Спосіб лікування хворих на рак молочної залози

Спосіб лікування хворих на рак молочної залози, що включає передопераційну променеву терапію та радикальну мастектомію, який відрізняється тим, що в післяопераційних зразках пух 3 Недоліком прототипа є те, що при призначення цитостатиків не проводилось імуногістохімічне дослідження експресії білків, які відповідають за розвиток лікарської резистентності до різних груп протипухлинних препаратів, зокрема, Рглікопротеїну (Pgp), глутатіон-S-трансферази (GST) та металотіонеїнів (МТ). В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалити спосіб лікування хворих на рак молочної залози шляхом проведення імуногістохімічного дослідження післяопераційних зразків пухлин з визначенням експресії білків Pgp, GST та МТ в пухлинних клітинах, що дасть можливість збільшити 3-річну загальну та безрецидивну виживаність хворих на даний тип РМЗ. Поставлена задача вирішується таким чином. На початку лікування всім хворим проводять крупнофракційну променеву терапію, а після неї радикальну операцію. Імуногістохімічне дослідження (ІГХД) експресії білків РЕ, РП, HER-2/neu, Pgp, GST та МТ проводять на парафінових зрізах пухлинної тканини. Парафіновані зрізи товщиною 4-6мкм монтують на скельця, покриті полі-L-лізином, або на скельця з адгезивними властивостями SuperFrost Plus («Sigma», Німеччина) і залишають на добу в термостаті при 37°С або ж на 30хв в термостаті при 56°С (у разі застосування скелець Super Frost Plus). У день проведення імуногістохімічної реакції проводять депарафінування та зневоднення зрізів. Для оптимального імуногістохімічного визначення експресії антигенів проводять демаскування антигенів в розчині 0,1М цитратного буферу (рН6,0), шляхом інкубування у мікрохвильовій печі протягом 2хв за потужності 600Вт, або на водяній бані протягом 20хв за температури 90°С з подальшим охолодженням скелець до кімнатної температури у розчині цитратного буферу. Надалі виявлення антигенів проводять у вологій камері при кімнатній температурі. Для зменшення неспецифічного забарвлення на зрізи наносять 1%-ий розчин бичачого сироваткового альбуміну (БСА). Білки, що входять до його складу, блокують усі високозаряджені неспецифічні ділянки, з якими може відбутися неспецифічне зв'язування моноклональних антитіл (МКАТ). По 46351 4 тім протягом однієї години проводять інкубацію препаратів з МКАТ, специфічними до вищезазначених білків. Після цього зрізи тричі відмивають у фізіологічному розчин. NaCl, забуференому фосфатами, рН7,4. Всі інкубаційні цикли, що передбачені при імуногістохімічному виявленні антигенів, проводять у вологій камері при кімнатній температурі. Для візуалізації застосовують систему «EnVision+» (Dako Cytomation, Данія), яку наносять після МКАТ, з подальшою обробкою 3-,3диамінобензидином (Dako Cytomation, Данія) для визначення активності пероксидази через 30 хв інкубації з вищевказаною системою. Після виявлення активності пероксидази зрізи тканини пухлин дофарбовують гематоксиліном протягом 2-3хв і укладають в бальзам або Faramount Aqueous Mounting Medium (DakoCytomation, Данія). Оцінку результатів фарбування проводять за допомогою світлового мікроскопу (збільшення х400). В залежності від наявності експресії Pgp, GST та МТ в пухлинних клітинах, проводять лікування за однією з запропонованих схем (Табл. 1). Схеми призначають на основі наявних даних про роль білків у формуванні резистентності до хіміопрепаратів. Зокрема, GST зумовлює стійкість пухлин до дії алкілюючих препаратів, зокрема - сполук платини, Pgp - до антрациклінів, таксанів, вінкаалкалоїдів, подофілотоксинів та кампотецинів, МТ - до препаратів групи платини та хлорамбуцилу [2, 3]. Хворі контрольної групи (Табл. 1.), в пухлинних клітинах яких експресію Pgp, GST та МТ не враховувалась отримували схему АС, яка є загальноприйнятою при лікуванні РМЗ. Схему ТА призначали хворим, пухлинні клітини яких відрізнялися низьким, або середнім рівнем експресії Pgp (040%), високим рівнем експресії GST (>50%) та низьким рівнем експресії МТ(0-20%). Схеми ТС та та ТС+бевацизумаб призначали хворим, пухлинні клітини яких відрізнялися високим рівнем експресії Pgp (>40%) та GST (>50%) та низьким рівнем експресії МТ (0-20%). Схему Гемцитабін+CDDP призначали хворим, пухлинні клітини яких відрізнялися високим рівнем експресії Pgp (>40%) та МТ(>20%), а також низьким або середнім рівнем експресії GST (50% МТ40% GST 20% Pgp> 40% GST >50% ТС+бевацизумаб - 6 МТ