Ортотирон – блокатор вивільнення норадреналіну з адренергічних нейронів

Застосування ортотирону як блокатора адренергічних нейронів шляхом припинення індуктивного вивільнення медіатора норадреналіну із нервових терміналів і денервацм гладеньких м'язів СТІНКИ репонарних та магістральних судин Винахід відноситься до медицини, а саме, до лікарських засобів, і може бути використаний у лікуванні кардіологічних та офтальмологічних хворих Медицині ВІДОМІ блокатори вивільнення норадреналіну із адренергічних нейронів бретилій, бетанідин, дебрізохін, гуаноксан та ІНШІ Але бретилій /орнід/ зараз знаходить застосування лише при аритмії серцевої ДІЯЛЬНОСТІ Бетанідин має суттєві вади він короткочасно діє, характеризується малою широтою терапевтичної дії, швидко викликає до себе звикання та інше Дебрізохін, гуаноксан і ІНШІ викликають низку небажаних побічних ефектів, тому вони не знайшли КЛІНІЧНОГО застосування [1,2] Основним засобом лікування хворих на гіпертонічну хворобу, гіпертонічних кризів та в інших випадках патологічного підвищення артеріального тиску є гуанетидін Проте, лікування гуанетидіном постійно супроводжується небажаними побічними ефектами біль у животі, діарея, добові коливання артеріального тиску, загрозливі ортостатичні ГІПОТОНІЯ чи колапс та інше Лікування гуанетидіном рекомендується переважно в стаціонарі і має низку протипоказань [1, 3] У завдання винаходу входило розробити новий блокатор вивільнення норадреналіну із адренергічних нейронів з вищою активністю, з меншою токсичністю, позбавлений небажаних побічних ефектів та протипоказань до застосування і здатний замінити закордонні коштовні бретилій, бетанідин, гуанетидін, едніт/еналапріл/, атенолол, тощо Ортотирон характеризується швидкою і тривалого блокадою процесу вивільнення медіатора нервової передачі - норадреналіну з депо катехоламінів, що веде, до десимпатизацм гладеньких м'язів кровоносних судин, їх розслабленню і стійкому розширенню судин Застосування ортотирону у медичній практиці підвищить ефективність лікування, скоротить перебування хворих у КЛІНІЦІ та позбавить їх від тяжких небажаних ефектів прототипу Поставлене завдання вирішується шляхом застосування ОРТОТИРОНУ у медичній практиці як блокатора адренергічних нейронів у хворих кардіологічної та офтальмологічної КЛІНІК ОРТОТИРОН - оригінальна хімічна сполука /обромбензилізотиуронія пдрохлорид/, вперше синтезована в Київському Н-Д інституті фармакології та токсикології МОЗ України і нами описана як речовина з радюпротекторною дією І Л І її структурна формула s-c неї Факт блокади адренергічних нейронів ортотироном доводиться тим, що після введення препарату котам чи білим щурам у них зникає скоротлива реакція гладеньких м'язів артеріальної системи та інших органів у ВІДПОВІДЬ на електричне подразнення нерва, а також на індукцію фенілетиламшу, але зберігається скоротлива реакція цих м'язів на дію норадреналіну Приклад 1 Досліди проводили на сім'яному канатику / ductus deferens / білих щурів Ізольований канатик кріпили на кронштейні у камері з розчином Кребса /50мл/ між двома кільчатими електродами при температурі 32°С Аерацію розчину здійснювали повітрям за допомогою компресора МК - 1 протягом всього досліду Розчин Кребса оновлювали з швидкістю 6 - Юмл за хвилину Вивільнення норадреналіну із адренергічних нейро О ю 44590 нів індуктували трансмуральним подразненням протока електричними прямокутними імпульсами тривалістю 0,1мсек, частотою 60 - 80Гц при напрузі 20 - 50 вольт серіями протягом 5 сек через кожні 2,5 хвилини Амплітуду скорочення протока реєстрували в мм на закопченій стрічці кімографа Розчин ортотирону і норадреналіну готували безпосередньо перед дослідом та застосовували із розрахунку 1 * 105г/мл Отримані результати обробляли методом варіаційної статистики з урахуванням критерію t - Стьюдента (таблиця 1) Таблиця 1 Дія ортотирону на амплітуду скорочення СІМ"ЯВИВІДНОГО протока, викликаного трансмуральним електричним подразненням і норадреналіном Етапи досліду Ортотирон Амплітуда Амплітуда скорочення скорочення Эффект, при дії ДО ДМ % препарата, препарата, мм мм 39,2 ±1,5/ 6/ 0,5 ±0,22 98,7 t (10мкг/кг) норадреналіна Результати дії ортотирону на скорочення третього віка ока котів, викликане електростимуляцією післяганглюнарного ствола шийного симпатичного ганглія, наводимо у таблиці 2 Таблиця 2 Вплив ортотирону на скоротливу властивість третього віка ока котів, викликану нервовим збудженням та норадреналіном Етапи експерименту Амплітуда скорочення 3-го віка ока, мм Ефект, При дії % Початкова ортотирону Електростимуляція нерва 51,8 ± 3,4 13,4 + 2,2 /5/ 74,2 Введення норадреналіну 26,8 ± 1,9 31,0 + 1,6 /5/ 115,7 25,2 Примітка у дужках - КІЛЬКІСТЬ ДОСЛІДІВ Ортотирон 32,6 ±1,1 / + 35,1 ±0,84 6/ н/адреналін 7,3 1,75 40,7 ±1,5 / 6/ 92,1 24,6 Бетанідин 3,2 ±0,48 Примітка у дужках - КІЛЬКІСТЬ ДОСЛІДІВ Цифровий матеріал таб 1 свідчить про те, що ортотирон є блокатором нервової передачі на рівні адренергічних нейронів Він зменшує амплітуду скорочення СІМ'ЯВИВІДНОГО протока на 98,7% при трансмуральному електричному вивільненні норадреналіна і не впливає на амплітуду скорочення органа при дії екзогенного медіатора, у аналогічній постановці досліду бетанідин зменшує амплітуду скорочення протока на 92,1 % Приклад 2 Ортотирон блокує вивільнення медіатора норадреналіна, індукованого безпосереднім подразненням симпатичного нерва У пяті котів в умовах гострого досліду (наркоз - уретан 0,5г/кг + хлоралоза 0,05г/кг внутрішньом"язово) шляхом електричного подразнення післяганглюнарного ствола шийного симпатичного ганглія викликали скорочення третього віка ока і реєстрували на кімографі висоту амплітуди у мм Використовували прямокутні імпульси тривалістю 5мсек при супрамаксимальній амплітуді і частоті 10Гц Після ЦЬОГО котам вводили внутрішньовенне ортотирон у дозі 7мг/кг і протягом 3 годин через кожні 20 - ЗОхв повторювали електричне подразнення (параметри ті ж самі) та реєстрацію висоти амплітуди скорочення 3-го віка, Контроль скоротливої властивості гладеньких м'язів третього віка здійснювали тест - дозою Цифровий матеріал таблиці 2 свідчить про те, що ортотирон зменшує амплітуду скорочення 3-го віка котів у середньому на 74,2%, тобто гальмує нервову передачу Цей факт відбиває ступінь блокади ортотироном вивільнення медіатора (норадреналіна) із адренергічних нейронів на а - рецептори гладеньких м'язів віка, бо реакція гладеньких м'язів третього віка на введення екзогенного норадреналіна зберігається Приклад 3 Ортотирон блокує індуктивне вивільнення норадреналіна в адренергічних нейронах кровоносних судин Для цього у котів під комбінованим наркозом (уретан 0,5г/кг + хлоралоза 0,05г/кг) прямокутними електричними імпульсами супрамаксимальноі амплітуди і тривалістю кожного 5мсек при частоті 1 Гц та 2Гц протягом бсек подразнювали післяганглюнарний ствол крайнього ганглія черевного симпатичного ланцюжка крижів, чим спричиняли індуктивне вивільнення норадреналіна у адренергічних нейронах, розташованих в гладеньких м'язах кровоносних судин задньої КІНЦІВКИ У ВІДПОВІДЬ на вихід норадреналіна в судинах виникає констрикторна реакція і підвищення опору кровотоку, які реєструються методом резістографм у вигляді пресорної реакції перфузійного тиску Контроль функціонального стану а - адренорецепторі в і гладеньких м'язів здійснювали тест - дозою введенням екзогенного норадреналіну (10мкг/кг) Після ЦЬОГО котам вводили внутрішньовенне ортотирон у дозі 7мг/кг і повторювали подразнення нерва у тих же параметрах та реєстрацію пресорної реакції перфузійного тиску Результати ДОСЛІДІВ, опрацьовані методом варіаційної статистики, приводимо утаблиці З 44590 Таблиця З Дія ортотирону на пресорну реакцію перфузіиного тиску, викликану електричнім подразненням симпатичного нерва та норадреналіном Етапи дослідження Пресорна реакція тиску, мм рт ст Препарат До дм препарата Ефект, % При дм препарата Стимуляція 1 Гц Ортотирон 9,0 ±1,6 0,33 ±0,3/6/ 96,3 Стимуляція 2Гц Ортотирон 20,0 ±1,7 0,5 ±0,34/6/ 98,0 Норадреналін Ортотирон 36,8 ±1,2 39,8 ±2,7/6/ 108,1 Примітка у дужках - КІЛЬКІСТЬ ДОСЛІДІВ Цифровий матеріал таб 3 свідчить про те, що електростимуляція післяганглюнарного ствола симпатичного ланцюжка крижів кота супроводжується констрикторною реакцією репонарних судин стегна і що висота цієї реакції залежить від інтенсивності подразнення нерва (1 Гц і 2Гц), тобто від КІЛЬКОСТІ вивільненого медіатора 3 фармакологічного погляду, дані таб 3 вказують на те, що ортотирон блокує вивільнення норадреналіна із нейронів і не впливає на функціональний стан гладеньких м'язів судин Приклад 4 Ортотирон блокує вивільнення норадреналіна, індуковане (5) ХІМІЧНИМИ індукторами (фенілетиламінами) Групі тварин із 5 щурів реєстрували рівень артеріального тиску в "нормі" і потім внутрішньовенне вводили ефедрин у дозі 5мг/кг і реєстрували пресорний ефект ефедрину у інтактних щурів Після цих процедур щурам вводили ортотирон у дозі 3,5мг/кг Динаміку артеріального тиску реєстрували протягом 3-х годин і після цього вводили тестдозу ефедрину (5мг/кг) на фоні дії ортотирону і знову реєстрували пресорну реакцію Цифровий матеріал, опрацьований методом варіаційної статистики, наводимо утаблиці 4 Таблиця 4 Дія ортотирону на пресорний ефект ефедрину і норадреналіна Індуктор Ефедрин Пресорний ефект, мм рт ст Блокатор Ефект, % До дії блокатора При дії блокатора Ортотирон 43,0 ±4,1 10,6 ±1,6/5/ 75,3 Н-адрен Ортотирон 38,9 ±4,5 44,0 ±3,1 /9/ 113,1 Ефедрин Гуанетидшх 44,6 ±4,8 14,0 ±5,8/6/ 68,6 Н-адрен* Гуанетидін 41,5 ±4,6 47,6 ±5,1 /6/ 115,0 Ефедрин Бетанідин х 40,0 ±3,6 15,3 ±3,4/6/ 62,0 Н-адрен Бетанідин 52,5 ±7,2 42,1 ±4,2/6/ 19,2 Примітки - у дужках КІЛЬКІСТЬ ДОСЛІДІВ, X - Гуанетидін і бетанідин приведені як прототипи, блокаторів Дані таблиці 4 свідчать про те, що ортотирон блокує вивільнення норадреналіна із нервових закінчень, викликане ХІМІЧНИМ подразником, і не впливає на пряму дію медіатора норадреналіна При цьому він не поступається своєю активністю прототипам гуанетидіну і бетанідину Приклад 5 Ортотирон блокує вивільнення медіатора норадреналіна, індуковане спонтанними (фізіологічними) потенціалами дм У стані спокою (6) тонус стінки кровоносних судин складається із базального і нейрогенного компонентів Нейрогенний компонент тонусу репонарних судин змінюється в залежності від потреб організму і регулюється виключно норадренерпчними волокнами шляхом зміни інтенсивності електричного розряду в ЦНС та вивільненням медіатора із нейронів (6, 7) На собаках методом одночасної і незалежної резістографм судин мозку та задньої КІНЦІВКИ вивчали дію ортотирона на вивільнення норадреналіна, індуктованого постійними спонтанними нервовими розрядами в ЦНС Перфузію судин здійснювали власною кров'ю тварин масою 9,6 14,5кг Наркоз - уретан 0,5г/кг + хлоралоза 0,05г/кг Розчини симпатолітиків готували перед дослідом і вводили у перфузивну кров у дозі 0,025ммол/кг Динаміку рівня системного артеріального тиску реєстрували в сонній артерії Отримані в дослідах результати обробляли за методом варіаційної статистики і оцінювали з урахуванням критерію t Стьюдента (таблиця 5) 44590 Таблиця 5 Дія ортотирону на перфузіинии тиск у судинах в стані спокою Перфузіинии тиск, мм рт ст Дослідний блокатор Початковий При дії блокатора Резистивні судини КІНЦІВКИ Ортотирон 73,72 + 3,5/6/ 121,5 ± 6,1 Гуанетидин 134,0 ±2,8 89,2 ±10,1 /6/ Резистивні судини мозку Ортотирон 125,0 ± 96,4 ±4,2/5/ Гуанетидин 93,0 ±7,9/6/ 119,0 ± 6,1 Ефект Мм рт ст % 47,8 ±3,7 44,8 ±7,6 39,4 28,8 ±4,5 25,3 ±3,2 22,6 А 33,7 А 21,7 Примітки у дужках - КІЛЬКІСТЬ ДОСЛІДІВ, X - різниця може розглядатися як тенденція Цифровий матеріал таблиці 5 показує, що ортотирон в умовно терапевтичній дозі блокує вивільнення норадреналіна із нервових закінчень, яке здійснюється спонтанними потенціалами дм в стані спокою стінки судин Так, перфузіинии тиск в судинах поперечно - смугастих м'язів задньої КІНЦІВКИ знижується у середньому на 47,8 ± 3,7мм рт с т , або 39,4% до "норми", а в судинах головного мозку - на 28,8 ± 4,5мм рт ст , або 22,6% В аналогічних умовах досліду гуанетидин знижував перфузіний тиск в судинах КІНЦІВКИ І мозку у середньому на 44,8 ± 7,6 мм рт ст (22,6%) і 25,3 ± 3,2мм рт ст (21,7%) ВІДПОВІДНО Приклад 6 Ортотирон характеризується меншою токсичністю Гостру токсичність ортотирону вивчали у порівнянні з прототипами на білих мишах при внутрішньочеревному введенні Визначали ДЛ-іб, ДГІ50 ДГІ84 та стандартну помилку ДЛ50 в мг/кг і перераховували середню летальну дозу у ммол/кг, за методом Літчфілда і Уилкоксона Опрацьований матеріал приводимо у таблиці 6 Таблиця 6 ДЛбо ортотирону та прототипів для білих мишей Назва блокатора Ортотирон Вид тварин та шлях введення ДЛ5С мг/кг ммол/кг Миші, в/черевно 111,0 ± 7 , 5 0,395 Гуанетидин М И Ш І , в/черевно 112,0 ± 7 , 8 0 450 Бетанідин М И Ш І , в/черевно 77,0 ± 5 , 6 0,290 Бретилій М И Ш І , в/черевно 36,0 ± 2 , 5 0,110 Аналіз цифрового матеріалу таблиці 6 показує, що ортотирона треба вводити значно більшу дозу для досягнення 50% загибелі лабораторних тварин Це є свідченням того, що бетанідин і бретилій ТОКСИЧНІШІ Для досягнення 50% ефекту гуанетидину необхідно більше Це можна пояснити недостатнім всмоктуванням препарата із черевної порожнини Таким чином, науково обґрунтовано, що ОРТОТИРОН блокує нервову передачу на рівні адренергічних нейронів він припиняє індуктивне вивільнення медіатора норадреналіна і супроводжуючі його скоротливі реакції гладеньких м'язів Цей високоспецифічний фармакологічний процес спостерігається при дії різних за своєю природою та характером індукторів при трансмуральній індукції вивільнення норадреналіна електричним полем у дослідах на ductus deferens (приклад 1), при індукції вивільнення норадреналіна безпосереднім подразненням симпатичного нерва (приклади 2 і 3), при вивільненні медіатора ХІМІЧНИМ подразником (5) ефедрином (приклад 4) та при індукції фізіологічними нервовими розрядами дії, які надходять до виконавчих органів із ЦНС (приклад 5) Заслуговує на увагу той факт, що в усіх дослідах реакція скорочення гладеньких м'язів на дію тест-дози норадреналіна зберігалась, а у деяких -спостерігалась тенденція до зростання (таблиці 1, 2, З, 4) Ортотирон характеризується меншою токсичністю, більшою активністю і позитивно впливає на кровообіг життєво важливих органів (головний мозок, нирки) Джерела інформації 1 М Д Машковский Лекарственные средства Т 1 - 13, новое издание - Харьков 'Торгсинг",1997 560 с 2 Освобождение катехоламинов из адренергических нейронов / Под ред Д М Пагона -М Медицина, 1982 - 3 5 1 с 3 Эрина Е В Актуальные проблемы патогенеза, лечения и профилактики гипертонических кризов / Кардиология -1988 - № 8 - С 101 -111 4 А с №1768168 СССР, МКИ 2 С07157/14 Галоидгидраты аралкилизотиурония, проявляющие радиозащитное действие / В Г Дужак, В И Милько, В Д Бойко, Р П Матюшко 5 Освобождение катехоламинов из адренергических нейронов / Под ред Д М Патора - М Медицина, 1982 - С 177-207 6 Б Фолков, Э Нил Кровообращение - М Медицина, 1976 -464 с 7 П Джонсон Периферическое кровообращение /Под ред Г И Косицкого/ - М Медицина, 1982 -439 с ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044) 456 - 20 90