Засіб виявлення харчового алергену

Изобретение относится к медицине, а именно к способам выявления пищевых аллергенов. Целью изобретения является повышение точности. Для этого у больного утром натощак собирают слюну в количестве 3 мл, разводят ее раствором Хенкса 1:1, распределяют во флаконы по 1 мл, после чего в 1-ю пробу (контрольную) добавля ют 0,1 мл физиологического раствора, в остальные - по 0,1 мл исследуемых пищевых аллергенов: 2-я проба - аллерген коровьего молока, 3-я - желтка куриного яйца, 4-я - белка куриного яйца, 4-я - рыбы хек, 5-я - картофельного аллергена. Пробы инкубируют в термостате в течение І ч 30 мин, после чего добавляют 0,2 мл 3%-ного раствора перекиси водорода, производят замер хемилюминесценции за 10 с и вычисляют средние значения за I с. Получены следующие результаты: хемилюминесцентное свечение контрольной пробы 68750 имн/с, 2-й пробы 64300, 3-й 67958, 4-й 124322, 5-й 59996. Вы- р явлен аллерген, которым является белок куриного яйца. То есть при увеличении хемилюминесценции по сравнению с контролем на 200% и более выявпяют аллерген. Точность диагностики при использовании способа составляет 99%. ~ Изобретение относится к медицине, а именно к способам выявления пищевых аллергенов. Целью изобретения является повышение точности и специфичности способа. Способ осуществляется следующим обр аз ом. У больного производят забор секре та пищеварительного тракта (слюну, желудочный сок, дуоденальное содержимое) , разводят е г о , распределяют на отдельные пробы, добавляют пищевые аллергены и производят замер хе милюминесценции. Сопоставляя полученные показатели с контролем (пробы без аллергена), выявляют пищевой аллерген при увеличении хемилюминесценции на 200% к б о л е е . П р и м е р 1. Ребенок К, 1 г. 4 м е с , поступил в детское отделение ДБ № 1 с жалобами матери на повторную рвоту, беспокойство ребенка, жидкий частый стул. В анамнезе проявления аллергического диатеза (гнейс, молочный струп, оирелести). Контакт с инфекционными больными мать отрицает. В пищевом рационе дня 1532872 4 ребенка были включены следующие блюда: манная каша, яйцо, рыбное филе, картофельное пюре, печенье, творог. Переедание, нарушение режима дня ребенка мать отрицает. Объективно: ребенок очень беспокоен , стучит ножками, кричит. Кожные покровы бледные. Сердце, легкие - без особенностей. Живот вздут, петли тонкого кишечника урчащие, стул жидкий, желтый, с прожилками слизи. Мочеиспускание в норме. Общий анализ крови без патологии. При бактериологическим исследовании кала патологическая мик15 рофлора не обнаружена. На основании клинико-анамнестических данных, а также исключения инфекционного генеза заболевания заподозрено наличие пищевой сенсибилизации. Точность диагностики пищевой сенсибилизации по предлзгаемиму способу подтверждена другими методами исследования . При аллергическом обследовании определены: увеличение концентрации УдЕ до 420 ед/мл, повышение показателя повреждения нейтрофилов с аллергеном белка куриного яйца 18%, теста угнетения миграции лейкоцитов с аллергеном куриного яйца 60%. Проведение кожных проб, также как и исследование по способу-прототипу (постановка провокационного теста), оказались невозможными в связи со значительно выраженным обострением аллергического энтероколита. Проведение неспецифического десенсибилизирующего лечения, а также эли20 Для диагностики этиологически знаминация установленного этиологически чимого аллергена ребенку проведено значимого пищевого аллергена привели исследование согласно предлагаемому к полному выздоровлению ребенка. изобретению. С этой целью у ребенка Таким образом, точность способа в утром натощак собрана слюна в колиданном примере подтверждена целым 25 честве 3 мл. Слюну развели раствором комплексом методов аллергологического Ханкса 1.1, распределили на пробы в обследования, а также положительным специальные флаконы по 1 мл, после клиническим эффектом от проведения чего в первую пробу (контрольную) доэлиминационного теста, в то время как бавили 0,1 мл физиологического растобследование по способу-прототипу вора, в остальные (опытные) по 0,1 мл 30 оказалось практически невозможным. исследуемых пищевых аллергенов; 2-я Это подтверждает преимущество данного проба - аллерген коровьего молока, способа по сравнению с прототипом. 3-я - желтки куриного яйца, 4-ч П р и м е р 2. Ребенок Ж. Коля, белки куриного яйца, 5-я - рыбы хек, поступил в гастроэнтерологическое от6-я - картофельного аллергена. Пробы 35 деление ДБ № 1 с жалобами на периодиинкубировали в термостате в течение ческие боли в животе с преимуществен1 ч. 30 мин, после чего добавляли ной локацией в области правого подре0,2 мл 3%-ного раствора перекиси воберья. Боль обычно возникала после дорода и производили замер хемилюминесценции за 1 0 с , вычисляя средние 40 еды по типу колик, показатели за 1 с. Получены следующие В настоящее время состояние ребенрезультаты: хемилюминесцентное свечека удовлетворительное. Кожные покроние контрольной (первой) пробы вы обычной окраски, мальчик удовлет68750 имп/с, 2-й пробы 64300 имп/с, 45 ворительного питания. Тоны сердца 3-й 67958 имп/с, 4-й 124322 имп/с, звучные, ритмичные. В легких везику5-й 59966 имп/с, 6-й 69600 имп/с.Слелярное дыхание. Живот мягкий, болездовательно , перекисиая хемилюминесцен ненный при пальпации в области правоция 4-й пробы, содержащей антиген го подреберья. Стул и мочеиспускание белка куриного яйца существенно выше по сравнению с контролем, в то время 50 в норме. Общ. ан. крови: лейк. 5,5109/л, гемоглобин 120 г/л, лейкоциткак хемилюминесцентное свечение друная формула: Э-7, п-1, с-21, л-64, гих проб, содержащих пищевые аллергем-7, СОЭ-5 мм/ч. Протеинограмма: общ. ны, существенно не отличаются от конт белок 48 г/л, альбумины 62,7% глобуроля. лины 37,3, о , 7%; «^10,5; £ 14%, у б > 55 5,8%. Печеночные пробы: билирубин в I норме. При лабораторном исследовании на основании полученных данных дуоденального содержимого: все три сделано заключение о наличии пищевой порции желчи прозрачны, лейкоциты 1сенсибилизации к белку куриного яйца. 1532872 ,2 в п/эр,, содержание белка в предетверждена постановкой кожных проб, лах нормы. комплексным аллергологическим обслеДля диагностики пнщерой сенсибидованием провокационным тестом. Однализации желчь ребенка, полученную ко проведение провокационного теста при дуоденальном зондировании взято вызвало значительное обострение задля проведения хемилюминесцентного болевания , что еще раз подтверждает исследования по предложенному спосо• преимущества данного способа по срав-^ бу, Желч развели раствором Хенкса нению с прототипом. 1:10 и распределили на пробы по 1 мл. Таким образом, данный способ обДальнейшее исследование проведено со- 10 ладает целым рядом преимуществ. гласно указанной методике. Высокая точность и специфичность В результате проведенных исследодиагностики. Обследовано 79 человек ваний получены данные о значительном с пищевой сенсибилизацией. Точность повышении хемилюминесцентного свече- 15 диагностики подтверждена комплексом ния пробы, содержащей белок коровьего аллергологических методов исследовамолока (189333 имп/с) по сравнению с ния и составила 99%. Данные представконтролем (43200 имп/с), в то время лены в таблице. как хемилюминесцентное свечение проб, Высокая объективность метода. Ресодержащих другие пищевые аллергены, 20 гистрация результатов проводится с попрактически не отличалось от контромощью печатного устройства аппарата ля. На основании указанных данных для измерения хемилюминесценции и не установлен диагноз пищевой сенсибилизависит от субъективных факторов (исзации к белку коровьего молока. следуемого и исследователя). Комплексное аллергологическое об- 25 Всеобщая допустимость для больных, следование, проведенное ребенку, подотсутствие противопоказаний, побочных твердило точность способа. При постаявлений, осложнений. новке скарификационных проб с пищеШирокая информативность, поскольку вым аллергеном положительная реакция способ позволяет одновременно исслена белок коровьего молока ('і*"). Уро- 30 довать неограниченное число пищевых вень УдЕ 490 ед/мл. ППМ на белок коаллергенов, ровьего молока 27%, РБТЛ с ФГА 240, с белком коровьего молока 72%, реакФ о р м у л а и з о б р е т е н и я ция торможения миграции лейкоцитов . 58Х. Способ выявления пищевого аллерУчитывая удовлетворительное состоя- 35 гена путем проведения аллергических проб со стороны местного иммунитета ние ребенка, ему был проведен провопищеварительного тракта, о т л и кационный тест на молоко по прототипу. ч а ю щ и й с я тем, что, с целью Ответная клиническая реакция на ввеповышения точности и специфичности дение специфического пищевого аллер40 способа» проводят измерение иницируегена проявлялась однократной рвотой, мой перекисью водорода хемилюминесгенерализованными болями в животе ценции смеси стандартного пищевого спастического характера. Элиминационаллергена и секрета пищеварительного ная диета с применением неспецифичестракта в соотношении 1:10 и при уве-« ких десенсибилизирующих средств ока45 личении хемилюминесценции по сравнезала положительный результат. нию с контролем на 200% и более выявляют аллерген пищевой сенсибилизаСледовательно, в данном примере ции. точность предлагаемого способа под 1532872 Группы обследованных Число Проба без аллеробсле- гена дованных Лица с пищевой сенсибилизацией. молочной к белку куриного яйца к рыбе к белку мяса Здоровые лица р* Проба с пищевыми аллергенами Частота положительных реакций, % 34 64420+98 158961110