Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Акридинілгідразиди піридинкарбонових кислот формули

 ,

де

R1 = 2-Υ; R2 = R3 = Η, Υ = CONH-A, або R1 = 4-Υ; R2 = R3 = Η, Υ = CONH-A, або R1 = 2-Υ, (R2 + R3) = С4Н4, Υ = CONH-A, або R1 = 4-Υ, R2 = R3 = Η, Υ = CONHCH2CONH-A,

причому

,

як індуктори α-інтерферону.

Текст

Акридинілгідразиди піридинкарбонових кислот формули КИСЛОТ ЯК ІНДУКТОРИ А R1 = 2-Y, R2 = R3 = Н, Y = CONH-A, або R1 = 4-Y, R2 = R3 = Н, Y = CONH-A, або R1 = 2-Y, (R2 + R3) = С4Н4, Y = CONH-A, або R1 = 4-Y, R2 = R3 = Н, Y = CONHCH2CONH-A, причому А= як індуктори сннтерферону R3 Винахід відноситься до біоорганічної хімії, зокрема до синтезу індукторів інтерферону і може бути використаний для створення нових противірусних та протипухлинних засобів Індукція інтерферону являє собою один з найбільш діючих механізмів противірусного захисту, нормалізації імунного статусу і корекції імунних реакцій [Ершов Ф И , Новохатский А С Индукторы интерферона ,-М Медицина, 1982, 180с] Досьогодення в КЛІНІЧНІЙ практиці є низка індукторів інтерферону як синтетичного, так і природного походження [Ф И, Ершов, Н Н Носик, Э Б Тазулахова Продукция интерферона при использовании индукторов разной природи // Бюлетень экспериментальной биологии и медицины -1983 - №2 -3 66-68] Незважаючи на значні успіхи, досягнуті в корекції імунітету за допомогою цих препаратів, у їхньому застосуванні відзначається низка проблем Так, більшість індукторів (цнклоферон, ларіфан, лаферон, реаферон і т п) вимагають ІН'ЄКЦІЙНИЙ спосіб уведення [Ершов Ф И , Чижов Н П , Тазулахова Э Б Противовирусные средства -М Ингода, 1983 -104с] Деяким з них властива алергенність чи токсичність Найбільш активним індуктором є polyl polyC, що дає in vitro до 2560 од/мл, однак, саме він і є одним з найбільш токсичних [Ершов Ф И , Чиядов Н П , Тазулахова Э Б Противовирусные средства -М Ингода, 1983 -104с] Істотну проблему в індукції інтерферону складає гіпореаісгивність (для багатьох індукторів вона є перехресною) і пперіндукція [Иванова А М Ефективності» новых високо- и низко молекулярных индукторов интерферона при экспериментальных вирусных инфекциях Дис канд биол наук 03 00 06 - М , 1991 -260с] Найближчим аналогом до винаходу, що заявляється, є аміксин - низькомолекулярний пероральний індуктор інтерферону і противірусний препарат, що застосовується у КЛІНІЧНІЙ практиці (див Андронати С А , Литвинова ГО о (О 60793 Л А, Головенко Н Я Пероральний индуїсгор интерферона "Амиксин" и его аналоги //Журн АМН Украины -1999-Т 5, №1 -3 53-66) Вибір аналогу обумовлен наявністю у сполук, що заявляються, і аміксину загальних ознак, таких як походження (синтетичні речовини), низька молекулярна маса (менш за 1000), СПІЛЬНІ структурні фрагменти (наявність трициклічної планарної системи), біологічної дії (індукція інтерферону) Але, титри інтерферону, що індукує аміксин, відносно низькі (80 - 160 при рН = 2 та 160 - 320 при рН = 7) В основу винаходу поставлено задачу розширення спектра індукторів інтерферону за рахунок раніше невивчених класів речовин Поставлена задача вирішується за допомогою сполук 1 - 4, що заявляються Сполуку 4 одержують за чотиристадійною схемою (схема 2) обробкою піридин-4-карбо-новоі кислоти (8) тюнілхлоридом, ацилюванням отриманим хлорангідридом 9 метилового естеру гліцину (10) із наступним пдразинолізом естеру 11 й акридинілюванням ВІДПОВІДНОГО гідразиду 12 Проміжні продукти 9-11 використовують у синтезах без очищення та ідентифікації Будову гідразиду 12 після перекристалізації з метанолу підтверджували мас- та ІЧ-спектроско-піею Будову встановлено на підставі наявності молекулярного юну в мас-спектрі та наявності смуги коливань NHr- та NH-rpyn в ІЧ-спектрі (широка інтенсивна смуга складної структури при 3400 - 3150см \ що відповідає валентним коливанням N-H-зв'язків різного ступеню та виду асоціації} 1-4 1 Піридин-2-карбоновоі кислоти N'-акридин-Эіл-пдразид (R1 = 2-Y, R2 = R3 = Н, Y = CONH-A) 2 Піридин-4-карбоновоі кислоти N'-акридин-Эіл-пдразид (R1 = 4-Y, R2 = R3 = Н, Y = CONH-A) 3 Хінолш-2-карбновоі кислоти І\Г-акрил-9-ілпдразид (R1 =2-Y, (R2 + R3) = С4Н4, Y = СОМН-А), 4 М-(г\Г-Акридин-9-іл-пдразинокарбонілметил)ізонікотинамід (R1 = 4-Y, R2 = R3 = Н, Y = CONHCH2CONH-A), де Зважаючи на те, що ПОХІДНІ пірідинкарбонових кислот є важливим класом біологічно активних речовин, а деякі з них є туберкулостатичними препаратами (ПОХІДНІ піридин-4-карбоновоі кислоти), саме ці сполуки обрані нами для рішення поставленої задачі Причинно-наслідкові взаємини між структурою об'єктів, що заявляються, і їхньою біологічною дією полягають, очевидно, у здатності штеркаляторів, що містять залишок піридину, зв'язуватися опероном гена інтерферону, що повинно приводити до дерепресм гена, його транскрипції і наступному синтезу інтерферону Сполуки 1 - 3, що заявляються, отримують реакцією комерційне доступних гідразидів піридин4-карбоновоі кислоти (5), піридин-2-карбоновоі кислоти (6) та хінолш-2-карбоновоі кислоти (7) з 9метоксіакридином за схемою 1 Отримання сполук, що заявляються,та їх штерфероніндухуючі властивості підтверджуються наступними прикладами Приклад 1 Отримання піридин-2-карбоновоі кислоти І\Г-акридин-9-іл-пдразиду (1) До киплячого насиченого розчину 0 408 г (0 003 моль} гідразиду піридин-2-карбоновоі кислоти у метанолі при перемішуванні додали 0 628г (0 003 моль) 9-метоксіакридину Осад, що випав із реакційної суміші за 1 - 5 хв, відфільтрували гарячим, промили на фільтрі холодним метанолом (2x1 Омл), висушили у вакуумі при кімнатній температурі Вихід 0 811г (86%), Приклад 2 Отримання піридин-4-карбоновоі кислоти г\І"-акридин-9-іл-пдразиду (2) До киплячого насиченого розчину 0 408г (0 003 моль) гідразиду піридин-4-карбоновоі кислоти у метанолі при перемішуванні додали 0 628г (0 003 моль) 9-метоксіакридину Осад, що випав із реакційної суміші за 1 - 5 хв, відфільтрували гарячим, промили на фільтрі холодним метанолом (2x1 Омл) та висушили у вакуумі при кімнатній температурі Вихід 0 905г (96%) 4 Приклад 3 Отримання хінолш-2-карбоновоі кислоти г\Г-акридин-9-іл-пдразиду (3) До киплячого насиченого розчину 0,562г (0 003 моль) гідразиду хінолш-2-карбоновоі кислоти у 60793 шкубували 24 години при 37°С Потім у надосадовій рідині визначали активність інтерферону з використанням культури клітин Л41 (лімфоідні клітини людини) за раніше опублікованою методикою [ДОКЛІНІЧНІ дослідження лікарських засобів Методичні рекомендації За редакцією член-кореспондента АМН України О В Стефанова / Міністерство охорони здоров'я України Державний фармакологічний центр,, Київ, 2001 С 392] (пригнічення цитопатогенної дії вірусу везикулярного стоматиту) Визначення активності інтерферону здійснювали через 24-48год, коли доза внесеного вірусу везикулярного стоматиту (ВВС) 100 ТЦД50 викликає повну дегенерацію клітин у контролі вірусу (KB) за відсутністю дегенерації у неінфікованій культурі За титр інтерферону в ОД (одиницях дії) приймали величину, зворотну розведенню препарату, при якому культура клітин в 50% лунок була повністю захищена від цитопатогенної дії індикаторного вірусу Розрахунок активності інтерферону в МО ведеться за формулою X = титр зразка в ОД/мл х (активність СЗ /титр СЗ), Де X - активність інтерферону, індукованого в ДОСЛІДІ препаратом, що вивчається, виражена в МО/мл, ОД - титр інтерферону в ДОСЛІДНІЙ групі, МО - міжнародні одиниці, чисельник - активність інтерферону - СЗ в МО, яка відома заздалегідь, знаменник - титр інтерферону СЗ, отриманий в даному ДОСЛІДІ і виражений в одиницях дії, [(Піридин-4-карбоніл)амшо}оцтовоі кислоти зворотних до розведення препарату, гідразид До 4 2г (0 02 моль) [(піридш-4карбоніл)амшо]оцтовоі кислоти метилового естеру СЗ - стандартний зразок інтерферону з у Юмл метанолу додали 1 мл (0 02 моль) 100% визначеною активністю пдразинпдрату та кип'ятили 4 години Осад, що Титр індукованого інтерферону (максимальне випав, відфільтрували, промили на фітьтрі розведення супернатанту, при якому в 50% лунок холодним метанолом (2x1 Омл) цілком запобігалася дегенерація клітинного моношару) визначали в трьох рівнобіжних Перекристалізували з метанолу, висушили у експериментах Для первинного типування вакуумі Вихід 2 8 Г (72%) індукованого інтерферону супернатант підкисляли [(Піридин-4-карбоніл)амшо]оцтовоі кислоти N'до рН = 2, шкубували 4 години при 37°С, піднімали акридин-9-іл-пдразид (4) До киплячого насиченого рН до 7 і знову титрували як описано Після розчину 0 777г (0 004 моль) гідразиду [(піридин-4обробки кислотою у всіх випадках активність карбоніл)амшо]оцтовоі кислоти у 25мл метанолу зберігалася чи цілком незначно знижувалася, що при перемішуванні додали 0 837г (0 004 моль) 9свідчить на користь того, що індукований метоксіакриднну Осад, що випав за Юхв інтерферон відноситься до групи а-штерферонів відфільтрували, промили на фільтрі холодним метанолом (2x1 Омл) та висушили у вакуумі при Сполуки 1-4 спричиняють утворення кімнатній температурі Вихід 1 06г (71%) інтерферону у високих титрах (дані - діапазон значень, що отримані у трьох паралельних Визначення індукції інтерферону експериментах - наведені в таблиці 1) Для Інтерфероніндукуючу активність синтезованих первинного типування індукованого інтерферону сполук вивчали як описано [Доклінічні дослідження перед його титруванням проводилось інкубування лікарських засобів Методичні рекомендації За культуральної рідини при рН = 7 та рН = 2 Якщо редакцією член-кореспондента АМН України О В титр інтерферону, що отримано після інкубування Стефанова / Міністерство охорони здоров'я при рН = 2 декілька менший (у 2 - 4 рази), України Державний фармакологічний центр , Київ, дорівнює чи перебільшує' такий при рН = 7 (тобто 2001, С 392] індукований інтерферон є кислотостійким), то Інтерфероніндукуючу активність препаратів індукований інтерферон відноситься до групи авивчали в культурі лейкоцитів донорів штерферонів, якщо він значно нижчий (у 10 - 20 Використано лейкоцити донорської крові 0(1) разів і більше), то індукований інтерферон групи в концентрації 3x106кл/мол До відноситься до групи у-штерферонів лейкоцитарної маси концентрації Зх106кл/мол (кислотолабільних) [ДОКЛІНІЧНІ дослідження додавали препарати в концентрації Юмкг/мол, метанолі при перемішуванні додали 0,628г (0 003 моль) 9-метоксіакридину Осад, то випав із реакційної суміші за Юхв, відфільтрували, промили на фільтрі холодним метанолом та висушили у вакуумі при кімнатній температурі Вихід 0 98г (90%) Приклад 4 Піридин-4-карбоновоі кислоти хлорангідрид (9) До суміші 24 6г (0 2 моль) піридин-4карбонової кислоти та 1мл диметилформаміду додали протягом 1 години 15 5мл (0,22 моль) тюнілхлорида, реакційну суміш нагріли до розчинення кислоти та залишили на 12 годин при кімнатній температурі Осад, що випав, відфільтровували, промили 50мл петролейного етера, висушили у вакуумі водоструминного насоса, захищаючи хлорангідрид від води Вихід 25 5г (90%) [(Піридин-4-карбоніл)амшо]оцтовоі кислоти метиловий естер До розчину 10г карбонату натрію та 5г бікарбонату натрію у 50мл води додали 20мл суміші хлористого метилену та діетилового етера (1 1) порціями До суміші, що отримали, додали при 0°С та інтенсивному перемішуванні розчин 2,8г (0 02 моль) хлорангідриду піридин-4карбонової кислоти у 10мл суміші хлористого метилену та діетилового етера (1 1) По закінченні додавання температуру поступово підняли до кімнатної та перемішували протягом 8 годин Органічний шар відокремили від водного, промили водою (3x1 Омл) та висушили сульфатом натрію Розчинник випарили у вакуумі Сухий залишок перекристалізували із суміші хлороформу з діетиловим етером Вихід 25 5г (90%) лікарських засобів Методичні рекомендації / За ред О В, член-кор АМН України Стефанова, МОЗ України Державний фармакологічний центр Київ, 60793 8 2001, С 390 - 392] 3 наведених даних випливає, що об'єкти, що заявляються відносяться до індукторів а-штерферону Таблиця 1 Аналітичні властивості та інтерфероніндукуюча активність сполук, що заявляються Сполука Бруто-формула 1 2 3 4 C19H14N4O C19H14N4O C21H17N5O2 C23H16N4O Аміксин Тпл ,°С 272-273 325-326 213-214 292-293 С 72 71 72 58 67 82 75 S5 Підвищення титру штерферона після його обробки в кислому середовищі інтерпретується як вивільнення його із комплекс)' з баластними Комп'ютерна верстка О В Кураєв Найдено, % Н N 4 57 17 75 4 44 17 89 4 71 18 75 7 44 15 22 білками за середовищі Підписне Титр інтерферону рН = 7 рН = 2 >1280 >1280 1280 >640 >1280 >1280 >160 >1280 160-320 80-160 [М+] 314 314 371 364 рахунок їх гідролізу у кислому Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Acridinylhydrazides of derivatives of pyridin carboxylic acids as б-interferon inductors.

Автори англійською

Liakhov Serhii Anatoliiovych, Liakhova Olena Anatoliivna, Andronati Serhii Andriiovych, Rybalko Svitlana Leontiivna, Diadiun Svitlana Terentiivna

Назва патенту російською

Акридинилгидразиды производных пиридинкарбоновых кислот как индукторы б-интерферона.

Автори російською

Ляхов Сергей Анатольевич, Ляхова Елена Анатольевна, Андронати Сергей Андреевич, Рыбалко Светлана Леонтьевна, Дядюн Светлана Терентьевна

МПК / Мітки

МПК: A61P 31/12, C07D 215/16, A61K 31/4427, C07C 219/00, A61P 35/00, C07D 213/16

Мітки: кислот, a-інтерферону, піридинкарбонових, акридинілгідразиди, похідних, індуктори

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/4-60793-akridinilgidrazidi-pokhidnikh-piridinkarbonovikh-kislot-yak-induktori-a-interferonu.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Акридинілгідразиди похідних піридинкарбонових кислот як індуктори a-інтерферону</a>

Подібні патенти