Спосіб оцінки мікробіоценозу слизової оболонки ротової порожнини

Спосіб оцінки мікробіоценозу слизової оболонки ротової порожнини, що включає: визначення термінів мікробне число і дефіцит мікробного числа; поділ мікроорганізмів на групи та їх видове представництво; а також числове вираження масивності обсіменіння мікрофлорою через десятковий логарифм, який відрізняється тим, що після посіву матеріалу на кров'яний агар за методом Голда, витримування в термостаті 24 години за t 37 °C, підраховують число колоній на кожному секторі за допомогою лічильника колоній ПСБ та розраховують мікробне число, дефіцит мікробного числа із присвоєнням коефіцієнтів 1, 2, 3 групам мікроорганізмів А, В, С відповідно до зростання їх патогенності, із подальшим обчисленням за формулами: МЧ=А+В+С, де МЧ - мікробне число, А, В, С - складові мікробного числа, що обчислюють за наступними формулами: U 2 41807 1 3 41807 4 Таблиця Мікробна флора порожнини рота в нормі Мікроорганізми Резидентна флора 1. Аероби і факультативні анаероби: 1. S. mutans 2. S. salivarius 3 .S. mitis 4. Сапрофітні нейссерії 5. Лактобактерії 6. Стафілококки 7. Дифтероїди 8. Гемофіли 9. Пневмококки 10. Інші кокки 11. Сапрофітні мікобактерії 12. Тетракоки 13. Дріжжеподібні гриби 14. Мікоплазми 2. Облігатні анаероби: 1. Вейлонелли 2. Анаеробні стрептококки (пептострептококки) 3. Бактероїди 4. Фузобактерії 5. Актиноміцети і анаеробні дифтероїди 6. Спірили і вібріони 7. Спірохети (сапрофітні боррелії, трепонеми і лептоспіри) 3.Найпростіші: 1. Entamoeba gingivalis 2.Trichomonas elongata Непостійна флора 1. Аероби і факультативні анаероби: Грамнегативні палички: 1. Klebsiella 2. Escherichia 3. Aerobacter 4. Pseudomonas 5. Proteus 6. Alkaligenes 7.Бацили 2. Облігатні анаероби: Клостридії: 1. Clostridium putridium 2. Clostridium perfringens В слині Частота виявлення в зубоясенних кишенях, Частота виявКількість в 1 мл % лення, % 100 100 100 100 90 80 80 60 60 30 ++ ++ 50 50 1,5х105 107 106-108 105-107 103-104 103-104 He визначено He визначено He визначено 102-104 He визначено He визначено 102-103 102-103 100 100 100 ++ + ++ + 0 Не визначено ++ ++ ++ + Не визначено 100 100 100 75 100 ++ 106-108 He визначено He визначено 102-103 He визначено He визначено 100 100 100 100 ++ ++ ± He визначено 0 0 0 0 45 25 15 2 3 ± ± ± ± 10-102 10-102 10-102 He визначено He визначено He визначено He визначено 0 ± 0 0 0 0 0 ± ± He визначено He визначено 0 0 100 Примітка: ++ виявляються часто; + не дуже часто; ± рідко; 0 не виявляються. Такий спосіб оцінки має наступні недоліки: не має поділу на біотопи, зокрема, виділення мікроорганізмів типових для слизової оболонки протезного поля; лише констатує наявність чи відсутність певних видів мікроорганізмів, не дає можливості аналізувати їх загальне число у конкретного пацієнта, не достатньо інформативний для виявлення дефіциту представників нормальної мікрофлори. Враховуючи вище вказані недоліки даного способу, ми пропонуємо використовувати новий спосіб оцінки мікробіоценозу слизової оболонки ротової порожнини. Технічним завданням корисної моделі є створення нового об'єктивного способу представлення результатів мікробіологічного дослідження мазків із слизової оболонки ротової порожнини та з базисів знімних протезів методом секторних посівів із підрахунком кількості життєздатних мікробних клітин за допомогою лічильника колоній ПСБ у вигляді мікробного числа та дефіциту мікробного числа. Це дозволить уніфікувати отримані результати, співставити та порівняти їх за рівноцінних умов серед різних пацієнтів. Суть запропонованої корисної моделі полягає в наступному: 5 41807 6 Мікробний матеріал забирають відповідно до значенням або є меншою. У разі виявлення мікророзробленого нами способу «Спосіб забору матеорганізмів, у більшій кількості, коефіцієнт 1 переріалу для діагностики мікробного біоценозу ротомножують на +1;+2;+3; і т. д., залежно від того, на вої порожнини у осіб із знімними протезами» [Паскільки реальне значення Ig КУО переважає рівень тент України на корисну модель №26076, (51) МПК встановлений для нормоценозу. Наприклад, якщо (2006) А61В 10/02 /Михайленко Т.М, Рожко М.М., реальне значення Ig КУО для Stomatococcus (с) Куцик Р.В. под. 02.01.07; вид.10.09.07, Бюл. №14 становить 6 (а не 4, як у разі контрольного значенвід 10.09.07.] Виконують посів забраного матеріалу ня). Тоді у формулі складову 1хс записують 1х2, а секторним методом Голда на кров'яний агар. Після якщо с=3,5, тоді 1х1. Аналогічно обраховують від24 годин інкубації в термостаті при 37 °С провоповідні значення для інших мікроорганізмів групи дять підрахунок колоній кожного типу на різних А, отримують їх суму, ділять на кількість виявлесекторах посіву за допомогою лічильника колоній них видів (від 1 до 8). ПСБ. Подібним чином проводять розрахунки для Методика розрахунку мікробного числа (МЧ): груп В та С. У таких випадках змінюється коєфіцієт Показник мікробного числа служить для оцінки групи та кількість прийнятих до уваги видів мікропорушення балансу між окремими представниками організмів. У групі В (транзиторна умовномікробіоценозу ротової порожнини, що супровопатогенна мікрофлора), розрахунки проводять для джуються надмірною її колонізацією умовнонаступних найважливіших мікроорганізмів: патогенними і сапрофітними мікроорганізмами, - a Staphyloccocus coa hly+ Ig КУО=3; появою не властивих даному біотопу мікробних - b b streptococcus Ig КУО=0; видів. - с St.aureus Ig КУО=0; Всю мікрофлору слизової оболонки ротової - d Candida Ig КУО=0. порожнини умовно поділяють на три групи: АКоефіцієнт групи В рівний 2. Таким чином, резидентна та транзиторна сапрофітна, Вскладова В мікробного числа матиме вигляд: транзиторна та умовно-патогенна, С - патогенна і B=(2xa+2xb+2xc+2xd)/n, де n число діагностованих умовно-патогенна, не властива для ротової поровидів умовно-патогенних мікроорганізмів групи В жнини. Мікробне число представляють, як суму (від 1 до 4). мікроорганізмів ротової порожнини МЧ=А+В+С . Серед патогенних і умовно-патогенних мікроМікроорганізмам, що належать до групи А присвоорганізмів, не властивих для нормального мікробіюють коефіцієнт 1, до групи В-2, до групи С- 3. оценозу ротової порожнини, що становлять групу Значення коефіцієнта є тим більшим, чим менш С, виділяють наступні види: типовим для нормобіоценозу ротової порожнини є - a Escherichia coli Ig КУО==0; мікроорганізм. Відповідно відсутність представни- b інші представники Enterobactericere Ig ків однієї із груп позначають як нуль (0). Тоді вираз КУО=0; формули зміниться -МЧ=А+В+0; чи А+0+0; 0+В+С; - с Ps. aeruginosa Ig КУО=0; А+О+С. Для нормального біоценозу ротової поро- d не ферментуючі грам-негативні палички Ig жнини мікробне число повинне становити КУО=0; МЧ А+В. = Коефіцієнт групи рівний 3.Таким чином, склаДо групи А належать найбільш типові резидедова С мікробного числа матиме вигляд: нти! та транзиторні сапрофітні для ротової порожC=(3´a+3´b+3´c+3´d)/n, де n число діагностованини мікроорганізми, види та кількість яких у норних видів патогенних мікроорганізмів групи С (від 1 момікробіоценозі встановлено за результатами до 4). наших досліджень та даними науково-медичної Методика розрахунку дефіциту мікробного чилітератури у здорових осіб, без дефектів зубних сла (ДМЧ): рядів та будь-яких ортопедичних конструкцій. На Показник дефіциту мікробного числа служить основі цього відібрано 8 груп мікроорганізмів для для діагностики дизбіотичних змін, що супровопредставлення компонентів члена А формули мікджуються зниженням рівня колонізації слизової робного числа, які виражають як десятковий логаоболонки ротової порожнини представниками її рифм колонієутворюючих одиниць (lg КУО) та порезидентної мікрофлори. значають літерами a b, c, d, f, j, h, k: Розрахунки дефіциту мікробного числа прово- a a - streptoccocus Ig КУО=5; дять лише із врахуванням представників резиден- b Staphyloccocus coa- hly- Ig КУО=3; тної мікрофлори (групи А). Наводимо види мікро- с Stomatococcus Ig КУО==4; організмів та рівні колонізації ними слизової - d Neisseria Ig КУ04; оболонки ротової порожнини, встановлені за ре- f Corynebaterium Ig КУО=3; зультатами наших досліджень та даними науково- j Micrococcus Ig КУО=3; медичної літератури у здорових осіб, без дефектів - Bacillus Ig КУ 0=3; зубних рядів та будь-яких ортопедичних конструк- Streptoccocus hly- Ig КУО=3. цій, що становить контрольні показники. ВраховуПропонуємо, наступний запис складової А мікємо основних представників мікрофлори слизової робного числа оболонки ротової порожнини. A=(1´a+1´b+1´c+1´d+1´f+1´j+1´h+1´k)/n, де n - а a - streptococcus lg КУО=5; число діагностованих видів резидентних мікроор- b Staphyloccocus hly -lg КУО=3; ганізмів групи А (від 1 до 8). - с Stomatococcus lg КУО=4; Під час розрахунків складової мікробного чис- d Neisseria lg КУО=4. ла А, коефіцієнт 1 перемножують на 1, якщо кільЗначения дефіциту мікроорганізмів кожної грукість мікроорганізмів відповідає вказаним вище пи розраховують наступним чином: Dа=а-ак, де а 7 41807 8 реальне значення lg КУО, ак - контрольне значенних мікроорганізмів відповідно становить -5 (a ня. Під час розрахунку показника дефіциту мікроstreptococcus); -3(Staphyloccocus hly ); бного числа відсутність будь-якого з цих резидент4(Neisseria). ДМЧ=(-5+ -3+0+-4)/4=-3 них мікроорганізмів позначають зазначеним Даний спосіб оцінки мікробіоценозу слизової числом із від'ємним значенням (Dа, Db, Dс, Dd). оболонки ротової порожнини має істотні переваги Так, наприклад, якщо не діагностовано Neisseria над відомими. А саме, він дозволяє отримати цифровий вираз мікробіоценозу ротової порожнини; (d), то позначають її дефіцит Dd=-4. У разі виявспівставляти величини мікробного числа тадефілення мікроорганізмів у кількості меншій від контциту мікробного числа; проводити рівноцінне порірольного значення вираховують відповідну різнивняння цих показників як під час діагностики та цю між логарифмами колонієутворюючих одиниць. лікування у різних пацієнтів, так і з нормою. Наприклад, якщо у пацієнта виявлено, що lg КУО Відомі ознаки корисної моделі: визначення теNeisseria =1, то дефіцит мікробного числа буде рмінів МЧ, ДМЧ, поділ мікроорганізмів ротової поDd=(1-4=-3). Інші обчислення здійснюють за принрожнини на групи та їх видове представництво, ципом розрахунку мікробного числа. використання числового вираження масивності ДMЧ=(Da+D +Dc+Dd)/n, де Dа, Db, Dc, Dd або обсіменіння мікрофлорою через десятковий логавід'ємні числа, або рівні О, а n - кількість видів рерифм. зидентної групи А, за якою встановлюємо дефіцит, Нові ознаки корисної моделі: методика розразавжди рівне 4. Тоді максимально можливий дефіхунків, що включає присвоєння коефіцієнтів, запис цит мікробного числа буде становити ДМЧ=(-5+математичних формул, інтерпретація результатів. 3+-4+-4)/4=-4, а мінімально - 0. Запропонований спосіб, дозволить здійснити Наводимо приклад обчислення мікробного чикомплексну оцінку стану мікробіоценозу слизової сла (МЧ) та дефіциту мікробного числа (ДМЧ) в оболонки ротової порожнини на основі інтегральпацієнта К., що протягом двох років користувався них показників: мікробного числа та дефіциту мікзнімними конструкціями зубних протезів. Діагносробного числа, що характеризують видовий спектр тований стан мікрофлори ротової порожнини намікрофлори і рівень колонізації ними слизової ступний: оболонки, а також об'єктивізувати порушення мік- Stomatococcus 104, lg КУО=4; робіоценозу, пов'язані як із появою не властивих - St.aureus 5х103, lg КУО 5x103=4; для нормального стану слизової оболонки мікро- Candida 103, Ig KУО 103=3. організмів, так із дефіцитом резидентної мікро- Stomatococcus належить до групи A, флори. Таким чином, можливе проведення рівноSt.aureus та Candida до групи В. Мікроорганізми з цінного порівняння вказаних вище чинників у групи С не виявлені. Таким чином мікробне число різних пацієнтів із нормою та під час чи після меМЧ= А+В. А=(1х 1)/1=1. В=(2х4+2х 3)/2=7. МЧ= дикаментозного лікування. Розроблений спосіб 1+7=8 служитиме високоінформативним критерієм для Дефіцит мікробного числа у даного пацієнта лікарів-стоматологів у разі діагностики, лікування обчислюють наступним чином. Оскільки наявний та профілактики різних патологічних станів слизолише один мікроорганізм з групи A- Stomatococcus вої оболонки ротової порожнини, пов'язаних із із значенням рівня колонізації lg КУО=4, то його зміною мікробіоценозу. дефіцит 0. Дефіцит за іншими групами резидент Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601