Штам бактерій rhizobium sp. (galega) для одержання бактеріального добрива під козлятник

Штам бактерій Rhizobium sp. (Galega) MC-1 для одержання бактеріального добрива під козлятник. (19) (21) 2001053073 (22) 04.05.2001 (24) 15.11.2004 (46) 15.11.2004, Бюл. № 11, 2004 р. (72) Маліченко Світлана Марківна, Коць Сергій Ярославович, Титова Людмила В'ячеславівна, Бутницький Іван Миколайович, Заболотна Віра Петрівна 3 51890 4 Морфолого - к ультуральні властивості. стерильною водою і готували суспензію. Штам характеризується наступними культураЕфективність штаму МС-1 перевіряли у вегельно - морфологічними ознаками: культура бактетаційних дослідах на промитому річковому піску рій не спороносна, грам-негативна, клітини мають (суміш Гельрігеля з 0,25 і 0,5 нормами азоту) та у форму дрібних паличок, розміром 0,8-2,0мкм, папольових дослідах на чорноземі опідзоленому на лички рухливі. Бактерії пігмент не продукують. лесах( Тернопільська обл., 1999-2000p.p.). Перед Культура швидкоросла. посівом насіння скарифікували шляхом перетиШтам МС-1 росте на наступних поживних серання з чистим піском, після чого стерилізували редовищах: 70%-ним етанолом, промивали дистильованою 1. Гороховий агар, г/л: горох - 100,0; сахароза водою та інокулювали бульбочковими бактеріями 20,0; агар-агар - 16,0; рН середовища 6,8-7,0. з розрахунку не менше як 2,0×104 клітин на одну 2. Манірно - дріжджовий агар (МДА), г/л: манітнасінину. Посів козлятника у польових дослідах прово10,0; К2НРО4-0,5; MgSO 4×7H2O-0,2; NaC1-0,1; дріжджовий екстракт - 1,0; агар-агар - 16,0; рН середодили в першій декаді квітня з шириною міжрядь вища 6,6-7,2. 45см та глибиною загортання насіння 1,5-2,0см. При розсіві штрихом на МДА колонії з'являНасіння висівали з розрахунку 20кг/га. ються на 3-4 добу, мають округлу форму, випуклі, Азотфіксуючу активність штаму визначали в білі, однотипні, слизисті, 1-2мм в діаметрі. інтактних бульбочках рослин першого та другого Фізіолого - біохімічні властивості. року вегетації за величиною ацетиленредуктазної Симбіонт. Макросимбіонт - бобова рослина коактивності. злятник (Galega orientalis Lam.). Як видно з табл.1, штам МС-1 вступав в ефекВідношення до кисню - аероб, але здатний ротивний симбіоз з козлятником сорту Кавказький сти при зниженому вмісті кисню. бранець, активно фіксував атмосферний азот і за Температурний діапазон росту: 20-30°С. Опазотфіксуючою активністю в умовах вегетаційного тимальна температура росту: 28°С. Діапазон рН досліду перевищував штам-стандарт СІАМ 0703 в 6,5-7,4. Оптимальна рН-7,2. 1,2-1,6 рази. Урожай зеленої маси козлятника зроВ якості джерела вуглецю штам МС-1 може став при цьому на 37-178,3% порівняно з контровикористовува ти глюкозу, сахарозу, маніт, ксилолем і на 15,6-18,2% - порівняно зі штамомзу, мальтозу, рамнозу, сорбіт, арабінозу, лактозу, стандартом (в залежності від дози азоту). галактозу. Результати ефективності запропонованого Поряд із засвоєнням азоту атмосфери може штаму МС-1 в польових дослідах наведені в використовува ти амонійний та нітратний азот. Відтабл.2-4. Штам, що пропонується, за ефективністю новлює нітрати до нітритів. суттєво перевищує базовий штам. Новий штам Інші характерні фізіологічні особливості. протягом всього періоду досліджень достовірно Желатину не розріджує. підвищував урожай зеленої маси козлятника. НадМолоко з лакмусом не пептонізує, слабо підлубавка урожаю зеленої маси в перший рік вегетації говує (рН зміщує в слабко-лужну сторону). при інокуляції новим штамом складала Крохмаль не гідролізує. Не розкладає це53,3ц/га(47,1%) - по відношенню до контролю і люлозу. 15,3ц/га(10,1%) – по відношенню до штамуСтимуляторів росту даний штам не потребує. стандарту (табл.2). У др угий рік вегетації (табл.3) Ознаки штаму стійкі. Штам не патогенний. ці величини становили, відповідно, Штам МС-1 зберігається на МДА (рН 7,0) або 120,0ц/га(18,6%) і 80,0ц/га(11,7%). Азотфіксуюча гороховому агарі вказаного складу при 4-5°С і пеактивність симбіотичного апарату у козлятника в ресівається один раз у 6 місяців. перший рік вегетації перевищувала штам-стандарт Оцінку симбіотичних властивостей штаму МСв 1,4 рази (табл.2). Новий штам значно підвищу1 - азотфіксуючої активності та ефективності симвав не лише урожай зеленої маси козлятника східбіозу проводили в умовах вегетаційних та польоного, але й урожай насіння. Надбавка урожаю навих дослідів. сіння при інокуляції штамом, що пропонується, Приклад. Штам Rhizobium sp. (Galega) МС-1 становила 0,44ц/га або 12,0% порівняно зі штамом вирощували на поживному середовищі МДА при - стандартом і 0,86ц/га або 26,4% - порівняно з 27°С протягом 3-4 діб у пробірках, потім змивали контролем (табл.4). Таблиця 1 Урожай зеленої маси козлятника сорту Кавказький бранець у вегетаційному досліді, 1999р. Варіант Доза Азоту І 1 1. Контроль Середній Надбавка урожай, до контрог/посудину лю Урожай по повторностях, г/посудину II III IV V VI 2 3 4 5 6 7 8 0,25н. 19,4 15,0 19,6 20,2 17,8 24,2 9 19,4±1,2 г/посуд 10 % 11 Надбавка до СІАМ 0703 г/посуд 12 % 13 Азотфіксуюча активність, МКМОЛЬ С2Н4× ×рослГ -1×год-1 14 0 5 51890 6 Продовження табл.1 1 2 2. Базовий штам СІАМ 0703 3. Запропонований штам МС-1 НІР0,5, г/посудину 4. Контроль 0,5н. 5. Базовий штам СІАМ 0703 6. Запропонований штам МС-1 НІРо,5, г/посудин у 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 43,7 44,1 42,8 47,0 44,9 50,1 45,4±1,1 0,94±0,05 50,8 47,9 55,6 52,4 60,6 56,6 54,0±1,8 41,7 48,9 38,4 48,2 46,7 44,8 4,32 44,8±1,6 0 54,8 48,9 47,6 56,0 54,2 57,0 53,1±1,6 2,05±0,12 67,2 54,8 67,0 63,9 62,7 52,7 61,4±2,5 34,6 178,3 16,6 37,0 8,6 18,9 8,3 1,48±0,10 15,6 2,48±0,24 5,94 Таблиця 2 Урожай зеленої маси козлятника сорту Кавказький бранець 1-го року вегетації, 1999р. (Тернопільська обл.) Варіант Урожай по повторностях, ц/га І 1. Контроль 122,5 (спонтанна інокуляція) 2. Базовий 156,4 штам СІАМ 0703 3. Запропонований штам 169,4 МС-1 НІР0,5, ц/га Середній Надбавка до урожай, ц/га контролю II III IV ц/га 120,8 105,4 104,1 113,2±4,9 150,2 150,0 148,2 151,2±1,8 166,8 164,2 165,5 166,5±1,1 Надбавка до СІАМ 0703 % ц/га Азотфіксуюча активність, мкмоль С2Н4×росл.1 ×год.-1 % 1,61±0,1 53,3 47,1 15,3 10,1 2,32±0,2 9,83 Таблиця 3 Урожай зеленої маси козлятника сорту Кавказький бранець 2-го року вегетації, 2000р. (Тернопільська обл.) Варіант 1. Контроль (спонтанна інокуляція) 2. Базовий штам СІАМ 0703 3. Запропонований штам МС-1 НІР0,5, ц/га Урожай по повторностях, ц/га (су- Середній уро- Надбавка до кон- Надбавка до СІмарний, 2 укоси ) жай, ц/га тролю АМ 0703 І II III IV ц/га % ц/га % 706 589 707 578 645±35,6 695 701 667 678 685±7,8 700 786 744 830 765±27,9 84,6 120 18,6 80 11,7 7 51890 8 Таблиця 4 Урожай насіння козлятника сорту Кавказький бранець у польовому досліді, 2000р Варіант Урожай по повторностях, ц/га Середній уро- Надбавка до конжай, ц/га тролю ц/га % І 1. Контроль (спонтанна інокуляція) 2. Базовий штам СІАМ 0703 3. Запропонований штам МС-1 НІР0,5, ц/га II III IV V 3,1 3,2 3,4 3,2 3,4 3,26±0,06 3,8 3,5 3,7 3,9 3,5 3,68±0,08 4,2 4,0 3,9 4,4 4,1 4,12±0,09 Надбавка до СІАМ 0703 ц/га % Комп’ютерна в ерстка Л. Купенко 0,86 26,4 0,44 0,23 Підписне Тираж 37 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 12,0