Живильне середовище для виявлення лецитиназної активності бактерій роду proteus

Живильне середовище для виявлення лецитиназної активності бактерій роду Proteus sp., що містить агарову основу, яке відрізняється тим, що має наступний кількісний та якісний склад: глюкоза 4,0 % пептон ферментативний 7,0 % агар мікробіологічний 3,5 % NaCl 2,5 % жовткова суміш 20,0 % pH 7,2. (19) (21) u201015789 (22) 27.12.2010 (24) 10.11.2011 (46) 10.11.2011, Бюл.№ 21, 2011 р. (72) ЮРЧЕНКО ЛЮДМИЛА АНАТОЛІЇВНА, ОСОЛОДЧЕНКО ТЕТЯНА ПАВЛІВНА, ПАРУСОВА ЯРОСЛАВА ЮРІЇВНА, ПАРУСОВ АНТОН ВОЛОДИМІРОВИЧ, ВОЛЯНСЬКИЙ АНДРІЙ ЮРІЙОВИЧ, КУЧМА ІРІНА ЮРІЇВНА, ВАЛЬЧУК СЕРГІЙ ІВАНОВИЧ, МАРТІРОСЯН ІРИНА ОЛЕКСАНДРІВНА, ЛАХМАН СЕРГІЙ МИХАЙЛОВИЧ, ПИЛЮГІН СЕРГІЙ ВАСИЛЬОВИЧ, ПЕРВОМАЙСЬКА ОЛЬГА ЕДУАРДІВНА 3 64265 ментативного, агару мікробіологічного, глюкози, жовткової суміші і NaCl. Суттєвими ознаками корисної моделі, що заявляється, необхідними та достатніми для досягнення бажаного результату, є використання наступного кількісного та якісного складу середовища: глюкоза пептон ферментативний агар мікробіологічний NaCl жовткова суміш pH 4% 7% 3,5 % 2,5 % 20 % 7,2. Вказане середовище може бути отримане наступним чином: Живильну основу автоклавують 20 хв при 1 атм. При температурі основи 45 °С додають 20 % жовткової суміші ( 1 жовток на 150 мл фізіологічного розчину) та розливають в стерильні чашки Петрі по 20 мл. Вміст агару до 35,0 г/л обумовлено тим, що при менших його значеннях протей переходить в Н-форму і проявляє здатність до роїння. Високі концентрації пептону та цукру фактично повністю пригнічують феномен роїння. Можливість здійснення корисної моделі та придатність запропанованого складу для визначення лецитиназної активності та одночасного пригнічення роїння мікроорганізмів роду Proteus ілюструють нижче наведені приклади. 4 Приклад 1. Ростові якості запропонованого середовища Для дослідження ростових властивостей середовища використовували 18 годинні культури протеєв. Суспензію готували у стерильному фізіологічному розчині (1,0 каламутності за McFarland), -6 -7 з яких робили послідовні розведення до 10 -10 мікробних клітин; по 0,1 мл суспензії засівали на чашку Петрі із запропонованим середовищем. В досліді використано стандартний штам Proteus vulgaris ATCC 4636, рекомендований для перевірки контролю якості поживних середовищ [ 5 ], а також клінічні ізоляти Proteus vulgaris та Proteus mirabilis, виділені із клінічного матеріалу від пацієнтів з гнійно-запальними процесами. Наявність -6 -7 росту при висіві 10 -10 мікробних клітин є загальноприйнятим показником задовільної ростової якості середовища. Для порівняння використовували середовище для пригнічення роїння протеїв, отримане шляхом кислотного гідролізу із еритроцитарної маси людини на якому також суттєво пригнічується процес роїння. В якості контролю на кожну чашку засівали бляшку культури S.aureus ATCC 25923. Усі досліди проводили у п'ятьох відтвореннях, результати статистично оброблено за допомогою комп'ютерної програми «Biostat», за критичний рівень значимості р приймали 0,05(табл. 1). Таблиця 1 Кількісна характеристика росту протеїв на запропонованому середовищі та середовищі, означеного в якості прототипу (контроль) Вид мікрооргані- № штаму або Мікробне навантазму ізоляту ження, КУО/мл 1 2 P. vulgaris АТСС6 P. vulgaris 19 P. vulgaris 21 P. vulgaris 27 P. vulgaris 43 P. vulgaris 56 P. vulgaris 60 P. vulgaris 70 P. vulgaris 74 P. mirabilis 16 P. mirabilis 18 3 -6 10 -7 10 -6 10 -7 10 -6 10 -7 10 -6 10 -7 10 -6 10 -7 10 -6 10 -7 10 -6 10 -7 10 -6 10 -7 10 -6 10 -7 10 -6 10 -7 10 -6 10 -7 10 Кількість колоній (М±m) Середовище із гідЗапропоноване ролізату еритроцитсередовище ної маси 4 5 68,6 ± 1,1 55,2 ± 0,7 5,8 ± 0,4 5,4 ± 0,4 72,8 ±1,4 53,8 ±1,2 7,8 ± 0,4 6,0 ± 0,3 68,2 ±1,2 56,2 ±1,2 7,6 ± 0,5 5,6 ± 0,4 72,2 ± 1,1 59,8 ±1,9 7,8 ± 0,6 5,4 ± 0,5 75,0 ±1,6 56,4 ±2,1 7,4 ±0,7 5,6 ± 0,4 75,6 ±1,9 56,8 ±1,7 7,6 ±0,4 5,8 ± 0,6 74,4 ± 2,2 55,6 ± 1,3 8,4 ± 0,6 6,0 ± 0,3 70,6 ± 2,9 53,8 ± 0,8 7,8 ± 0,8 6,6 ± 0,6 75,0 ±1,4 53,0 ± 1,3 7,2 ±0,7 6,8 ± 0,6 75,4 ± 1,5 52,8 ± 1,2 8,0 ± 0,3 6,2 ± 0,8 76,2 ± 2,3 58,0 ± 1,2 8,6 ± 0,5 7,0 ± 0,4 Р 6 р