4-(4-гідроксифеніл)-3,4-дигідропіримідо[1,2-a]бензімідазол-2(1н)-он

1. 4-(4-Гідроксифеніл)-3,4-дигідропіримідо[1,2α]бензімідазол-2(1Н)-он формули: OH Корисна модель відноситься до хімікофармацевтичної промисловості, зокрема, до біологічно активних сполук, які мають піримідо[1,2]бензімідазол-2(1H)-оновий остов. Серед похідних піримідо[1,2-]бензімідазол2(1H)-ону виявлені сполуки, які проявляють кардіоваскулярну [1, 2] та імунотропну [3,4] активність, антиагрегантні властивості на тлі розвитку цукрового діабету [5, 6], виступають інгібіторами окремих протеїнкіназ [7]. Виходячи з цього, 4-(4гідрокси-феніл)-3,4-дигідропіримідо[1,2]бензімідазол-2(1H)-он є перспективним для дослідження придатності його використання як лікарського засобу при лікуванні серцево-судинних та ендокринних захворювань. Найбільш близькою до сполуки, що заявляється, є 4-феніл-3,4-дигідро-піримідо[1,2-]бензімідазол-2(1H)-он [8], що має антиоксидантні властивості та гальмує прояви метаболічного синдрому [9]. Недоліком цієї сполуки є низька розчинність у воді та більшості органічних розчинників, що ускладнює її подальше просування як потенційної лікарської субстанції. Задачею корисної моделі є одержання похідної тетрагідропіримідо[1,2-]бензімідазол-2(1H)ону як біологічно активної сполуки з антиоксидантними властивостями і підвищеною у порівнянні з аналогом розчинністю, придатної для створення на її основі лікарських засобів для лікування серцево-судинних та ендокринних захворювань. Поставлена задача вирішується тим, що синтезують 4-(4-гідроксифеніл)-3,4-дигідропіримідо[1,2-]бензімідазол-2(1H)-он формули: N N N H O (19) UA (11) 57766 (13) U . 2. Сполука за п. 1, що проявляє антиоксидантну активність. 3 57766 4 OH N N що проявляє антиоксидантну активність. Технічний результат - розширення спектру сполук, які можуть бути використані у створенні ліків. N H O Зазначену сполуку одержують шляхом циклоконденсації 2-амінобензімідазолу з метиловим естером 4-гідроксикоричної кислоти при нагріванні у середовищі органічного розчинника, зокрема, диметилформаміді (ДМФА): OH O NH N ДМФА + HO N OMe NH2 N 2 1 Хімічну будову синтезованої сполуки доведено спектральними методами (ЯМР 1Н, ІЧ). Для одержання 4-(4-гідроксифеніл)-3,4дигідропіримідо[1,2-]бензімідазол-2(1H)-ону суміш 0.27 г (2 ммоль) 2-амінобензімідазолу, 0.5 г (3 ммоль) метилцинамату у 1 мл ДМФА кип'ятять 2 год, охолоджують, додають 5 мл 2-пропанолу, відфільтровують 0.4 г (72 %) безбарвних кристалів з т. пл. > 300 °С. C16H13N3O2. Визначено С, %: 69.1; Н, %: 4.8; N, %: 15.0. Розраховано С, %: 68.8; Н, %: 4.7; N, %: 15.1. ІЧ спектр (в КВr), см-1: 3236-2536, 1704, 1676, 1632. Спектр ЯМР 1Н (ДМСО-d6, 200 N H O 3 МГц), , м.ч.: 11.62 (р.с, 1Н, NH), 9.54 (с, 1Н, ОН), 7.43-6.96 (м., 4Н, C6H4), 6,94-6.68 (д.д., 4Н, С6Н4, J=8.6 Гц), 5.76 (СНх, 1Н, д.д., JAX=6.8, JBX= 3.8 Гц), 3.40 (СНВ, 1Н, д.д.), 2.86 (СНА, д.д., 1Н, JAB = 16.3). Проведено порівняння розчинності 4-(4гідроксифеніл)-3,4-дигідро-піримідо[1,2]бензімідазол-2(1H)-ону (сполука А) та 4-феніл3,4-дигідропіримідо[1,2-]бензімідазол-2(1H)-ону (сполука Б). OH N N N N H O A Для позначення розчинності у фармакопейному аналізі використовують описові терміни, які у температурному інтервалі від 15 °С до 25 °С мають значення від "дуже легко розчинний" до "прак N N H O Б тично не розчинний" [10]. Для дослідження здатності речовини розчинятися беруть наважку 10 мг, переносять її у конічну колбу і додають певний розчинник порціями, об'єм яких вимірюють бюрет 5 57766 кою. Розчинення здійснюють при кімнатній темпе 6 ратурі. Результати подано у таблиці 1. Таблиця 1 Розчинність сполук А та Б Розчинник Етанол Сполука А Об'єм розчинника, Описовий термін рознеобхідний для розчинності чинення 10 мг речовини, мл 102 Практично не розчинна Метанол 16 Дуже мало розчинна Хлороформ 300 Практично не розчинна Диметилсульфоксид ДМФА Розчин НСl у етанолі 0.1 моль/л Розчин КОН у етанолі 0.5 моль/л 0.9 Задовільно розчинна 1.2 1.5 Мало розчинна Мало розчинна 0.5 Задовільно розчинна Антиоксидантну активність 4-(4гідроксифеніл)-3,4-дигідропіримідо-[1,2]бензімідазол-2(1H)-ону (сполука А) визначали in vitro на моделі окислення ліпопротеїнів яєчного жовтка [11]. При дослідженнях сполуку додавали до розчину ліпідів у дозах 10, 40 та 100 мкМ та проводили інкубацію при 37 °С. Рівень малонового діальдегіду (МДА) визначали спектрофотометрично, загальну антиоксидантну активність розраховували у відсотках зниження вмісту МДА у порівнянні з контрольною пробою [12]. В якості Сполука Б Об'єм розчинника, Описовий термін необхідний для розрозчинності чинення 10 мг речовини, мл 260 Практично не розчинна 160 Практично не розчинна 190 Практично не розчинна 15 Дуже мало розчинна 8 Мало розчинна 7 Мало розчинна 2 Мало розчинна препаратів порівняння застосовували 4-феніл-3,4дигідропіримідо[1,2-]бензімідазол-2(1H)-он (сполука Б) та вітамін Е. Встановлено, що загальна антиоксидантна активність досліджуваної речовини А і препарату порівняння - вітаміну Е, була найвищою в дозі 40 мкМ, а у сполуки Б максимальний ефект спостерігався лише в дозі 100 мкМ. При цьому гальмування процесів перекисного окислення ліпідів (ПОЛ) на 50 % (ІС50) зафіксовано при застосуванні сполуки А в концентрації 10 мкМ, а сполуки Б - 40 мкМ (табл. 2). Таблиця 2 Показники загальної антиоксидантної активності, одержані на моделі окислення ліпопротеїнів яєчного жовтка, за умов застосування 4-(4-гідроксифеніл)-3,4-дигідропіримідо[1,2-]бензімідазол-2(1H)-ону (сполука А) та 4-феніл-3,4-дигідропіримідо[1,2-]бензімідазол-2(1H)-ону (сполука Б) у різних дозах, (X±Sx) Концентрація речовин, мкМ 10 40 100 Сполука А 52.2±8.7 69.3±3.8 54.7±5.9 Загальна антиоксидантна активність, % Сполука Б 42.4±3.6 53.6±2.7 61.2±2.6 Слід зазначити, що 4-(4-гідроксифеніл)-3,4дигідропіримідо[1,2-]бензімідазол-2(1H)-он виявив досить високу антиоксидантну активність в найменшій з досліджуваних доз (10 мкМ), перевищував показники щодо гальмування ПОЛ у прототипа (сполука Б) в дозах 10 та 40 мкМ, але дещо поступався дії препарату порівняння вітаміну Е в дозах 40 та 100 мкМ. Гостру токсичність 4-(4-гідроксифеніл)-3,4дигідропіримідо[1,2-]бензімідазол-2(1H)-ону визначали на 11 мишах-самцях масою тіла 25-30 г. Сполуку вводили перорально (через зонд) у вигляді суспензії на рослинній олії у дозах 3 і 5 г/кг. В результаті оцінки гострої токсичності досліджува Вітамін Е 37.4±2.0 92.1±3.0 90.5±4.2 ної сполуки наявні прояви інтоксикації були відсутні. Загибелі тварин не зареєстровано. Встановлено, що 4-(4-гідроксифеніл)-3,4-дигідропіримідо[1,2]бензімідазол-2(1H)-он за класифікацією Сидорова К.К. [13] можна віднести до групи практично нетоксичних речовин. Таким чином, запропонована нова сполука - 4(4-гідроксифеніл)-3,4-дигідропіримідо[1,2]бензімідазол-2(1H)-он, яка проявляє антиоксидантну активність, є перспективною для використання при створенні лікарських засобів. Джерела інформації: 1. Synthesis of unsymmetrically substituted 1,4dihydropyrimidines and analogous calcium 7 57766 antagonists by microwave heat [Текст] /R. Alajarin, P. Jordan, J. J. Vaquero, J. Alvarez-Builla //Synthesis. 1995. - № 4. - P. 389 - 391. 2. Imidazo[1,5-]pyrimidine and benzo[4,5]imidazo[1,2-]pyrimidine derivatives as calcium antagonists [Текст] /R. Alajarin, J. J. Vaquero, J. Alvarez-Builla [et al.] //Bioorg. Med. Chem. - 1994. - Vol. 2, № 5. - P. 323 - 329. 3. Nawrocka, W. Synthesis and Immunotropic activity of Some 2-Aminobenzimidazoles, Part 4 [Текст] /W. Nawrocka, M. Zimecki //Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem. - 1998. - Vol. 331. - P. 249 - 253. 4. Immunotropic Properties of 2Aminobenzimidazole Derivatives in Cultures of Human Peripheral Biood Cells, Part 5 [Текст] / W. Nawrocka, M. Zimecki, T. Kuznicki, W. Kowalska //Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem. - 1999. - Vol. 332.-P. 85-90. 5. Пат. 5623073 US, МПК C07D487/04, A61K31/415. Benzimidazole compounds [Електронний ресурс] /V. A. Anisimova, M. V. Levchenko, Т. В. Коrochina [et al.] (RU); applicant ADIR (FR). №19930063531; заявл. 18.05.93; опубл. 22.04.97. Режим доступу: www.uspto.gov. 6. Пат. 2061481 RU, МПК6 А61К31/415. Средство, обладающее антиагрегационной активностью [Електронний ресурс] /Г. В. Ковалев, А. А. Спасов, В. А. Анисимова [и др.] (RU); заявители и патентообладатели: НИИ физической и органической химии Ростовского гос. ун-та, Волгоградский мед. инт, Пермский фарм. ин-т, НИИ "Диабет" эндокринологического научного центра РАМН (RU). №4935356; заявл. 17.05.91; опубл. 10.06.96. - Режим доступу: www.fips.ru. 7. Пат. 15475 KR, МПК C07D401/04, C07D413/14. Pyrimidine-substituted benzimidazole derivatives as protein kinase inhibitors [Електронний ресурс] /G. Zhang, P. Ren, X. Wang [et al.] (CN); Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко 8 патентовласник IRM LLC (US). -№20077030728; заявл. 28.12.07; опубл. 19.02.08. - Режим доступу: www.ep.esp@cenet.com. 8. Пат. 17943 UA, МПК C07D237/00, C07D487/02. Спосіб одержання 4-арил-3,4дигідропіримідо[1,2-]бензімідазол-2(1H)-онів [Текст] /В. В. Ліпсон, М. Г. Широбокова; заявник Інститут проблем ендокринної патології (UA). - № 200604606; заявл. 25.04.2006; опубл. 16.10.2006, Бюл. № 10. - 6 с. 9. Пат. 30964 МПК8 А61K31/16, А61K31/41. Застосування 4-феніл-3,4-дигідропіримідо[1,2]бензімідазол-2(1H)-ону, як речовини, що має антиоксидантні властивості та гальмує прояви метаболічного синдрому [Текст] /В. В. Полторак, Н. І. Горбенко, А. І. Гладких [та ін.] (UA); патентовласник Інститут проблем ендокринної патології (UA). -№ U200709416; заявл. 20.08.2007; опубл. 25.03.2008, Бюл. №6. -5 с. 10. Державна Фармакопея України [Текст] /Державне підприємство "Науково-експертний фармакопейний центр". - 1-е вид. - X.: РІРЕГ, 2001. 556 с. 11. Оценка антиокислительной активности плазмы крови с применением желточных липопротеинов [Текст] /Г. И. Клебанов, И. В. Бабенкова, Ю. О. Теседкин [и др.] //Лаб. дело. - 1985. - № 2. - С. 59-62. 12. Стальная, И. Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты [Текст] / И. Д. Стальная, Г. Т. Гаришвили // Современные методы биохимии. - 1977. - № 5. С. 77-78. 13. Сидоров К.К. О классификации токсичности ядов при парентеральных способах введения [Текст] // Токсикология новых промышленных химических веществ /под ред. А. А. Летавета и B. C. Саноцкого. - М.: Медицина, 1973. -Вып. 13. - 158 с. Підписне Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601