Спосіб оцінки ефективності лікування ранової інфекції у породіль

Спосіб оцінки ефективності лікування ранової інфекції у породіль, що включає забір матеріалу із рани з подальшим його дослідженням, який відрізняється тим, що проводять забір бюптату із рани, визначають КІЛЬКІСТЬ імунокомпететних клітин, фагоцитарну активність нейтрофілів, ступінь СВІТІННЯ фіксованих імуноглобулінів А, М, G у мазках-відбитках і при збільшені імунокомпетентних клітин в 2,3 рази, фагоцитарної активності нейтрофілів в 1,78 рази, КІЛЬКОСТІ та ступеня СВІТІННЯ імуноглобулінів А і G оцінюють лікування як ефективне, а при нижчих значеннях КІЛЬКОСТІ імунокомпетентних клітин, фагоцитарної активності нейтрофілів та при збільшені КІЛЬКОСТІ імуноглобулінів М як не ефективне Винахід, що заявляється, відноситься до медицини, зокрема до акушерства та гінекологи і може бути використаний для оцінки ефективності лікування ранової інфекції у породіль Частота інфікування м'яких тканин промежини та передньої черевної стінки після кесарського розтину коливається від 21,4 до 35% [2,7] При цьому частота інфільтратів та язв промежини складає 20 - 29,4% [4] Нагноєння післяопераційної рани після кесарського розтину при планових операціях складає 4,6%, при ургентних операціях -12,6% [3] Одна із причин розвитку гнійно-септичних ускладнень - розвиток часткового транзисторного імунодефіциту при вагітності, який при приєднані інфекції у післяпологовому періоді переходить у вторинний імунодефіцит [1,6] Тому для прискорення репаративних процесів в рані треба відновити імунітет, застосовуючи препарати з сорбційними та імуномоделюючими властивостями Найближчим аналогом-прототипом винаходу, що заявляється є спосіб оцінки стану місцевого імунітету при рановій інфекції у породіль з визначенням фагоцитарної ланки в рановому виділенні Для отримання нейтрофілів і макрофагів з ранової поверхні проводять змив впродовж 15 хвилин при 1500обх/хв Потім видаляють надосадову рідину і з верхньої частини осаду набирають 0,5мл матеріалу, який змішують та ресуспензують з 0,5мл середовища 199, подальший хід виділення нейтро філів і макрофагів з ранової поверхні проводився за загальнопринятою методикою, проводять НСТтест, підраховують фагоцитарне число та індекс А також з метою оцінки стану репаративних процесів визначають в рановому виділенні відносну КІЛЬКІСТЬ нейтрофільних гранулоцитів, макрофагів, полібласті профілобластів у перерахунку на 100 клітин [7] Але цей спосіб має суттєві недоліки, бо не розкриває повністю місцевий імунітет, не відображає стан Т- і В-системи імунітету у рані, його динаміку під впливом медикаментозної терапії, при ЗМІНІ фаз ранового процесу Задача, яка вирішується винаходом, що заявляється - створення способу оцінки ефективності лікування ранової інфекції у породіль, у якому за рахунок використання в комплексному лікуванні препаратів з сорбційними та імуномоделюючими властивостями досягають скорочення строків перебування на лікарняному ліжку Технічний результат, що заявляється полягає в корекції місцевого імунітету, що призводить до прискорення репаративних процесів в рані, більш швидкому очищенню та заживлению рани Поставлена задача вирішується тим, що у відомому способі оцінки ефективності лікування ранової інфекції, який включає забір матеріалу із рани з подальшим його дослідженням, згідно винаходу проводять забір бюптату із рани, визначають КІЛЬКІСТЬ імунокомпетентних клітин, фагоцитарну активність нейтрофілів та фіксованих імуноглобулінів (А, М, G) і ступеню їх СВІТІННЯ у 00 ю 45872 розподіл імунокомпетентних клітин (ІКК), що можна оцінюваті як адекватну імунну ВІДПОВІДЬ організму При цьому спостерігається міграція в ділянку ранового пошкодження Т-лімфоцитів, Т-хелперів, Т-супресорів, активних субпопуляцій, Т-лімфоцитів [6] До лікування у бюптатах із рани у обох групах (табл 1) виявили переважання субпопуляцій Тлімфоцитів, в тому числі їх активної субпопуляцм КІЛЬКІСТЬ В-КЛІТИН була незначною Цей факт свідчить про те, що на фоні запалення у породі з гнійними ранами протікання репаративних процесів було уповільнене, про що свідчить і переважання у мазках-від битках плазмоцитів-продуцентів імуноглобулінів класів М і G, які складають "другу ЛІНІЮ" протиантигенного захисту (табл 2) При використовувані в лікувані мікотона у рані в КІНЦІ 1-і фази на початку 2-і фази ранового процесу посилюється міграція всіх видів ІКК, спостерігається збільшення КІЛЬКОСТІ Т-лімфоцитів в 2 рази, В-лімфоцитів - в 2,78 раз, в тому числі Тхелперів в 1,7 разів, Т-супресорів в 1,83 рази, а також активних лімфоцитів в 3,68 рази (табл 1) ймовірно за рахунок посилення міграції імунокомпітентних клітин із крові Збільшення КІЛЬКОСТІ Тхелперів у рані говорить про прискорення репаративних процесів і ліквідацію вогнища запалення, що підтверджують дані літератури [6] Очищення рани відбувається в середньому на 3 добу лікування (табл 3) Підвищення КІЛЬКОСТІ Т-лімфоцитів спонукає до посилення секреції ними під впливом Визначення фіксованих імуноглобулінів в бюантигенів із вогнища запалення Ід класів А і G птаті характеризує функцію В-лімфоцитів Для (табл 2) Паралельно з цим збільшується фагоцицього використовують імунофлюорисцентний метарна активність нейтрофільних гранулоцитів у тод - він є найбільш точним В-лімфоцити мають вогнищі запалення в 1,78 раз, що теж сприяє ліквірецептори імуноглобулінової природи, які виявлядації запалення та прискоренню репаративних ються за допомогою специфічних мічених антисипроцесів у рані У тканинах із рани збільшується роваток Виявлені таким чином лімфоцити називміст фіксованих імуноглобулінів А і G (табл 2), а ваються імуноглобулін-позитивні (lg+) В якості також посилюється інтенсивність їх СВІТІННЯ, що мітки ФІТ використовують специфічні забарвлені свідчить про посилення місцевого специфічного структури, які дають у спектрі збудження люмінесімунітету у тканинах рани Посилення продукції ценції яскраве зелено-жовте СВІТІННЯ ДЛЯ ЦЬОГО на фіксованих імуноглобулінів класів А і G - "першої мазок-відбиток із бюптат наносять 10 - 15мкл молінії захисту" тканин була обумовлена міграцією у носпецифічної антисироватки до імуноглобулінів тканини В-лімфоцитів, Т-хелперів М, G, А, мічених ФІТЦ, розведених 1 50 в ЗФР мазках-відбитках і при збільшені імунокомпетентних клітин в 2,3 рази, фагоцитарної активності нейтрофілів в 1,78 раз, і по збільшенню КІЛЬКОСТІ та ступеню СВІТІННЯ імуноглобулінів А і G, оцінюють лікування як ефективне, а при нижчих значення КІЛЬКОСТІ імунокомпетентних клітин, фагоцитарної активності нейтрофілів та при збільшені КІЛЬКОСТІ імуноглобулінів М як не ефективне На відміну від прототипу, у запропонованому способі проводять оцінку стану Т-В-системи імунітету в рані, що дозволяє забезпечити прогнозування протікання репаративних процесів, підвищити ефективність лікування ранової інфекції, за рахунок більш швидкої ліквідації КЛІНІЧНИХ ознак запалення і повного рубцювань рани Спосіб оцінки ефективності лікування ранової інфекції у породіль, що заявляється здійснюється наступним чином Для визначення імунокомпетентних клітин бюпт із рани (0,2 - 0,3г) старанно розтирають в фарфоровій ступці, доливають 0,25% розчин трипсину (t = 37°С), а потім витримують в термостаті протягом 45 хвилин Після цього три рази відмивають середовищем 199 по 5 хвилин при 200д Надосадову рідину нашаровують на градієнт фіколл-уротраст і з отриманою суспензією лімфоцитів ставлять імунологічні реакції (визначення КІЛЬКОСТІ Т-лімфоцитів за допомогою Ерозеткоутворення, субпопуляцм Т-лімфоцитів, "активних" Т-лімфоцитів, В-лімфоцитів, О-лімфоцитів, фагоцитарного індексу) (забуфернии фосфатний фізіологічний розчин), та шкубують у вологій камері 40 хвилин при кімнатній температурі Потім промивають тричі в охолодженому ЗФР та проводять підрахунок результатів (lg+, Ід++, Ід+++), тобто їх КІЛЬКОСТІ По запропонованому способу було обстежено 37 породіль з рановою інфекцією Першу групу склали 23 породілі, яким проводили лікування хітинвмісним препаратом мікотон, який має сорбЦІЙНІ та імуномодулюючі властивості Препарат застосовували перорально, та в вигляді аплікацій на ранову поверхню, тонким шаром 3 - 4 рази на добу після обробки рани 3% розчином водню Для прискорення процесів регенерації та епітелізації у 2-й та 3-й фазах ранового процесу мікотон використовували вологий (змочений 0,9% розчином хлориду натрію) У другу групу увійшло 14 породіль з рановою інфекцією, яким застосовували традиційні методи лікування (10% розчин хлориду натри, 1% розчин дюксидину, лінімент Вішневського) Відомо, ЩО ПІСЛЯ оперативного втручання при рановому процесі у тканинах відбувається пере У породіль, яким застосовувались до лікування традиційні методи, на відміну від першої групи, була відсутня динаміка зміни складу імунокомпетентних клітин у бюптаті із рани (табл 1) та фіксованих імуноглобулінів у тканинах із рани (табл 2), що свідчило про повільне протікання репаративних процесів і ліквідацію вогнища запалення (табл 3) У 2 фазі ранового процесу (фаза регенерації) відбувається зменшення в тканинах та Влімфоцитів, їх активних форм, фагацитарної активності, збільшення КІЛЬКОСТІ О-лімфоцитів, тобто місцевий імунітет у рані починає відповідати місцевому імунітету здорової тканини (клінічна ремісія) (табл 1) При лікуванні мікотоном у 2 фазі ранового процесу спостерігається зменшення Т лімфоцитів в 1,84 рази, Т-хелперів в 2,95 рази, В-лімфоцитів в 2,17 рази, їх активних форм в 2 рази, але Олімфоцити збільшуються в 1,48 рази, а КІЛЬКІСТЬ Тсупресорів незначно збільшилась (табл 1), про що свідчить прискорення заживлення рани (табл 3) 45872 У фазі регенерації (табл 1) у породіль лікованих традиційними методами була відсутня динаміка зміни складу імунокомпетентних клітин у бюптаті із рани, що знову свідчило про уповільнене протікання репаративних процесів (табл 3) Як видно, визначення імунокомпітентних клітин у біоптаті із рани та фіксованих імуноглобулінів дає об'єктивну оцінку ефективності лікування ранової інфекції у породіль і є виключно важливим з точки зору підвищення якості ведення породіль рановою інфекцією Цей спосіб оцінки ефективності лікування ранової інфекції у породіль був опробований на кафедрі акушерства та гінекологи №1, що дозволяє його рекомендувати для застосування в практичній роботі лікарів акушер-пнеколопв в умовах стаціонару так і в амбулаторіях 1 Дранник Г Н Клиническая иммунология и аллергология — К , 1999 — С 603 2 Кремінський ЯМ ПАГ — 1995 — №5 — С 41-43 3 Михайленко Е Т Журнал академии мед наук Украины — 1995 — Т 1 — №2 — С 255-263 4 Мусина Л Т , Семина И А, Гладкова К К Журнал микробиологии, епидемиологии, иммунологии — 1996 — №2 — С 91-94 5 Пешко А В Взаимосвязь нарушений иммунитета и репаративных процессов у больных неспецифическими воспалительными заболеваниями Клиника и их коррекция Т-активином // Автор, канд дисерт — К , 1990 — С 20 6 Полсачева О В Иммунология — 1996 — №3 — С 61 7 Тарашвілі О Г , Ящукевич М Є ПАГ — 1997 — №6 — С 93-95 Література Таблиця 1 Показники місцевого імунітету у породіль з рановою інфекцією Т-лім Т-хел Т-суп Тх/Тс Мікотон ДО 19,5 ±1,37 13,6 ± 2 05 6,66 ±0,965 5,85 ± 1 64 лікув Мікотон 39,6 6 ±3,61 23,0 9± 3 ,24 12,17 ±2,59 1,84 ± 0 48 очищ рани Мікотон фа21,5 ±0,78 7,82 ± 0 53 13,4 ±0,65 0,64 ± 0 04 за реген Трад мет до 20,7 7 ±2,76 12,33 ± 3 ,68 10 ±3,05 5,8 ± 2 28 лікув Трад мет 23,2 1 ± 1,34 14,29 ± 1 ,42 8,21 ±1,46 2,94 ± 0 899 очищ рани Трад метод и фаза ре21,1 ±1,19 10,8 ± 0 49 10,3 ±0,74 1,09 ± 0 06 ген Клш реміс 5,9 ±0,87 2,4 ± 0 5 3,5 ±0,42 0,66 ± 0 08 Т-акт В-лім О-лім ФІ 4 27 ± 1 13 5,78 ±1, 41 54 3 ± 2 38 20,6 ±0, 515 15,7±1, 33 16,05 ±2 ,48 73 9 ± 1 76 36,6 ± 2 43 7 82 ± 0 59 7,39 ± 0 65 80 5 ± 0 89 21,6 ± 0 62 6 66 ± 2 32 7,22 ± 2 05 56 ± 1,79 22,1 ± 0 99 8,07 ± 1 15 9,07 ± 1 92 5£ ,9 ±2 ,8 24,71 ± 0 992 6 93 ± 1 34 7,93 ± 1,9 69 9 ± 0 97 21,7 9 ±С,72 3 3± 0,45 3,7 ±0,56 81 1 ±0 55 8,2 ±0,66 Таблиця 2 Рівень СВІТІННЯ фіксованих імуноглобулінів у біоптаті із рани в процесі лікування ранової інфекції мікотоном та традиційними методами (%) igG+ Трад метод и до лікув Трад метод и після лікув Мікотон до лікув Мікотон ПІСЛЯ лікув igG++ lgG+++ igA+ igA++ lgA+++ lgM+ lgM++ lgM+++ 28,6 7,14 60,9 71,4 85,7 39 65,2 7,14 34,8 42,9 57 34,8 26,1 73,9 91,3 71,4 64,3 26,1 8,7 28,6 35,7 78,3 Таблиця З Порівняльна оцінка ефективності лікування препаратом мікотона і традиційних методів лікування при рановій інфекції у породіль (дні) Зменшення гіперемії і набряків Некролізис Очищення рани Поява грануляції Початок епітелізації Мікотон 1,1 ±0,6 1,9 ±0,4 2,9 ±0,3 2,8 ±0,5 3,5 ±0,3 Традиційні методи 6,9 ±0,4 7,5 ±1,3 8,1±1,2 8,0 ±0,9 10,1 ±1,5 45872 ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044)456-20- 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71