Засіб визначення активності інфекційно-запальних процесів

Изобретение относится к медицине, в частности к диагностике инфекционно-воспалительных заболеваний, и может быть-использовано для определения активности инфекционно-воспалительного процесса. Целью изобретения является повышение Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике инфекционных болезней, и может быть использовано для определения активности инфекционно-воспалительного процесса. Цель изобретения - повышение точности способа. Способ осуществляют следующим образом. У больного из пальца в гепзринизированный капилляр производят забор крови. Герметически запаянные капилляры центрифугируют, лейковзвесь, полученную на границе плазма-эритроцит, растворяют в 1,5 мл раствора Хенкса и распределяют по 0,5 мл во флаконы. 8 первый флакон добавляют 0,1 мл физиологического раствора, во ҐОГ! 6а. Сущность способа заключто у больного из кропи аыде в спонтанной и реактивной хемилюиинесценции диагностируют острый воспалительный процесс, при повышении реактивной хемипых отсутствии стимуляции латексом - период ранней реконвалесценции, при повышении реактивной хем и люминесценции лейкоцитов под влиянием обоих стимуляторов - период поздней рекоиоалесценции. Изобретение позволяет с точностью 94,3% определять активность инфекционно-вослаяительного процесса. второй - 0,1 мл раствора опсонированного стафилококка, в третий - 0,1 мл частиц латекса, растворенных в физиологическом растворе в концентрации 10 /мл. Ко всем пробам добавляют 0.05 мл 0,5 мМ раствора люминала. После инкубации а термостате в течение 30 мим производят замер хемишо минесценции проб с помощью ФЭУ-39а„ Сопоставляют показатели н ее ти мул мро санной пробьб (спонтанную хемилюминесценстафилококкои и латексом проб (оеактыоострый воспалительный процесс при отсутствии разницы в показателях спонтанной и иии - при повыше 1615138 ний реактивной хемилюминесценции леикоцитов, стимулированных опг.оииропачным стафилококком в 1,5 раза и бопсс по сравнению со спонтанной и отсутствии стимуляции латексом и период поздней рекойвалесценции - при повышении реактивной хемилюминесценции лейкоцитов под влиянием обоих стимуляторов о 1,5 разп и более по сравнению со спонтанной, но досшгающей уровня сїимуляции у здоровых людей • П р и м е р 1. Ребенок К. семи лет поступил в детское отделение Л Б № 1 Киева на 16-й день заболевания с диаінозом: острая правосторонняя полиссгмснтарная бронхопневмония. Жалобы на глубокий влажный кашель, слабость, одышку. Температура субфебрильная. Из анамнеза - заболєі остро, лечился антибактериальными препаратами (ампициллином) в течение 10 дней Обьективно: частота дыхания 23/мии, выраженные симптомы интоксикации(блецноегь, синева под глазами), катаральных явлений со стороны верхних дыхательных путей нет. Топы сердца громкие, тахикардия (100 уд/мин), п легких перкуторное укорочение звука от угла лопатки донизу, хрипов нет. Живот МРГкий, печень па 1,5 см ниже подреберья, селезенка не пальпируется. При лабораторном обследовании общего анализа крови (по прототипу): количество лейкоцитов 8,4x10 /л; эозмноф. - 1; пал - 1 сегм.-42,лимф.-47;моноц -9;СОЭ - ГОЇЧ> >/ч. Учитывая длительность заболевания, ранее проводимую антибактериальную терапию и отсутствие четких клинико-лабораторных данных об активности инфекционно-воспалигельного процесса, для установления показаний в антибактериальной терапии и необходимого объема у\ длительности пеабилитацмончых мероприятий ребенку проведено исследование согласно предлагаемому изобретению Для этого у ребенка из пальца в гепаринизированный капилляр произведен забор кропи. Полученную при центриф". ировании капилляра лейковзвесь растворили D 1,5 мл раствора Хенкса. Взвесь лейк'чїитов в растворе Хенксз распределили на пробы по 0,5 мл. В первую пробу добавляли 0,1 мл физиолоїмческого раствора, во вторую - 0,1 мл опсонированного стафилококка, о третью 0,1 мл латекса. В пробы добавляли 0,05 мл 0,5 мМ раствора люминола, инкубировали их в термостате в течение 30 ммн и проводили замер хемилюмипесценции за 10 сек с помощью Ф Э У - 3 9 3 В результате проведенных исследований получены следующие данные: спонтанная хемилюминесценция лейкоцитов 5 10 15 20 2Ь 30 35 40 45 50 55 (Оез стмулиции) 15237 имп./с. реактивная хемшиомим^сценцмя лейкоцитов, снімулмроманных опсипироваїїньїм стафилококком 14965 ымп /с. реактивная хемилюминесценция лейкоцитов, стимулированных латексом - 15384 и м п . / с Следовательно, у данного ребенка существенной разницы в спонтанной и реактивной хемилюминесцениии лейкоцитов не выявлено, что согласно изобретению указывает на острый воспалительный процесс в организме. На основании полученных данных ребенку назначена антибактериальная терапия (цепорин) на двухнедельный срок и акіивная лрогивовоспа/ттельная терапия с включением физиотерапевтических мероприятий. Высокая активность воспалительного процесса была подтверждена при рентгенологическом исследовании: в области средней доли правого легкого выявлено гомогенное треЗІ\ЦІА предлагаемого способа получены следуюіцие данные: спонтанная хемилюминесценциялейкоцитов- 12750 имп./с, реактивная хекилюминесценция лейкоцитов, стимулированных опсонированным стафилококком - 21700 имп /с, реактивная хемилюминесценция лейкоцитов, стимулированных латексом - 13100 имп./с, что свидетельствовало о периоде ранней реконвалесценции. Перед выпиской и-ч стационара нэ фойе клинического выздоровления показатели хемилюминвеценцми лейкоцитов соответственно составили Б первой пробе- 12002 имп./с. по второй - 27500 имп./с, в третьей 24Ь00имп./с,что согласно изобретению соответствовало периоду поздней реконвалесценции. П р и м е р 2. Ребенок С. 5 лет поступил й детскоз отделение ДБ № 1 с диагнозом: острый .шелонсфоиі. Из анамнеза выяснено, что девочка заболела 2 месяца назад, получало антибактериальную терапию. Жзпобы в настоящее премя на слабость, вяпость, субфебриллитет. Объективно: ребенок бледен, синева под глазами. Тоны сердца ритмичны. В легких ьезируяярное дыхание. Живот мягкий, безбопезненный Печень и селезенка не увеличены, стул в норме, мочеиспускание безболезненно. 1635138 Общий анализ мочи без патологических изменений, анализ мочи по Нечмпоренко: эритроциты 0,5'10*Умл, лейкоциты 8,9-108/мл. Общий анализ кроем: гемоглобин 93 г/л.эритр. 3,5 %1012. лейкоциты -4*10°/л; Э.-2; п.-2; с.-32; л.-58; м.~6; СОЭ - 12 мм/ч Для установления поаноты и длительности антибактериальной терапии необходимо было выяснить активность инфекцмоннсвоспалительного процесса, что не удалось уточнить на основании общеклинических м известных лабораторных методов (а том числе по способу прототипу). Для решения поставленной задачи выполнено хемилюминесцентмое исследование лейкоцитов крови согласно описанной методике предлагаемого способа. В результате проведенного исследования получены следующие данные, спонтанная хемилюминесценция 17438 имп./с, реактивная хемилюминесценцил лейкоцитов, стимулированных опсонированным стафилококком 29400 имп./с, реактивная хем и люминесценция лейкоцитов, стимулированных 17280 имп./с. Следовательно, у данного больного выявлен _ -овышение реактивной хемилюминесцеьции лейкоцитов при стимуляции опсонированным стафилококком и отсутствие такового при стимуляции латексом, что свидетельствует о периоде ранней реконвзлесценции Установление активности инфекцион но-воспалительно го процесса позволило откорректировать назначение медицинских мероприятий: курс непрерывной антибактериальной терапии сменен нз интермитирующий. Точность постановки диагноза подтверждена биохимическими методами (С-реактивный белок (++), серому.соид 0,32 ед.). Повторное обследование ребенку по предлагаемому способу проводилось в динамике заболевания еженедельно. Данные, аналогичные вышеописанным, отмечались на протяжении еще трех ближайших недель. Через четыре недели со дня первичного обследования результаты полученных данных составляли: спонтанная хемилюминесценция - 12300 имп./с, реактивная хемилюминесценция лейкоцитов, стимулированных опсонированным стафилококком,28960 имп./с, реактивная хемилюминесценция лейкоцитов, стимулированных латексом, - 24644 имп./с, что свидетельствовало о периоде поздней реконвалесцекции и явилось основанием для выписки из стационара с. назначением амбулаторного лечения. Указанным изменени 5 Ю 15 20 25 30 35 40 45 50 55 хемилюминесцєнции лейкоцитов соот-Doea/'O выраженное клиническое улучшение: полная нормализация анализа мочи, исчезновение симптомов интоксикации. П р и м е о 3. Больная С. поступила в детское отделение ДБ № 1 с диагнозом, острый холецистохолангит. Жалобы при поступлении на интенсивную приступообразную боль в области правого подреберья. Заболела две недели назад, лечилась симптоматическими средствами. Объективно: кожные покропи бледные с иктеричным оттенком, Зев блелчый, чзык обложен желтоватым налетом Гоны сердца удовлетворительной звучности, тахикардия. В легких везикулярное дыхание. Живот мягкий, печень нз 2,5 см выступает из-под реберной дуги, болезненность при пальпации в области правого подреберья. Стул и мочеиспускание в норме. Общий анализ крови: лейкоциты 8.6-106/л, ЭОЗИН - 4 ; П . - 1;С. - 52; л. - 36;м. ~ 7 ; СОЭ - 19 мм/ч. Для назначений правильных медицинских мероприятий необходимо было отдифференцировать активный воспалительный процесс от поствоспалительных дискинетических явлений. С этой целью проведено исследование *по методике предлагаемого способа, в результате которого получены следующие данные: спонтанная хемилюминесценция ~ 11780 имп./с, реактивная хемилюминесценция при стимуляции лейкоцитов опсонированным стафилококком 27700 'імп./с, реактиная хемилюминесценция лейкоцитов, стимулированных латексом, - 249Ь0 имп /с. Следовательно, при стимуляции лейкоцитов у данного больного опсенированным стафилококком и латексом отмечается повышение реактивной хемилюминесцєнции по сравнению со спонтанной, однако выра* жеиность этой стимуляции не достигает уровня ее у здоровых людей, что свидетельствует о периоде поздней реконвалесценции. В связи с отсутствием активного воспаления антибактериальная терапия не назначалась, быстрое клиническое улучшение было достигнуто путем применения спазмолитических, желчегонных препараюв, а также реабилитационных физиотерапевтических процедур. Точность диагностики по предлагаемому способу подтверждена рядом дополнительных методов обследования. При дуоденальном зондировании: все три порции желчи прозрачны, без хлопьев, лейкоциты 1-2 в поле зрений, белок порция А 180 мг %, В - 210 мг %, С - 190 мг%. 1635138 С-реактивный белок отрицателен, серомукоид-0,15ед. Всего исследовано 165 больных инфекционно-воспалительными заболеваниями, у которых с точностью 94,3% была определена активность инфекционно-воспалительного процесса, что на 7,3% улучшает точность способа-прототипа. Формула изобретения 8 способа, определяют интенсивность спонтайной люминолзависимой хемилюминесценции лейкоцитов и стимулированной латексом и опсонизированными частицами, и при увеличении интенсивности стимулированной и тем и другим стимулятором хемилюминесценции не более чем в 1,5 раза относительно спонтанной диагностируют 10 цесс, при увеличении более чем в 1,5 раза период поздней реконвалесценции, а при Способ определения активности инфекувеличении интенсивности хемшюминесценции, стимулированной опсонизированционно-воспалительного процесса путем ными частицами, в 1,5 и более раза и исследования кислородозависимого метаболизма лейкоцитов крови, о т л и ч а ю щ и й - 15 отсутствии его при стимуляции латексом период ранней реконвалесценции. с я тем, что, с целью повышения точности Реда> гор А.Ревин Составитель О.Филатов Техред М.Моргентал Корректор Л.Пилипенко Заказ 754 Тираж 409 ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101