4,10-діацетокси-2a-бензоїлокси-5b,20-епокси-1,7b-дигідрокси-9-оксо- такс-11-ен-13a-іл (2r,3s)-3-бензоїламіно-2-гідрокси-3-фенілпропіонат тригідрат та спосіб його одержання

1 Способ получения 4,10-диацетокси-2а бензоилокси-5 р ,20-эпокси-1,7 р -дигидрокси-9оксо-такс-11 -ен-13 a -Hn(2R,3S)-3-6eH3OHnaMHHO-2гидрокси-3-фенилпропионата тригидрата, отличающийся тем, что осуществляют кристаллизацию 4,10-диацетокси-2 а -бензоилокси-5 р ,20эпокси-1,7 р -дигидрокси-9-оксо-такс-11 -ен-13 а -ил (2R,3S)-3-6eH3onnaMHHO 2-гидрокси-Зфенилпропионата в смеси воды и алифатического спирта, содержащего от 1 до 3 атомов углерода, с последующим высушиванием полученного продукта при пониженном давлении и выдерживанием при относительной влажности выше 20% 2 Способ по п 1, отличающийся тем, что весовое соотношение вода/спирт составляет от 3/1 до 1/3 3 Способ по одному из пп 1 или 2, отличающийся тем, что спирт является метанолом 4 Способ по п 1, отличающийся тем, что высушивание осуществляется при температуре около 40°С при пониженном давлении, а полученный продукт стабилизируется при 6% воды при относительной влажности воздуха выше 20% 5 Способ по п 1, отличающийся тем, что кристаллизация осуществляется в присутствии аскорбиновой кислоты 6 Способ по п 1, отличающийся тем, что работают непосредственно in situ со сложным эфиром, полученным в результате реакции этерификации баккатина III, гидрокси-функции которого в положении 13 защищены и защищенного производного р -фенилизосерина после снятия защитных групп Настоящее изобретение относится к способу получения 4,10-диацетокси-2а-бензоил-окси5р,20-эпокси-1,7р-дигидрокси-9-оксо-такс-11-ен13а-ил (2R, 33)-3-бензоиламино-2-гидрокси-3фенилпропионата тригидрата 4,10-диацетокси-2а-бензоилокси-5р,20-эпокси1,7р-дигидрокси-9-оксо-такс-11-ен-13а-ил (2R, 3S)З-бензоиламино-2-гидрокси-З-фенилпропионат (или паклитаксель) обладает противораковыми и противолейкемическими свойствами 4,10-диацетокси-2а-бензоилокси-5р,20-эпокси1,7р-дигидрокси-9-оксо-такс-11-ен-13а-ил (2R, 3S)З-бензоиламино-2-гидрокси-З-фенилпропионат может быть выделен из коры тиса, либо из бакка тина III или 10-дезацетил-баккатина III в соответствии со способами, описанными в европейских заявках на патент ЕР 0 336 840 и ЕР 0 400 971 или в международной заявке PCTWO 94/07878 Было отмечено, что 4,10-диацетокси-2абензоилокси-5р,20-эпокси-1,7р-дигидрокси-9-оксотакс-11 -ен-13a-nn(2R, 33)-3-бензоиламино-2гидрокси-3-фенил-пропионата тригидрата имеет значительно более высокую стабильность, нежели безводные продукты В соответствии с изобретением, 4,10диацетокси-2а-бензоил-окси-5р,20-эпокси-1,7рдигидрокси-9-оксо-такс-11-ен-13а-ил (2R,3 S)-3бензоиламино-2-гидрокси-З-фенилпропионат три 7 4,10-диацетокси-2 а -бензоилокси-5 р ,20-эпокси1,7 р -дигидрокси-9-оксо-такс-11 -ен-13 а -ил (2R,3S)-3-6eH3onnaMHHO-2-rHflpoKCH-3фенилпропионаттригидрат О 47420 гидрат может быть получен путем кристаллизации 4,10-диацетокси-2а-бензоил-окси-5р,20-эпокси1 ^а-дигидрокси-Э-оксо-таксИ 1 -ен-13 а-ил (2R, 33)-3-бензоил-амино-2-гидрокси-3фенилпропионата в смеси воды и алифатического спирта, содержащего от 1 до 3 атомов углерода, с последующим высушиванием полученного продукта под пониженным давлением и выдерживанием при относительной влажности выше 20% при температуре около 25°С Для осуществления способа по изобретению, предпочтительно, проводят следующие стадии -4,10-диацетокси-2а-бензоил-окси-5р,20эпокси-1,7р-дигидрокси-9-оксо-такс-11 -ен-1 За-ил (2R, 33)-3-бензоиламино-2-гидрокси-3фенилпропионат растворяют или суспендируют в алифатическом спирте, содержащем от 1 до 3 атомов углерода, - промывают раствор или суспензию в воде, содержащей, при необходимости, неорганическое основание, такое как водород содержащий карбонат натрия, - отделяют полученные кристаллы, затем - высушивают их при пониженном давлении, затем - при необходимости, выдерживают на воздухе при относительной влажности выше 20% и при температуре около 25°С Как правило, 4,10-диацетокси-2а-бензоилокси5р,20-эпокси-1,7р-дигидрокси-9-оксо-такс-11-ен13а-ил (2R, 33)-3-бензоил-амино-2-гидрокси-3фенилпропионат растворяют в избытке алифатического спирта, предпочтительно, метаноле Предпочтительно, содержание спирта составляет от 6 до 12 вес частей по отношению к используемому 4,10-диацетокси-2а-бензоилокси-5р,20эпокси-1,7р-дигидрокси-9-оксо-такс-11 -ен-1 За-ил (2R, 33)-3-бензоиламино-2-гидрокси-3-фенилпропионату Как правило, воду добавляют таким образом, чтобы весовое соотношение вода/спирт составляло от 3/1 до 1/3 Добавляемая вода может содержать до 10% (вес/об) неорганического основания, такого как водородсодержащий карбонат натрия, так чтобы рН реакционной смеси была равна или выше 7, предпочтительно, от 7 до 8, до отделения кристаллов Кристаллизующийся 4,10-диацетокси-2абензоилокси-5р,20-эпокси-1,7а-дигидрокси-9-оксотакс-11 -ен-1 За-ил (2R, 33)-3-бензоиламино-2гидрокси-3-фенил-пропионат тригидрат отделяют, предпочтительно, фильтрованием или центрифугированием, затем высушивают Сушка осуществляется при пониженном давлении, от 1 до 7кПа, при температуре около 40°С, полученный продукт, при необходимости, выдерживают на воздухе при относительной влажности выше 20% и при температуре от 0° до 60°С, предпочтительно около 25°С Для осуществления способа кристаллизация может быть проведена, предпочтительно, в присутствии аскорбиновой кислоты, которую добавляют при растворении или суспендировании 4,10диацетокси-2а-бензоилокси-5р,20-эпокси-1,7рдигидрокси-9-оксо-такс-11-ен-1 За-ил (2R, 3S)-3 бензоиламино-2-гидрокси-З-фенилпропионата в спирте Можно использовать до 1вес% аскорбиновой кислоты 4,10-диацетокси-2а-бензоилокси-5р,20-эпокси1,7р-дигидрокси-9-оксо-такс-11-ен-1 За-ил (2R, 3S)З-бензоиламино-2-гидрокси-З-фенилпропионат тригидрат был исследован путем дифференциального термогравиметрического и калориметрического анализа и дифракцией рентгеновского излучения Термогравиметрический анализ показывает потерю массы около 6% при температуре от 25 до 140°С, что соответствует трем молекулам воды на молекулу 4,10-диацетокси-2а-бензоилокси-5р,20эпокси-1,7р-дигидрокси-9-оксо-такс-11 -ен-1 За-ил (2R, 33)-3-бензоиламино-2-гидрокси-3фенилпропионата Для осуществления способа по изобретению, при использовании полусинтетического паклитакселя, полученного по способам, описанным, например, в европейских патентах ЕР 0 336 840 и ЕР 0 440 971 или в международной заявке РСТ WO 94/07878, которые ведут к получению, в качестве промежуточного соединения, паклитакселя, гидрокси группы которых защищены, можно работать непосредственно с раствором или суспензией 4,10-диацетокси-2а-бензоилокси-5р,20-эпокси1,7р-дигидрокси-9-оксо-такс-11-ен-1 За-ил (2R, 3S)З-бензоиламино-2-гидрокси-З-фенилпропионата, полученного после удаления защитных групп гидрокси-групп цикла таксана и боковой цепи Например, в условиях, описанных в международной заявке РСТ WO 94/07878, получают, в качестве промежуточного соединения, 4,10-диацетокси-2абензоилокси-5р,20-эпокси-1-гидрокси-7ртриэтилсилилокси-9-оксо-такс-11 -ен-1 Заил (4S, 5R)-3-6eH3onn-2-(4-MeTOKCH^eHHn)-4 фенил-1,3-оксазолидин-5-карбоксилат, защитные группы которых могут быть удалены с помощью трифторуксусной кислоты в метаноле Следующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение Пример 1 В реактор, в темноте, вводят 5,014г 4,10диацетокси-2а-бензоилокси-5р,20-эпокси-1гидрокси-7р-триэтилсилилокси-9-оксо-такс-11-ен13а-ил (4S, 5R)-3-6eH3onn-2-(4-MeTOKCH^eHHn)-4фенил-1,3-оксазолидин-5-карбоксилата с содержанием 98вес % (4,52ммоля) и 5см 3 метанола В перемешанную белую суспензию быстро добавляют 7см 3 трифторуксусной кислоты Температуру повышают до приблизительно 35°С После охлаждения до температуры приблизительно 5°С добавляют 110см3 6%-ого водного раствора гидрогенкарбоната натрия (вес/об), рН равно 7 Кристаллы отделяют фильтрованием на фриттированном стекле и промывают 4 раза в 15см3 смеси метанол-вода (30 - 70 объемных частей) После высушивания при пониженном давлении при температуре 35°С получают 3,676г 4,10-диацетокси2а-бензоилокси-5р,20-эпокси-1,7р-дигидрокси-9оксо-такс-11-ен-1 За-ил (2R, 33)-3-бензоил-амино2-гидрокси-З-фенил-пропионата с весовым содержанием 93,1% и содержанием воды приблизительно 4,8% 47420 Характеристика полученного продукта представлена в виде диаграммы порошка в рентгеновских лучах (фиг 1) Выход чистого продукта составляет 89,3% по отношению к используемому сложному эфиру Выдержанный при относительной влажности выше 20%, продукт стабилизируется при содержании воды около 6% На диаграмме DPRX (порошковая диаграмма дифракции рентгеновского излучения), представленной на фиг 2, показано, что полученный таким образом продукт представлен в виде тригидрата (теоретически содержание воды в 4,10-диацетокси-2а-бензоилокси-5р,20эпокси-1,7р-дигидрокси-9-оксо-такс-11 -ен-1 За-ил (2R, 33)-3-бензоил-амино-2-гидрокси-3фенилпропионате тригидрате составляет 5,95%) Порошковая диаграмма дифракции рентгеновского излучения получена с помощью прибора Philips PW 1700® с кобальтовой антикатодной трубкой (Ж а 1 - 1.7889А), угол первоначальной развертки 5° 2-6, конечной развертки 40° 2-6, с шагом 0,02°0 2-6 из расчета 1сек на шаг и с использованием кремниевой фильтровальной пластинки Пример 2 В реактор, в темноте, помещают 3,006г 4,10 о о 10 0 диацетокси-2а-бензоилокси-5р,20-эпокси-1гидрокси-7р-триэтилсилилокси-9-оксо-такс-11-ен13а-ил (4R, 53)-3-бензоил-2-(4-метокси-фенил)-4фенил-1,3-оксазолидин-5-карбоксилата с весовым содержанием 98% (2,70ммоля) и 30см3 метанола В перемешанную белую суспензию добавляют 6,3см 99%-ой трифторуксусной кислоты После охлаждения до температуры приблизительно 5°С добавляют в течение 15 минут 7,5см3 деминерализованной воды Кристаллы отделяют фильтрованием на фриттированном стекле и промывают 3 раза в 5см 3 смеси метанол-вода (80 - 20 объемных частей) при 5°С После высушивания при пониженном давлении при температуре 35°С получают 1,989г 97,8%-ого 4,10-диацетокси2а-бензоилокси-5р,20-эпокси-1,7р-дигидрокси-9оксо-такс-11 -ен-1 За-ил (2R, 33)-3-бензоиламино2-гидрокси-З-фенилпропионата с содержанием воды приблизительно 6,8% Выход составляет 84,3% по отношению к используемому сложному эфиру 15 0 Фиг 1а 55 D о о Э5 0 47420 30 О 10.0 '5.0 50 О Фиг. 26 ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71 55.0