Спосіб оцінки ефективності лікування спонтанної артеріальної гіпертензії (в експерименті)

Спосіб оцінки ефективності лікування спонтанної артеріальної гіпертензії (в експерименті), що включає проведення морфометричного аналізу гістохімічних препаратів, який відрізняється тим, що визначають площу та кількісну щільність ядер, концентрацію РНК в ядрах і цитоплазмі кардіоміоцитів щурів до та після лікування біпрололом та його комбінацією з кверцетином, тіотриазоліном, одержані результати порівнюють з контролем і при нормалізації показників оцінюють ефективність препарату. (19) (21) u200901350 (22) 18.02.2009 (24) 12.05.2009 (46) 12.05.2009, Бюл.№ 9, 2009 р. (72) ДОВГАНЬ РОМАН СТЕПАНОВИЧ, UA, СТЕЧЕНКО ЛЮДМИЛА ОЛЕКСАНДРІВНА, UA, КУФТИРЕВА ТЕТЯНА ПАВЛІВНА, UA, ЧЕКМАН ЇВАН СЕРГІЙОВИЧ, UA (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ІМЕНІ О.О. БОГОМОЛЬЦЯ, UA 3 41328 Однак, цей спосіб має недоліки: він має низьку інформативність і малу чутливість, потребує тривалого виконання та незручний у використанні. Задача корисної моделі, що заявляється, полягає в розробці способу, який передбачає комплексне застосування біпрололу та його комбінацій з препаратами метаболічного плану та показника, що. дозволить проконтролювати якість лікування артеріальної гіпертензії і покращити ефективність фармакотерапії даного захворювання. Технічний результат, який досягається, полягає у підвищенні ефективності лікування. Поставлена задача досягається тим, що у відомому способі, який перед бачає проведення морфометричних досліджень, згідно корисної моделі, визначають площу та кількісну щільність ядер, концентрацію РНК в ядрах цитоплазми кардіоміоцитів щурів до та після лікування біпрололом та його комбінацєю з кверцетином, тіотриазоліном, одержані результати порівнюють з контролем і при нормалізації показників оцінюють ефективність лікування. Спосіб здійснюється наступним чином: Досліди проведені на статевозрілих білих щурах обох статей з початковою масою 150 - 240 г. Усього досліджено 10 нормотензивних WistarKyoto rats (WKY) та 70 щурів з спонтанною артеріальною гіпертензією лінії НІСАГ. Експериментальні тварини поділили на 7 груп: І інтактна група 10 нормотензивних щурів. II - контрольна група 10 щурів з спонтанною артеріальною гіпертензією. Ill група - 10 щурів з НІСАГ, яким уводили біпролол в дозі 20мг/кг. IV група - 10 щурів з НІСАГ, яким уводили кверцетин в дозі 50мг/кг. V група - 10 щурів з НІСАГ, яким уводили біпролол 20мг/кг та кверцетин 50мг/кг. VI 4 група - 10 щурів з НІСАГ, яким уводили тіотриазолін в дозі 50мг/кг. VII група - 10 щурів з НІСАГ, яким уводили біпролол 20мг/кг та тіотриазолін 50мг/кг. Дослідний медикамент додавали до щоденного раціону одноразово щоденно на протязі 90 діб. Матеріал фіксували у 10% нейтральному формаліні і після гістологічної проводки в батареї спиртів зростаючої концентрації тканину укладали в парафін. Зрізи завтовшки 5 мікрон виготовляли на ротаційному мікротомі, депарафініровали і забарвлювали галлоцианін-хромовим галуном для визначення нуклеїнових кислот по Ейнарсону. Морфометричні дослідження проводили на мікроскопі Axioskop (Ziess, Німеччина). Зображення клітин, отримувані на мікроскопі, за допомогою високочутливої відеокамери Cohu-4922 (COCHU Inc., США), вводили в комп'ютерну программноапаратну систему цифрового аналізу зображення VIDAS. Аналіз зображень проводили в напівавтоматичному режимі. Визначалися площа та кількісна щільність ядер, концентрація РНК в ядрах і цитоплазмі кардіоміоцитів експериментальних тварин. Результати дослідження та їх обговорення Встановлено, що в міокарді нормотензивних щурів кількість ядер кардіоміоцитів складає 2 2474±86 на 1 мм при їх середній площі 14,02±0,29 2 мкм . При цьому вміст РНК в ядрах дорівнює в середньому 270,6±1,5 мЕоп, а у цитоплазмі 21,7±0,2 мЕоп. У щурів з спонтанною артеріальною гіпертензією (САГ) кількість ядер в кардіоміоцитах суттєво, майже у 7 разів перевищує цей показник у нормі і дорівнює 14302±349 на 1 мм2, тоді як середня площа ядер незначно, але статистичне ймовірно перевищує цей же показник у нормі (табл.). Таблиця Зміни показників, що характеризують кардіоміоцити у міокарді нормотензивних щурів та щурів зі САГ до та після лікування Групи тварин Кількісна щільність ядер, 1/мм 2474±86 14302±349* Щури з WKY Щури з САГ Щури з біпролол Щури з кверцитін Площа ядер, мкм 2 14,02±0,29 15,54±0,38* Концентрація РНК в Концентрація РНК в ядрах, мЕоп цитоплазмі, мЕоп 270,6±1,5 21,7±0,2 59,3±0,7* 21,5±0,1 САГ + 4324±259*,**, 16,53±0,9* 307,2±10,7*,** 103,6±2,5*,** САГ + 6385±262*,** 22,00±0,68*,** 175,7±2,7*,** 50,7±1,5*,** Щури з САГ + біпролол + кверцитін Щури з САГ + тіотриазолін 7916±405*,**,*** 20,38±0,61*,** 151,0±3,0*,**,*** 40,0±1,0*,**,** 3153±229*,**, 10,54±0,57*,** 289,2±8,4*,** 83,3±1,1*,** Щури з САГ біпролол тіотриазолін 3324±76*,**,*** 11,78±0,36*,**,*** 425,0±2,0*,** 131,0±1,0*,**,*** + + * статистичне» достовірна різниця у порівнянні з контролем (Р