрольна груМ± m па М ± m 4,42 ± 0,19 6,0 ± 0,33 1,58 4,15 < 0,001 5,18 ± 0,27 6,91 ± 0,37 1,72 3,76 < 0,001 вання стереотипних методів лікування. Тривалість лікування склала сім днів, що у півтора-два рази швидше, ніж з використанням традиційного лікування. Джерела використаної інформації: 1. Монографія проф. Л.Г.Перетц. Значення нормальної мікрофлори для організму людини. Гл.ХV. Медгіз, 1955, Москва. 2. A.c. СРСР № 1491885, заявл. 28.06.85, опубл. 07.07.89. 7 32120 ДП «Український інститут промислов ої в ласності» (Укрпатент) вул. Сім’ї Хохлов их, 15, м. Київ , 04119, Україна (044) 456 – 20 – 90 ТОВ “Міжнародний науков ий коміт ет” вул. Артема, 77, м. Київ , 04050, Україна (044) 216 – 32 – 71 8