Спосіб діагностики розвитку остеоартрозу в підлітків

Спосіб діагностики розвитку остеоартрозу в підлітків шляхом використання біохімічних показників, який відрізняється тим, що в сироватці крові хворого підлітка визначають активність колагенази і при підвищенні її більше, ніж у 2 рази, діагностують наявність остеоартрозу. (19) (21) u201002958 (22) 15.03.2010 (24) 25.08.2010 (46) 25.08.2010, Бюл.№ 16, 2010 р. (72) ШЕВЧЕНКО НАТАЛІЯ СТАНІСЛАВІВНА, ЛЕБЕЦЬ ІРИНА СТЕПАНІВНА, КАШКАЛДА ДІНА АНДРІЇВНА, МАТВІЄНКО ОЛЕНА ВІТАЛІЇВНА 3 тинсульфатів, фракційного складу глікозаміногліканів, сероглікоїдів, гаптоглобіну, церулоплазміну, гексозаміну, гексоз, пов'язаних з білком, що значно утруднює проведення діагностики. Відомо, що в патогенезі розвитку ОА центральне місце займає активація протеолітичних ферментів, а саме металопротеїназ, які ініціюють розрив протеогліканових ланцюгів та колагенових волокон [Аналог: Коваленко В.Н. Остеоартроз [Текст]: практ. рук. / В.Н. Коваленко, О.П. Борткевич. - К.: Морион, 2003. - 448с.]. Рівень активності колагенази як лабораторний "провісник" має значення при виникненні деградації шкіряних покровів (появи стрій) при гіпоталамічному синдромі, структурних компонентів судинної стінки при формуванні деструктивних процесів у головному мозку, легенях, печінці, нирках. Але залишається невідомим, яка ступінь активації таких ферментів є діагностично значущою та повинна прийматися до уваги як критерій розвитку дегенеративних змін у суглобах. Найбільш близьким за технічною суттю до корисної моделі, що з'являється, є спосіб діагностики різних форм дисплазії сполучної тканини у підлітків за допомогою визначення в сироватці крові активності колагенази, еластази та рівня інгібіторів еластази [Найближчий аналог: Пат. 51352, UA, МПК А61В10/00 G01N33/50 G01N33/573. Спосіб діагностики різних форм сполучнотканинної дисплазії у юнаків [Текст] / М.М.Коренєв [та ін.]; заявник і патентовласник ДУ "ІОЗДП АМНУ". №2002021679; заяв. 28.02.02, опубл. 15.11.02, Бюл. №11]. Але даний спосіб дозволяє оцінити лише ступінь системності дисплазії сполучної тканини та не передбачає визначення початку дегенеративних процесів в сполучнотканинних структурах. В основу корисної моделі поставлено задачу вдосконалення діагностики ОА в суглобах на ранніх стадіях захворювання шляхом використання чутливих біохімічних показників. Дана задача може бути вирішена за допомогою визначення в сироватці крові активності колагенази, при якій можна було б оцінити не тільки ступінь системності дисплазії, але й визначити початок формування дегенеративних процесів в сполучнотканинних структурах. 52495 4 Спосіб здійснюють таким чином. У центрифужну пробірку забирають венозну кров у кількості 5мл, центрифугують при швидкості 2500об/хв протягом 10хв. Отриману сироватку відбирають у пробірку. Активність колагенази визначають за методом Шараєва П.Н., що полягає в наступному: - у контрольну пробірку та пробірку, яка досліджується, вносять по 10мг колагену, 0,5мл розчину кальцію в буфері. У пробірку, що досліджується, додають 0,5мл охолодженої сироватки крові й центрифугують при 1000об/хв протягом 5хв. Вміст пробірок перемішують і тримають у водяному термостаті при температурі 37-38°С протягом 4 годин, потім у контрольну пробірку додають 0,5мл охолодженої сироватки; - у пробірки вносять по 0,5мл трихлоруксусної кислоти (ТХУ) й 0,5мл хлорної кислоти, перемішують, центрифугують при 3000об/хв. протягом 10хв. 1мл надопадкової рідини переносять у мірні центрифужні пробірки й гідролізують їх у киплячій водяній бані протягом 40хв. - охолоджені гідролізати після додавання до них по 1 краплі розчину фенолфталеїну нейтралізують 6М їдким натром до слабо-пурпурного кольору (рн 8,0-8,4), обсяг гідролізаторів доводять до 4мл; - до проб додають 0,5мл хлораміну, через 44,5хв 0,5мл хлорної кислоти, центрифугують при 3000об/хв протягом 10хв.; - надопадкову рідину після додавання до неї реактиву Ерлиха нагрівають у киплячій водяній бані протягом 120сек і через 10-15хв. фотометрирують при довжині хвилі 560нм для визначення показників активності колагенази. Отримані значення порівнюють з нормативними показниками. При підвищенні активності колагенази у дітей та підлітків з ураженням суглобів запального (перенесений реактивний артрит) та диспластичного характеру (гіпермобільність суглобів) більш ніж у два рази у порівнянні з групою контролю можна діагностувати наявність ОА. При менших значеннях колагенази при наявності таких же захворювань, стадія дегенеративних змін не настає. Таблиця Активність ферментів катаболізму колагену та еластину у підлітків із остеоартрозом Групи досліджуваних 1 Хворі на ОА (усього) Хворі на ОА на тлі ГМС Хворі на ОА, сформований після РеА Контрольна *pu