2-(флуорениліден-9′-гідразоно)-5-(3″-метоксі-4″-оксібензиліден)-тіазолідон-4, що виявляє антивірусну та фунгіцидну дію

ДЛЯ СЛУЖЕБНОГО ПОЛЬЗОВАНИЯ ЭКЗ № і _. О • СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИН ( 5 U 4 С 0 7 D 2 7 7 / 5 4 , А 61 К 3 1 / 4 2 5 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 407605J/28-04 (22) 09,06.86 (71) Львовский государственный медицинский институт (72) Л. И. Маслова, Б. С. Зименковский, Л. Б. Лозюк и А, Н. Миролюбова (53) 547.789.3.03(088.8) (56) Машковский М. Д. Лекарственные средства. М.; Медицина, 1986, т . 2, с . 380, 382. Павленко А. Ф., Мощицкий С. Д. Синтез физиологически активных в е ществ в ряду тиосемикарбазонов и их 0 производных. ХГС, 1967, К 2, с . 259260. Заставный И. В., Баландин И. Г., Кольцов В. Д. Влияние оксолина и флуореналя на синтез макромолекул в неинфицироваиных и инфицированных культурах клеток куриного эмбриона и на репродукцию вируса в куриных эмбрионах. - В к н . : Вирусные ингибиторы и механизм их действия. Рига, Зинат*не, 1977, с. 105-110. Авторское свидетельство СССР № 1279217, к л . С 07 В 277/54, 1985 (непубликуемое). (54) 2-(ФЛУ0РЕШШИДЕН-9'-ГИДРА30Н0)-ТИАЗСЩИДОН-4, О Л Д Ю И АНТИВИРУСБАА Щ Й Н М и фунгацидным ДЕЙСТВИЕМ Ы (57) Изобретение о т н о с и т с я к г е т е р о циклическим соединениям, в ч а с т н о с т и к 2-(флуоренилиден—9 - г и д р а з о н о ) - 5 - ( 3 - м е т о к с и - 4 — оксибензилиден)-тиа— золидону—4 ( Т З ) , обладающему а н т и в и русным и фунгицидным д е й с т в и е м . Цель изобретения - выявление новых свойств у соединений у к а з а н н о г о к л а с с а . Получение ТЗ ведут из смеси т и о с е м и к а р б а з о н а флуоренона-9, монохлоруксусиой кислоты, 3-*метокси-4—оксибензальдегида и б е з в о д н о г о к а р б о н а т а натрия в ледяной уксусной к и с л о т е кипячением (10 ч ) . Выход 42,2%, т . а и . 1бо-170°С 0 ТЗ обладает лучшей т е р а п е в т и ч е с к о й активностью и переносимостью по срав™ нению с ремантадином, что п р е д п о л а г а ет возможность е г о п р а к т и ч е с к о г о п р и менения в медицине. 3 табл* 1 372887 Изобретение относится к новым хи— препаратом, производным флуорена флореналем. мическим веществам, а именно к 2— Установлено, что соединение Т -(флуоренилиден-9' - г и д р а з о н о ) - 5 - ( 3 —метокси-А —оксибензилиден )-тиазоли— (- оказывает сильное влияние на репродук" цию вирусов гриппа A (WCN) И А (Андону—4, обладающему антивирусным и глия) 42/72 (H3N2) в системах i n v i t фунгицидным действием. r o , i n ovo, i n v i v o . Указанные свойства предполагают Соединение І в испытуемой конценвозможность применения этого соединения в качестве антивирусного и фун- 10 трации (450 мкг/мл) ингибирует i n v i t r o 10 ТЦД-50 вируса A (WSK) на гицидкого средства в медицине. 4,5 логарифма и 10 ТЦД-50 вируса А Целью изобретения является выяв (Англия) 42/72 (НЗИ2) на 3,0 логарифление нового сочетания биологической ма, а ингибирование in v i t r o соединеактивности среди производных 2~(флуоренилиден—9' -гидразоно)-5-тиазолидо— 15 ниєм І 10 ТЦЦ-50 вирусов A (WSK) и А (Англия) kill! (H3K2) значительно на-4. сильнее такового структурным аналоП р и м е р . Получение 2~(флуоре~ гом - соединением I I (см. табл. 1 ) , нилиден—9 —гидразоно)-5~( 3 — метокси*Соединение І в концентрации -4'-оксибензилиден)-тиазолидона-4 20 10 мг/эмбр ингибирует in ovo 10 (соединение I ) . ЭИД-50 вирусаА (WSK)Ha 6,8логарифма и Смесь 5,06 г (0,02 моль) тиосемикарбазона флуоренона—9, 2,06 г 10 ЭИД-50 вируса А (Англия) 42/72 (0,02 моль) монохлоруксусной кислоты, (H3N2) на 6,0 логарифма. Эталон 3,04 г (0,02 моль) 3—метокси-4—оксисравнения флореналь в концентрации бензальдегида, 2,0 г безводного к а р - 2 5 2 мг/эмбр ингибирует i n ovo 10 ЭИД-50 вируса A (WSN) на 2,0 логарифма, а на боната натрия в 100 мл ледяной у к с у с такую же дозу вируса типа А—2 не оканой кислоты кипятят в течение 10 ч . зывает влияния. Эталон сравнения ре~ Затем реакционную массу отфильтровывают, фильтрат разбавляют дистиллиро— мантадин в концентрации 2,5 мг/эмбр ванной водой. Выделившийся осадок от- 30 ингибирует соответственно такую же фильтровывают, сушат и получают 3,6 г дозу вируса A (W5N) на 3,0 логарифма (42,2%) 2-(флуоренилиден-9'-гидразои вируса типа А-2 - на 4,0 логарифма н о ) - 5 - ( 3 —метокси-4' —оксобензилиден)(см. табл. 2 ) . -тиазолидона-4, т . п л . 166-170 С (из Антивирусная активность i n vivo этанола). 35 исследована на модели гриппозной Найдено, %: С 6 7 , 6 5 ; Н 4,17,пневмонии мышей, воспроизведенной N 10,04; S 7 , 7 8 . адаптированным к легочной ткани вирусом А (Англия) 42/72 (H3N2) при инС 2 4 Н, 7 N,O 3 S траназальном введении 150 мг/кг с о Вычислено, %: С 6 7 , 4 3 ; Н 4 , 0 1 ; N 9,83; S 7,50. 40 единения I . Средняя продолжительность Максимум поглощения в УФ-спектре жизни мышей (см. табл. 3) составляла (в этаноле): изгиб 247-250 нм ( l g 14,0 дней, а процент выживаемости 4 , 7 8 ) , 255 нм ( l g £ 4 , 9 1 ) , 257 нм 100. В тех же условиях опыта ( l g £ 4 , 9 1 ) , изгиб 295-301 нм 35,0 мг/кг интраназально введенного 4 , 1 8 ) , 315 нм ( l g £ 4 , 3 6 ) , 340-345 нм 45 эталона сравнения ремантадина обеспе(lg£ 4,40). чивает среднюю продолжительность жизни мышей 12,(Н1,1 дня, л процент выживаемости - 7 0 , 0 . Испытания противовирусной актив* Установлено также, что соединение ности 2-(флуоренилиден-9 - г и д р а з о н о ) 50 І в бактериостатической дозе 12 — -5~(3'-*метокси~4' -оксибензилиден)75 мкг/мл подавляет рост Candida t r o -тиазолидона-4 (соединение I ) . p i c a l i s . Бактерицидной для этого Испытания проведены на вирусах представителя дрожжеподобного гриба гриппа штамма A (WSIJ) и штамма А кандида является концентрация 34 (Англия) 42/72 (H3N2) в сравнении с 55 150 мкг/мл. ремантадином как с эталоном, с 2— Б исследованиях по адаптации мик-"(флуоренилиден-9 -гидразоно)-тиазо— роорганизма к соединению I установпелі-здоном—4 (соединение I I ) в качестве но, что лишь после 30-го пассажа п о ближайшего структурного аналога, а является повышение БСД и БЦД бактеритакже с противовирусным лекарственным 4 1372887 ношении вируса A (WSN) и в 1>5 раза цидная, т . е . незначительная адаптация в отношении вируса А (Англия) 42/72 культуры к ингибитору. (H3N2). Соединение I обладает лучшей Определение токсичности соединетерапевтической активностью и перенония I . R симостью по сравнению с ремантадином, Определение проведено на куриных что предполагает возможность его пракэмбрионах и на культуре клеток. За тического применения в медицине. максимально переносимую дозу (МПД) принимали то количество вещества, которое не вызывало токсических прояв- 10 Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я лений. Рабочая доза составляла J/2 — Ї/10 МПД. ЛД50 определяли методом 2-(Флуоренилиден-9 -гидразоно)-5пробит—анализа на мышах массой 18 (3 -метокси-4' -оксибенэилиден)-тиазо20 г. лидон-4—формулы Острая токсичность для мышей при 15 внутрибрюшинном введении 1000 мг/кг, при интраназальном - 1500 мг/кг массы. Таким образом соединение I обладает фунгицидной и высокой антивирус- 20 ной активностью при низкой токсичноосн 5 сти. В системе in ovo активность соединения I превышает активность этало— обладающий антивирусным и фунгицидным нов сравнения более чем в 3 раза в от-25 действием. Т а б л и ц а 1 Антивирусное действие 2-(флуоренилиден—9'тидразоно)-5—(4 -окси—3 метоксибензилиден) ~тиазолидона-4 на вирус гриппа типа А и А-2 В системе in v i t r o Вещество Концентрация соединения, мкг/мл A (WSN)5 10 ТЦД-50 log Соединение I 450 Соединение II 2 Р А (Англия) 42/72(ИЗШ2 10 ТЦД-50 lOg г Р 3,0 300 П р и м е ч а н и е , Р * достоверность различия меэкду показателями средних геометрических титров сравниваемых групп. Результаты представлены разницей логарифмов средних геометрических титров. 372887 Т а б л и ц а системе m Вещестчо Концентрация соединения, мг/эмб 2 ovo A (WSN1 10 ЭИД-50 А (Ач-лич) 42/72 (H3W2) 10 ЭИД-50 log. log. 6,8 ^0,001 6,0