Засіб для профілактики хвороб, що передаються статевим шляхом

Засіб для профілактики хвороб, що передаються статевим шляхом, що містить хлоргексидин, який відрізняється тим, що він додатково містить аміксин і фізіологічний розчин за наступним співвідношенням вказаних компонентів, мас % хлоргексидин 0,0002-0,009, аміксин 0,0033-0,167, фізіологічний розчин решта Винахід стосується медицини, зокрема засобів для лікування і профілактики захворювань, що передаються статевим шляхом У венерології велика увага приділяється екстреній профілактиці захворювань, що передаються статевим шляхом (ЗПСШ) Для цього використовуються розчини засобів, які мають бактерицидні, фунгицидні і протоцидні дії Найближчим до винаходу, що заявляється, є лікарський препарат хлоргексидин, який застосовується для профілактики венеричних захворювань сифіліс, гонорея, трихомоноз [див Машковский М М , Лекарственные средства, Харьков, "Торсинг", 1997, т 2, с 402] Хлоргексидин застосовують у вигляді 0,05%-го розчину Він справляє швидку і сильну бактерицидну дію на грампозитивні і грамнегативні бактерії, причому за рахунок інгібування дипдрофолатредуктази Даний засіб обрано прототипом Спільним у винаході, що заявляється, і прототипу є наявність хлоргексидину у складі засобу Але відомий засіб не діє на спори і віруси, які посідають значне місце в загальному спектрі збудників ЗПСШ В основу винаходу поставлено, задачу в засобі для профілактики ЗПСШ, шляхом введення додаткового лікарського препарату, забезпечити розширення спектру пригнічуваних збудників та підвищення ефективності екстреної профілактики захворювань, які передаються статевим шляхом Поставлена задача вирішена засобом для профілактики ЗПСШ, які передаються статевим шляхом, що містить хлоргексидин тим, що він додатково містить лікарський препарат аміксин та фізіологічний розчин, за наступним співвідношенням вказаних компонентів, мас % 0,0033-0,167, аміксин 0,0002 - 0,009, хлоргексидин решта фізіологічний розчин посвідчення № Аміксин (реєстраційне Р 033 99/00358) - противірусний препарат, індуктор інтерферону і коректор імунної системи Застосовується для терапії і профілактики вірусних захворювань, таких як грип, гепатити (А, В, С), герпес простий (І і II тип), опоясуючий лишай, розсіяний склероз Крім того, застосовується для профілактики і терапії опортуністичних інфекцій на фоніВІЛ/СНІД Вибір аміксину як додаткового компоненту засобу для профілактики ЗПСШ, пояснюється тим, що він, по-перше, добре поєднується з хлоргексидином, по-друге, має інший механізм дії (нуклсотропний) на відміну бід хлоргексидину Виходячи з хіміко-фармацевтичних властивостей аміксину, що наведені в спеціальній медичній літературі, неможливо було передбачити, що аміксин здатен потенціювати дію хлоргексидину Крім того, неможливо було передбачити що і хлоргексидин також буде потенціювати дію аміксину Наведене підтверджується тим, що активність кожного препарату у запропонованому засобі про (21)2002129652 ( 2 2 ) 0 3 12 2 0 0 2 (24)17 03 2003 СО Ю Ю 55314 охолодили до 50°С і залили на платформу з гребіявляється в меншій дозі, ніж при застосуванні нкою товщиною шара ~4мм Після застигання обеокремо хлоргексидину і аміксину режно вийняли гребінку, а платформу перенесли в Засіб для профілактики хвороб, які передаелектрофоретичну камеру і залили 800мл буфер ються статевим шляхом готують таким чином У ТВЕ так, щоб він укривав гель шаром ~3 - 4мм мірний посуд вміщують певну КІЛЬКІСТЬ розчину Далі 15мкл продукту ампліфікації змішали з 5мкл хлоргексидину і доводять його до заданої конценбарвника (бромфеноловий синій) Електрофорез трації фізіологічним розчином для внутрішнього проводили 25хв при 80 - 100В, та кімнатній темпевливання В другий мірний посуд вміщують певну ратурі КІЛЬКІСТЬ аміксину і додають до нього отриманий розчин хлоргексидину в фізіологічному розчині Після сеансу електрофорезу агарозний гель Приготовлена суміш є концентрованою (у 6 разів) поклали на екран УФ-трансілюмінатора і визначали наявність реплікату Приклад 1 В колбу на ЮООмл вмістили 2,0мл 20%-го розВ агарозному гелі смужка жовтого кольору не чину хлоргексидину і довели до мітки фізіологічз'явилася Це свідчить про відсутність реплікату, ним розчином для внутрішнього вливання Одертобто досліджуєма речовина має біологічну активжали розчин з концентрацією 0,04мас % Після ність цього в мірну колбу на 25мл вмістили ЮОмг амікПриклади 2 - 36 ілюструють вивчення протисину і довели до мітки розчином хлоргексидину у інфекційної дії засобу з різною концентрацією хлофізіологічному розчині Одержали суміш, яка місргексидину і аміксину у фізіологічному розчині тить, мас % Дані наведені в Таблиці аміксин 0,4, Склад засобу за Прикладами 4, 11, 17 проявляє ефект шпбіювання ДНК тільки сифілісу хлоргексидин 0,04, фізіологічний розчин 99,56 Приклади 37 - 48 ілюструють вивчення протиАктивність отриманого засобу перевіряли інфекційної дії індивідуально препарата аміксин шляхом визначення інгібування полімеразної ланДані наведеш в Таблиці цюгової реакції Для цього в пробірку вмістили Приклади 49 - 60 ілюструють вивчення проти2,5мкл прямого та зворотнього праймерів, 2,5мкл інфекційної дії індивідуально препарата хлоргекрозчину дезоксинуклеозідтрифосфатів, наслоіли сидин Дані наведені в Таблиці Юмкл розплавленого воску, так щоб він повністю Приклад 61 ілюструє застосування тільки фізіпокривав розчин На поверхню застиглого воску ологічного розчину без аміксиніу і хлоргексидину додали Юмкл ПЛР-буфер з Taq-полімеразою ПоДані наведені в Таблиці верх реакційної суміші шарували 20мкл мінеральОцінку ефективності індивідуальних препараної олії, щоб запобігти випаровуванню і зберегти тів (аміксин і хлоргексидин), а також засобу, який стабільність об'єму розчину На олію додали 5мкл містить задану КІЛЬКІСТЬ аміксину, хлоргексидину і суміші, яка містить, мас % хлоргексидін - 0,04, фізіологічного розчину здійснювали методом поліаміксин - 0,4, фізіологічний розчин - 99,56, та 5мкл меразної ланцюгової реакції, як описано у Приклапозитивного контролю (тотальна ДНК вірусу просді 1 Для статистичної обробки результатів викотого герпесу І типу виділена з штаму Л2 методом ристовували метод двофакторного дисперсійного фенольної екстракції і преціпітацм етанолом) При аналізу з частковим збалансованим двофакторним цьому розчин розбавили, концентрації хлоргексипланом (кратність 1/2) Використовано два рівня дину та аміксину зменшили до 0,0067% та відклику (наявність ефекту в Таблиці показано "+", 0,0667% ВІДПОВІДНО відсутність ефекту "-" На нульовому рівні одного з незалежних факторів (концентрація компонентів) Після введення ДНК збудника утворилася дослідження відклику (факт шпбіювання полімерастійка трифазна система Пробірку установили у зної ланцюгової реакції") проводили на кожному термостат і нагрівали до 65°С, при цьому воск розрівні другого фактора Як негативний контроль топився і піднявся уверх, а верхня і нижня фази використовували розчин, який відповідає нульоперемішалися Після цього проводили ампліфікавим рівням обох факторів (концентрація обох комцію - багатократне збільшення числа копій специпонентів дорівнює 0, - фізіологічний розчин) При фічної ділянки ДНК, каталізуємої ферментом ДНК обраних рівнях незалежних факторів і відклику, з полімеразою (Taq-полімераза) Ампліфікацію проурахуванням трикратної повторності експерименводили в слідуючому режимі спочатку 4 хвилини тів результати є достовірними на рівні довірительпри 95°С - один цикл, 1хв при 95°С, 1хв при 67°С, ноі вірогідності р < 0,05 1хв при 72°С - ЗО циклів, 2хв при 72°С - один цикл, після чого зразок охолоджували до +4°С і зберігаВстановлено, що індивідуальні препарати ли при даній температурі аміксин і хлоргексидин в концентраціях 0,1667% і 0,0083% ВІДПОВІДНО (Приклади 48 і 60) інгібують Наявність або відсутність реплікату визначали ампліфікацію ДНК вірусу простого герпесу-2 (1), електрофорезом цитомегаловірусної інфекції (II), трихомонади (III), Для цього спочатку приготували розчин робохламідм (IV), уреаплазми (V), гонореї (VI), сифілісу чого буфера для електрофореза В мірну колбу на (VII) Але у концентраціях 0,1333% і 0,0067 % ЮООмл внесли вміст флакону з буфером для еле(Приклади 47 і 59) ці індивідуальні препарати нектрофореза (ТВЕ), додали до мітки дистильоваефективні Аналогічні результати отримані для ною водою і ретельно перемішали до повного розрозчинів з меншою концентрацією (Приклади 37 чинення осаду 47 і 49 - 59) Після приготували 1,5%-й агарозний гель, вмістили його в конічну колбу і додали 15мкл броміду При сумісному використанні хлоргексидину і етідію, при перемішуванні Розтоплену агарозу аміксину інгібуючий ефект відносно збудників хво 55314 роб І - VI проявляється при концентрації компонентів 0,0003% і 0,0333% (Приклад 8) Відносно сифілісу активність проявляється при концентраціях 0,0002% і 0,0167% (Приклад 4) Таким чином, проявляється чітко виявлений синергізм дії хлоргексидину з аміксином Враховуючи співвідношення активних концентрацій та їх значения, можна зробити висновок, що при суміс ному використанні хлоргексидин є "каталізатором" дії аміксину, знижуючи ефективну концентрацію аміксину в 5 разів Заявлений засіб апробовано в Центрі по вивченню хвороб, які передаються статевим шляхом (м Одеса) Підтверджена ДОЦІЛЬНІСТЬ І ефективність застосування даного засобу для профілактики захворювань які передаються статевим шляхом Таблиця Результати вивчення протиінфекційної дії хлоргексидіна, аміксина при індивідуальному та спільному використанні при різній концентрації компонентів Приклад № Приклад 1 Приклад 2 Приклад 3 Приклад 4 Приклад 5 Приклад 6 Приклад 7 Приклад 8 Приклад 9 Приклад 10 Приклад 11 Приклад 12 Приклад 13 Приклад 14 Приклад 15 Приклад 16 Приклад 17 Приклад 18 Приклад 19 Приклад 20 Приклад 21 Приклад 22 Приклад 23 Приклад 24 Приклад 25 Приклад 26 Приклад 27 Приклад 28 Приклад 29 Приклад ЗО Приклад 31 Приклад 32 Приклад 33 Приклад 34 Приклад 35 Приклад 36 Приклад 37 Приклад 38 Приклад 39 Приклад 40 Приклад 41 Приклад 42 Приклад 43 Приклад 44 Приклад 45 Приклад 46 Приклад 47 Концентрація, % ХГ AM 0 00670 0 06670 0 00020 0 00330 0 00020 0 01000 0 00020 0 01670 0 00030 0 00670 0 00030 0 01330 0 00030 0 02000 0 00030 0 03330 0 00050 0 00330 0 00050 0 01000 0 00050 0 01670 0 00070 0 00670 0 00070 0 01330 0 00070 0 02670 0 00080 0 00330 0 00080 0 01000 0 00080 0 01670 0 00100 0 00670 0 00100 0 02000 0 00100 0 03330 0 00130 0 01330 0 00130 0 02670 0 00170 0 00670 0 00170 0 02000 0 00170 0 03330 0 00170 0 10000 0 00170 0 16670 0 00330 0 06670 0 00330 0 13330 0 00500 0 03330 0 00500 0 10000 0 00500 0 16670 0 00670 0 13330 0 00830 0 03330 0 00830 0 10000 0 00830 0 16670 0 00000 0 00330 0 00000 0 00670 0 00000 0 01000 0 00000 0 01330 0 00000 0 01670 0 00000 0 02000 0 00000 0 02670 0 00000 0 03330 0 00000 0 06670 0 00000 0 10000 0 00000 0 13330 Наявність ефекту іпбування (+/-) + +CVH) + +(VII) +(VII) + + + + + + + + + + + + + 55314 Продовження таблиці Приклад № Приклад Приклад Приклад Приклад Приклад Приклад Приклад Приклад Приклад Приклад Приклад Приклад Приклад Приклад 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Концентрація, % ХГ AM 00000 0 16670 00020 0 00000 00030 0 00000 00050 0 00000 00070 0 00000 00080 0 00000 00100 0 00000 00130 0 00000 00170 0 00000 00330 0 00000 00500 0 00000 00670 0 00000 00830 0 00000 00000 0 00000 Підписано до друку 03 04 2003 р Наявність ефекту іпбування (+/-) + + Тираж 39 прим ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24