Броберон- блокатор адренергічних нейронів нового покоління

Застосування броберону (о-бромбензілізотіуронію гідро броміду) для блокади адренергічних нейронів та моноаміноксидази з метою лікування хворих на гіпертонічну хворобу, гіпертонічні кризи, інші прояви патологічного підвищення артеріального тиску і хворих на глаукому. (19) (21) 98052506 (22) 14.05.1998 (24) 15.11.2000 (33) UA (46) 15.11.2000, Бюл. № 6, 2000 р. (72) Дужак Володимир Григорович, Порошіна Оксана Володимирівна 30491 5 мсек і частотою 1 Гц, 2 Гц, 5 Гц та 10 Гц. Реєстрація висоти пресорної реакції на кімографі в мм ртутного стовпчика. Після цього внутрішньовенно вводили броберон або прототип у дозі 0,025 ммол/кг, а через 2 години повторювали еле ктростимуляцію нерва (параметри ті ж) та реєстрацію перфузійного тиску. Контроль здійснювали тест-дозою норадреналіну 10 мкг/кг. Цифровий матеріал обробляли статистично. Результати дослідів надані в табл. 1. Таблиця 1 Вплив броберону та октадіну на пресорну реакцію перфузійного тиску у відповідь на стимуляцію післягангліонарного волокна Препарат Висота пресорної реакції, мм рт. ст. Після введення До введення препарату 12,0±2,7 0,0 21,0±4,3 0,0 28,6±3,7 3,0±0,5 35,6±3,4 4,0±0,8 23,3±3,5 38,8±2,4 9,3±2,2 0,0 17,0±3,3 0,0 22,0±2,3 0,0 32,0±2,5 0,0 25,0±3,1 37,5±1,1 Частота стимулів. Гц Броберон Броберон Броберон Броберон Норадреналін* Октадін Октадін Октадін Октадін Норадреналін* 1 2 5 10 1 2 5 10 Ефект, % 100 100 89,5 88,8 166 100 100 100 100 150 * - норадреналін хлоргидрат, тест-доза 10 мкг/кг Матеріали табл. 1 свідчать про те, що броберон, як і октадін, припиняє нервову передачу на рівні адренергічних нейронів до гладеньких м'язів стінки артеріальних судин. Різниця у діях цих препаратів полягає у тому, що октадін створює цілковитий блок нервової передачі, а броберон створює такий блок тільки для фізіологічної нервової імпульсації. Цей феномен має суттєве значення для практичного застосування броберону. Треба підкреслити, що реакція скорочення гладеньких м'язів стінки судин на дію тест-дози норадреналіну не тільки зберігається, а і підвищується. Приклад 2. Блокаторами адренергічних нейронів визнані такі речовини, які здібні гальмувати вивільнення норадреналіну із адренергічних нейронів у відповідь на індукцію фенілетіламінів (фенамін, тірамін, ефедрін [7]. Двом групам білих щурів по 6 тварин у кожній внутрішньовенно вводили ефедрін чи тірамін у дозі 5 мг/кг і реєстрували висоту пресорної реакції в мм рт. ст. Після цього білим щурам внутрішньочеревно вводили розчин броберону у дозі 0,025 ммол/кг. Через 3 години спостереження повторювали введення ефедріну чи тіраміну (шлях та доза ті ж) і реєстрували висоту пресорної реакції на фоні дії непрямих адреноміметиків. Статистичне оброблені дані наведені у табл. 2. Таблиця 2 Вплив броберону на пресорний ефект ефедріну і тіаміну Етапи експиременту Висота пресорної реакції до введення броберону (контроль) Висота пресорної реакції після введення броберону 8,1 мг/кг Ефект, % Висота пресорної реакції CAT, мм рт. ст. на ефедрін на тірамін на норадреналін* 49,0±3,4 70,0±2,4 45,0±2,4 12,0±3,5 23,0±3,1 60,0±4,2 76 68 133,3 * - висота пресорного ефекту норадреналіну, тест-доза 10 мкг/кг Приклад 3. Октадін викликає блокаду адренергічних нейронів шляхом спустошення депо медіатора норадреналіна і цим створює умови для ортостатичних гіпотонії чи колапса. А як діє броберон? Для вивчення дії броберону на депо норадреналіна 7 щурам підшкірно вводили броберон 0,05 ммол/кг і через 3 години тварин забивали для дослідження вмісту норадреналіна в міокарді та Дані табл. 2 свідчать про те, що броберон знижує пресорний ефект системного артеріального тиску (CAT) ефедріну на 76%, а тіраміну на 63%, що відбиває ступінь блокади бробероном вивільнення норадреналіну із кінцевих утворень адренергічних нейронів. При цьому проворна реакція CAT на норадреналін не тільки зберігається, а і підвищується. 2 30491 мозку. Другій групі із 7 щурів вводили октадін, а забивали тварин через 5 годин. Для вивчення поєднаної дії послідовно вводили під шкіру броберон, через 3 години - октадін, а після введення ок тадіну через 5 годин щурів забивали і вивчали вміст норадрепаліну в міокарді та мозку. Статистично оброблений матеріал наданий в табл. 3. Таблиця З Вплив броберсну і октадіну на вміст норадреналіна в серці та мозку Етапи дослідження Інтактні щури /контроль/ Щурам вводили броберон Шурам вводили октадін Щурам вводили бро берон і октадін Норадреналін міокарда мкг/г сирої тканини Р 1,28±0,06 (16)* 0,05 1,60±0,09 (7)** 0,05 0,31±0,05 (7) 0,05 1,25±0,05 (7) Норадреналін мозку мкг/г сирої тканини: Р 0,47±0,03 (11) -0,05 0,57±0,03 (7) 0,05 0,11±0,01 (7) 0,05 0,05 0,05 0,43±0,04 (7) 0,05 * - у дужках - кількість тварин у досліді ** - ефект у дослідах порівнюється до інтактних щурів активність моноаміноксидази (МАО), що має [3, 4] самостійне значення для лікарського засобу - регулятора кровообігу. Вплив броберону на активність МА вивчали на мітохондріях печінки щурів. Активність МА визначали в склі за кількістю аміаку, що виділяється протягом 60 хв інкубації мітохондрій печінки з 1 мг тіраміну при температурі середовища 37°С та рН 7,4. Активність ферменту розраховували в мкмол аміаку на 1 г білка мітохондрій. Цифровий матеріал опрацьовували статистично з використанням критерію І-Стьюдента і наводимо в табл. 4. Дані табл. 3 свідчать про те, що октадін спустошує депо медіатора норадреналіна на 76%. Броберон блокує вихід норадреналіну із нейронів і сприяє накопиченню його до 125% в міокарді і до 121% у мозку. Крім того, броберон усуває спустошуючу дію октадіну на депо медіатора норадреналіна в серці і мозку білих щурів. Тобто, броберон в організмі не буде створювати умови для виникнення ортостатичного колапсу або гіпотонії. Приклад 4. В фармакодинаміці броберону важливе значення має його властивість блокувати Таблиця 4 Вплив броберону на активність МАО мітохондрій печінки щурів Зміст досліджень Мітохондрії без обробки бробероном Мітохоядрії оброблені бробероном в концентрації 1х10-5 Кількість тварин Активність МАО, мкмол аміаку Інгібіція МАО, % Р 7 0,45±0,02 7 0,25±0,01 44 0,05 Результати дослідів свідчать про те, що броберон зменшує активність МАО білих щурів на 44%. Ця властивість броберону буде мати позитивне значення тому, що інгібітори МАО взагалі покращують кровообіг серця і мозку [3, 4]. Приклад 5.Вищеперелічені фармакологічні властивості броберону зумовлюють його високу антигіпертензивну активність. Це доведене у до слідженнях: 5 білим щурам лінії Вістар з моделлю спонтанної гіпертонії міряли системний артеріальний тиск (САТ), після цього у вену вводили броберон у дозі 8,1 мг/кг і знову спостерігали динаміку CAT протягом трьох годин. В аналогічних умовах паралельно проводили дослідження з октадіном у дозі 10 мг/кг. Результати проведених досліджень наведені у табл. 5. Таблиця 5 Антигіпертензивиий ефект броберону на моделі спонтанної гіпертонії Етапидосліджен Щурам вводили броберон Щурам вводили октадін Рівень САТ, мм рт.ст. До введення Після введення 179,8±2,2 107,2±1,8 163,0±7,4 102,0±8,3 Цифрові дані табл. 5 стверджують, що броберон характеризується високою антигіпертензивною активністю, яка не поступається активністю Антигіпертензивний ефект Мм рт.ст % 72,6±1,9 40,4±0,8 67,0±5,2 40,0±4,8 найбільш активному широко відомому антигіпертензивному засобу октадіну (гуанетідіну). 3 30491 Приклад 6. Для вивчення антигіпертензивної активності броберону на іншій моделі гіпертонії у кролів Шиншила моделювали рефлексогенну гіпертонію. Після досягнення висоти CAT рівня 170180 мм рт. ст. групі із 6 кролів вводили в шлунок броберон (14,6 мг/кг) щоденно протягом трьох не діль. Контрольній групі кролів вводили в шлунок фізіологічний розчин. CAT вимірювали в сонній артерії, яка оперативним шляхом на початку досліду була виведена у клапоть із шкіри тварини. Результати дослідів наведені в табл. 6. Таблиця 6 Вплив броберону на динаміку рефлексогенної гіпертонії у кролів Етапи досліджень Кролям вводили броберон Кролям вводили фіз.розчин Динаміка CAT. мм рт. ст До лікування Після лікування 171,0±0,9 103,0±0,9 169,4±4,5 152,0±3,3 Аналіз даних табл. 6 показує, що броберон характеризується потужною антигіпертензивною дією. Приклад 7. Броберон менш токсичний, краще всмоктується із травного тракту і підшкірної тканини та майже не має видової чутливості. Токсич Антигіпертензивний ефект мм рт. ст % 67,8±1,1 39,7±0,5 17,4±1,7 10,3 ність броберону визначали методом пробіт-аналізу за Літчфілдом і Уілкоксоном. Розраховували абсолютні величини значень ДЛ16, ДЛ50, ДЛ84, стандартну помилку та довірчі межі ДЛ50. Деякі величини ДЛ50 для щурів і мишей наводимо в табл. 7. Таблиця 7 ДЛ50 для щурів і мишей при різних шляхах введення Препарат Броберон Октадін Броберон Октадін Броберон Октадін Броберон Октадін Шлях введення Вид тварини в/черевно в/черевно в/черевно в/черевно п/шкіру п/шкіру в/шлунок в/шлунок Щури Щури Миші Миші Миші Миші Миші Миші ДЛ50 мг/кг 107±6,7 71±7,6 121±10,0 112±7,8 222±16,1 278±9,7 223±14,4 1100±74,3 ммол/кг 0,33 0,286 0,37 0,45 0,68 1,12 0,68 4,45 - броберон добре всмоктується із шлунковокишкового тракту; - коефіцієнт видової чутливості броберону становить 1,13; - броберон також добре всмоктується із підшкірної тканини; - броберон не кумулює і до нього не розвивається звикання та інш. Аналіз даних, наведених в табл. 7, показує, що броберон менш токсичний, однаково добре всмоктується із підшкірної тканини та шлунково-кишкового тракту: коефіцієнт втрати активності - всього 1,8. Коефіцієнт видової чутливості складає 1,1. При введенні октадіну в шлунок чи під шкіру він втрачає свою активність в 15 і в 4 рази, відповідно (порівнюється з результатами внутрішньо черевним введенням). Таким чином, експериментально доведено, що броберон (о-бромбензілізотіуронія гідро бромід) це високоефективний блокатор адронергічних нейронів, який в порівнянні з октадіном (гуанетідін) має ряд переваг як лікарський засіб: - ефект дії броберону починається швидко (20-30 хв) і продовжується більше 9 годин після введення його в організм; - блокада адренергічних нейронів здійснюється бробероном без спустошення депо медіатора норадреналіна і, таким чином, не створюються фізіологічні умови для виникнення ортостатичних гіпотонії чи колапсу, притаманних дії октадіну; - антигіпертензивний ефект броберону не супроводжується будь-якими коливаннями системного артеріального тиску; - броберон також є інгібітором моноаміноксидази (MAO) і цим підсилює антигіпертензивну дію; Джерела інформації: 1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. T. 1.-1З, новое издание, 1997. – Харьков: Торгсинг. – 560 с. 2.Эрина Е.В. Актуальные проблемы патогенеза, печения и профилактики гипертонических кризов // Кардиология. - 1988. - № 8. - 101-111. 3. Мирзоян Р.С., Каверина Н.В., Розонов Ю.Б. Ингибиторы моноаминоксидази // Фармакология моноаминергических процессов / Под ред. В.В. Закусова, Н.В. Кавериной. - М.: Медицина, 1971. - С. 167-87. 4.Машковский М.Д. Лекарствепные средства. Ч. 1.. 8 изд. - М.: Медицина, 1977. - 623 с. 5. А. с. 768163 СССР, МКИ2 С07157/14. Галоидгидраты аралкилизотиурония, проявляющие радиозащитное действие / В.Г. Дужак, В.И. Милько, В.Д. Бойко, Р.П. Матюшко. 4 30491 6. Дужак Б.Л. Гипотензивная активность о-бромбензилизотиурония гидробромида // Фармакология и токсикология. - 1330.- Вып. 25. - К.: Здоров'я. С.32 -35. 7. Хауслер Г., Хефли В. Модификация высвобождения веществами, блокирующими адренергичес кий нейрон, и веществами, влияющими на потенциал действия // Освобождение катехоламинов из адренергических нейронов. Под ред. Д.М. Патона. - М.: Медицина, 1982. - С. 177-207. __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 35 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 5