Спосіб ідентифікації патотипів збудника раку картоплі synchytrium endobioticum (schilb.) perc. інфрачервоною спектроскопією

Спосіб ідентифікації патотипів збудника раку картоплі Synchytrium endobioticum (Schilb.) Perc., 3 ська рожева; Слов'янка, Тетерів, Загадка, Серпанок, Слов'янка, Тетерів, Загадка, Серпанок, Фантазія, Поран, Червона рута, Щедрик, Калинівська, Малинська біла, Базис, Сантарка, Божедар. По проходженні 75 днів проводили облік уражених сортів-диференціаторів картоплі, які показали різну реакцію на зараження патогеном: сорти та гібриди картоплі першої групи уразились всіма 5-ма патотипами збудника раку П 85 145-5, Вале, Поліська рожева; другої групи - сорти картоплі уразились лише 4-ма агресивними патотипами: 11 - Між гірським, 13 - Рахівським, 18 - Ясинським та 22 - Бистрецьким. Це сорти картоплі: Слов'янка, Тетерів, Загадка, Серпанок. Сорти картоплі третьої групи диференційовано уразились патотипами хвороби: Фантазія, Поран, уразились 11, 13 та 18 агресивними патотипами; Червона рута - уразилась 11 та 22 патотипами; Щедрик показав ураження 18 та 22 патотипами; Забава уразилась 13,18 та 22 патотипом збудника хвороби. Калинівська уразилась 11 патотипом. Сорт картоплі Малинська біла уразився лише 13 патотипом збудника хвороби. Сорти-диференціатори четвертої групи Базис, Сантарка, Божедар не уразились жодним патотипом збудника хвороби Отримані результати наведено у таблиці 1. Приклад 2. Зразки бульб сортів-диференціаторів картоплі у фазі, коли паростки досягали 1–2 мм заражали літніми зооспорами збудника раку протягом 24 годин при 11-13°С (фото. Зараження контрольного сорту картоплі Вале зооспорами зі свіжих ракових наростів збудника раку). Для цього на верхівку бульби картоплі навколо паросткової частини закріплювали паперове кільце за допомогою суміші парафіну та вазеліну (1:0,5). В кільце наливали дистильовану воду, поміщали свіжі ракові нарости розміром 0,5см3, в яких вміщались літні зооспорангії зі зооспорами збудника хвороби. Зразки поміщали в клімокамеру з підвищеною вологістю і температурою 11-13°С (фото). Час експозиції 24 години. Інфекцію з паперовими кільцями знімали з бульб, а зразки залишали в темряві на 21 добу при температурі 1718°С до прояви симптомів захворювання. На 21-й день проводили облік уражених бульб картоплі [56]. Уражені паростки картоплі поміщали в кювету інфрачервоного аналізатора ІФА-61. При довжині хвили 1510нм визначали ступінь стійкості до кожного патотипу. З метою підвищення точності аналізу за результат брали середнє із трьох значень, отриманих при повороті кювети на 90°. Ступінь стійкості картоплі до збудника раку визначали за формулою: У  К  ОГ  ( W ) де: К - константа градуйованого рівняння; ОГ - оптична густина при (W) – аналітична довжина хвилі (1510нм); У – ступінь стійкості зразків картоплі до збудника раку (в %). Математичну обробку даних поводили за Масловим Ю.І. [4]. Результати досліджень наведені у таблиці 2. Для діагностики використовували 3 ступені (групи) оцінки: 57070 4 1 група - високостійкі сорти та гібриди. На паростках бульб картоплі цієї групи сортів проявляються захисні некрози; допускаються поодинокі дозрілі соруси (більше 70%); 2 група - слабкостійкі зразки або з польовою стійкістю. Проявляються розсіяні або щільні соруси, некроз частковий або відсутній (більше 30%); 3 група - сприйнятливі сорти та гібриди. На паростках розвиваються щільні дозрілі соруси із зооспорангіями, паростки деформуються, утворюються ракові нарости (1-30%). У тест-сортів картоплі 1-ої групи, що уражуються всіма патотипами збудника раку - Лорх, гібрид П 85 145-5, Поліська рожева ступінь стійкості коливався у межах 11,4-13,2%. У тест-сортів картоплі 2-ої групи, що не уражуються Д1 - звичайним патотипом раку, а мають позитивну реакцію до 4-х агресивних патотипів збудника хвороби - Слов янка, Тетерів, Серпанок, ступінь стійкості при ураженні звичайним патотипом склав 89,4-90,8%; при ураженні агресивними патотипами - 18,8-30,8%. З тест-сортів картоплі 3-ої групи, які диференцьовано уражуються патотипами збудника раку у сорту Фантазія ступінь стійкості при ураженні звичайним патотипом збудника раку склав 90,8%; 1119,6%; 13-18,8%; 18-21,9%; 22-72,6%. У сорту картоплі Поран при ураженні звичайним патотипом ступінь стійкості склав 89,6%; 11-19,6%; 13-26,6%; 18-28,8%; 22-74,8%. Сорт картоплі Червона рута показав позитивну реакцію при ураженні 11 (Міжгірським) - 21,6%, 13 (Рахівським) - 198% та 22 (Бистрецьким) - 19,4% агресивними патотипами. При зараженні звичайним патотипом збудника раку ступінь стійкості високий - 90,8%. 18 (ясинським) патотипом - 80,8%. Сорт картоплі Щедрик показав високий ступінь стійкості при зараженні звичайним патолтипом - 88,4%, 11-88,3%, 1389,6%. При зараженні 18 патотипом ступінь склав 21,4%. 22-21,6%. Сорт Забава показав позитивну реакцію при зараженні 13, 18 та 22 агресивними патотипами .При цьому ступінь склав 24,6%, 22,8% та 25,8%. У сорту Калинівська високий ступінь стійкості до раку було при зараженні звичайним патотипом - 92,8% та 22-90,6%. Сорт Малинська біла показала позитивну реакцію на зараження 13 (Рахівським) агресивним патотипом збудника хвороби. У тест-сортів картоплі 4-ої групи (Базис, Сантарка, Божедар), які не уражувались жодним патотипом збудника раку ступінь стійкості коливався у межах 82,6-100%. Процес визначення ступеню стійкості до різних патотипів раку 16 сортів-диференціаторів картоплі на інфрачервоному аналізаторі ІФА-61 склав 45 хвилин, а способом зараження зооспорами зі свіжих ракових наростів -21 добу. Запропонований метод ідентифікації патотипів збудника раку картоплі підтверджує експериментальна перевірка, яка здійснювалась при зараженні тест-сортів картоплі відомими 5-ма патотипами збудника раку з різних регіонів України. 5 57070 6 Таблиця 1 Реакція тест-сортів картоплі української селекції на зараження патотипами збудника раку (2008-2009рр.) Група 1 2 3 4 Назва сорту Лорх Гібрид 85 145-5 Поліська рожева Слов'янка Тетерів Серпанок Фантазія Поран Червона рута Щедрик Забава Калинівська Малинська біла Базис Сантарка Божедар Д1 звичайний + + + 11 Міжгір'я + + + + + + + + + + Патотипи 13 Рахів + + + + + + + + + + + 18 Ясиня + + + + + + + + + + 22 Бистрець + + + + + + + + + + - ураження збудником раку картоплі; - - відсутність ураження збудником раку. Таблиця 2 Реакція тест-сортів картоплі української селекції на зараження патотипами збудника раку, визначена інфрачервоною спектроскопією (%) в 2009р. Назва сорту картоплі 1 2 3 4 Лорх Гібрид 85 145-5 Поліська рожева Слов'янка Тетерів Серпанок Фантазія Поран Червона рута Щедрик Забава Калинівська Малинська біла Базис Сантарка Божедар Д1 звичайн. 12,6 11,6 11,4 89,4 90,8 89,6 90,8 89,6 90,6 88,4 92,6 92,8 90,6 89,8 90,9 100 Процес визначення ступеню стійкості до різних патотипів раку 16 сортів-диференціаторів картоплі на інфрачервоному аналізаторі ІФА-61 склав 45 хвилин, а способом зараження зооспорами зі свіжих ракових наростів - 21 добу. Джерела інформації: 1. Зеля А.Г. Стійкість картоплі проти збудника раку Synchytrium endobioticum (Schilb.) Perc, мето Ступінь стійкості в 11 Міжгір'я 13 Рахів 11,9 12,6 11,8 11,7 12,6 12,4 32,4 21,4 21,8 26,6 19,4 21,6 21,8 18,8 19,6 26,6 21,6 19,8 88,3 89,6 90,6 24,6 21,8 90,6 90,8 27,4 90,8 90,6 89,8 86,8 90,5 89,8 %, (М+m) 18 Ясиня 11,7 12,8 11,6 29,6 30,8 21,9 19,4 28,8 80,8 21,4 22,8 90,8 87,8 88,9 87,9 91,8 22 Бистрець 11,3 13,2 12,7 30,4 28,8 19,8 72,6 74,8 19,4 21,6 25,8 90,6 86,8 86,8 82,6 100 ди його виявлення і диференціації,/Авт канд. дис2009.-24с. 2. Голик И.В. О различиях между патотипами возбудителя рака картофеля. Защита растений, 1988. – С. 3. Деклараційний патент на корисну модель №17050А, МКВ А01НЗ/00. Спосіб диференціації патотипів збудника раку картоплі Synchytrium 7 57070 endobioticum (Schilb.) Perc. з ґрунту. Сологуб О.С, Зеля А.Г., Мельник П.О. заявл. 16.02.2006р., опубл. 15.09.2006 // Офіційний бюлетень Промислова власність, 2006. №2, ч.2. - С.14. 4. Маслов Ю.И. Статистическая обработка данных биохимических исследований // Методы биохимического анализа растений. Л., 1978. - С.163-178. 5. Мельник П.О. Етіологія раку картоплі, біоекологічне обґрунтування заходів його профілактики та обмеження розвитку. - Чернівці: Прут, 2003. 284с. Комп’ютерна верстка Н. Лиcенко 8 6. Яковлева В.И. Изменчивость паразитической активности Synchitrium endobioticum (Schilb.) Perc. при развитии на устойчивых сортах. – В сб. Рак картофеля и меры борьбы с ним. – М., Колос, 1964. – С. 98–109. 7. Zelya A. Selection of new potato testassortment for identification of potato wart Synchytrium endobioticum (Schilb.) Perc.//European Phitosanitary Conference on potato and other arable crops. Chernivtsy, 2008,06-10/1 0.P.12 Підписне Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601