Живильне селективно-діагностичне середовище для визначення титру бактерій роду ентерококів

Живильне селективно-діагностичне середо 3 16290 карбонату - 0,5%; натрію фосфорнокислого двозаміщеного - 0,25%; тимолового синього - 0,0032% і цитрат натрію - 6%. Випробування різних варіантів середовища з різною кількістю тимолового синього в порівнянні з прототипом. Результати наведені в наступних прикладах та в табл.2. Приклад І. Використали середовище: МПБ 1,5%; лактози - 1%; натрію хлориду - 0,5%; натрію карбонату - 0,5%; натрію фосфорнокислого двозаміщеного - 0,25%; тимолового синього - 0,0022% і цитрату натрію - 4%. Приклад II. Використали середовище: МПБ 1,5%; лактози - 1%; натрію хлориду - 0,5%; натрію карбонату - 0,5%; натрію фосфорнокислого двозаміщеного - 0,25%; тимолового синього - 0,0032% і цитрату натрію - 4%. Приклад III. Використали середовище: МПБ 1,5%; лактози - 1%; натрію хлориду - 0,5%; натрію карбонату - 0,5%; натрію фосфорнокислого двозаміщеного - 0,25%; тимолового синього - 0,0042% і цитрату натрію - 4%. Проведені дослідження вказують на те, що більш ефективні показники щодо визначення титру бактерій роду ентерококів має заявлене середовище (приклад II), яке назване нами як “живильне селективно-діагностичне середовище “СКМ" (середовище Кухтина Миколи)". Запропоноване середовище готують, додаючи до 100см3 стерильної водопровідної води МПБ 1,5г; лактози - 1г; натрію хлориду - 0,5г; натрію 4 карбонату - 0,5г; натрію фосфорнокислого двозаміщеного - 0,25г; тимолового синього - 0,0032г і цитрату натрію - 4г. Колір середовища - синій. Середовище доводять до кипіння, витримують протягом 5 хвилин (автоклавування не потрібне), розливають по 5см3 в стерильні пробірки. До 5см3 середовища додають 1см3 молока, змивів з молочного обладнання чи їх розведень, інкубують протягом 24 годин при +37°С. Зміна кольору середовища до жовтого свідчить про наявність бактерій роду ентерококів. Заявлене нами середовище має вищий рівень чутливості порівняно з прототипом внаслідок внесення в його склад комплексної системи: цитрату натрію і глюкози, які посилюють біохімічну активність бактерій роду ентерококів, а також індикатора тимолового синього як більш чутливого до зміни pH середовища. Використання середовища “СКМ" дає змогу більш ефективно оцінювати санітарний стан молочного обладнання і безпеку молока та молочних продуктів. Джерела інформації. 1. Банникова Л.А., Королева Н.С., Семенихина В.Ф. Микробиологические основы молочного производства. - М.: Агропромиздат, 1987. - 400с. 2. Королева Н.С., Семенихина В.Ф. Санитарная микробиология молока и молочных продуктов. - М.: Пищевая пром-сть, 1980. - 256с. 3. Государственная фармакопея СССР // Машковский М.Д., Бабаян Э.А., Обоймаков А.Н. и др. М.: «Медицина» 1990. - Випуск 2. - 398с. Таблиця 1 Порівняльна характеристика кількості цитрату натрію в складі середовища Показники, що порівнюються 1 Лужнополіміксинове середовище 2 МПБ - 230см3; дріжджового екстракту - 20г; глюкози 10г; натрію хлориду - 0,5г; натрію карбонату - 0,53г; Склад діагнатрію фосфорноностичного кислого двозамісередовища щеного - 2,5г; дистильовану воду 250см3; індикатор бромтимоловий синій 1,6% розчин - 1см3. Мета. з якою Для визначення використову- титру бактерій ється тест роду ентерококів Колір сереСиньо-зелений довища Кількість 5см3 середовища Спосіб викоВ пробірках ристання Приклади І II III 3 4 5 МПБ - 1,5%, лактоза 1%, натрію хлориду 0,5%, натрію карбонату - 0.5%, натрію фосфорнокислого двозаміщеного - 0,25%, індикатор: тимоловий синій - 0,0032%, цитрат натрію - 2%. МПБ - 1,5%. лактоза 1%. натрію хлориду 0,5%, натрію карбонату - 0,5%, натрію фосфорнокислого двозаміщеного - 0,25%, індикатор: тимоловий синій - 0,0032%, цитрат натрію - 4%. МПБ - 1,5%, лактоза 1%, натрію хлориду 0,5%. натрію карбонату - 0,5%, натрію фосфорнокислого двозаміщеного – 0,25%, індикатор: тимоловий синій – 0,0032%, цитрат натрію - 6%. Для визначення титру бактерій роду ентерококів Дія визначення титру бактерій роду ентерококів Для визначення титру бактерій роду ентерококів Синій Синій Синій 5см3 5см3 5см3 В пробірках В пробірках В пробірках 5 16290 6 Продовження таблиці 1 Показники, Лужнощо порівню- поліміксинове сеються редовище 1 2 Кількість досліджува1см3 ного матеріалу Температура При 37°С інкубації Тривалість Протягом 24 годиінкубації ни Оцінка результатів досліджень: - позитивний результат 53,9% (середовище забарвлюється в жовтий колір) - негативний результат (колір сере46,1% довища не змінюється) Наявність Ріст тільки бактеросту бактерій роду ентерокорій роду енків терококів Кількість досліджених 126 проб Приклади І II III 3 4 5 1см3 1см3 1см3 При 37°С При 37°С При 37°С Протягом 24 години Протягом 24 години Протягом 24 години 72,2% 88,9% 88,9% 27,8% 11,1% 11,1% Ріст тільки бактерій роду ентерококів Ріст тільки бактерій роду ентерококів Ріст тільки бактерій роду ентерококів 126 126 126 Таблиця 2 Порівняльна характеристика кількості індикатора в складі середовища Показники, що порівнюються 1 Склад діагностичного середовища Мета, з якою використовується тест Лужнополіміксинове середовище 2 МПБ - 230см3; дріжджового екстракту - 20г; глюкози - 10г; натрію хлориду 0,5г; натрію карбонату - 0,53г; натрію фосфорнокислого двозаміщеного 2,5г; дистильовану воду - 250см3; індикатор бром тимоловий синій 1,6% розчин - 1 см3. Дія визначення титру бактерій роду ентерококів Приклади І II ІІІ 3 4 5 МПБ - 1,5%, лактоза - 1%, натрію хлориду - 0,5%, натрію карбонату 0,5%, натрію фосфорнокислого двозаміщеного 0,25%, індикатор: тимоловий синій 0,0022%, цитрат натрію - 4%. МПБ - 1,5%. лактоза 1%, натрію хлориду 0,5%, натрію карбонату - 0,5%, натрію фосфорнокислого двозаміщеного - 0,25%, індикатор: тимоловий синій - 0,0032%, цитрат натрію - 4%. МПБ - 1,5%, лактоза 1%, натрію хлориду 0,5%. натрію карбонату - 0,5%, натрію фосфорнокислого двозаміщеного 0,25%, індикатор: тимоловий синій 0,0042%, цитрат натрію - 4%. Для визначення титру бактерій роду ентерококів Для визначення тигру бактерій роду ентерококів Для визначення титру бактерій роду ентерококів 7 16290 8 Продовження таблиці 2 Показники, що порівнюються 1 Колір середовища Кількість середовища Спосіб використання. Кількість досліджуваного матеріалу Температура інкубації Тривалість інкубації Лужнополіміксинове середовище 2 Синьо-зелений І II ІІІ 3 Синій 4 Синій 5 Синій 5см3 5см3 5см3 5см3 В пробірках В пробірках В пробірках В пробірках 1см3 1см3 1см3 1см3 При 37°С При 37°С При 37°С При 37°С Протягом 24 години Протягом 24 години Протягом 24 години Протягом 24 години 72,2% 88,9% 88,9% 27,8% 11,1% 11,1% Ріст тільки бактерій роду ентерококів Ріст тільки бактерій роду ентерококів Ріст тільки бактерій роду ентерококів 126 126 126 Оцінка результатів досліджень: - позитивний результат 53,9% (середовище забарвлюється в жовтий колір) негативний результат (колір середо46,1% вища не змінюється) Наявність росту Ріст тільки бактерій бактерій роду ентероду ентерококів рококів Кількість дослідже126 них проб Комп’ютерна верстка А. Крулевський Приклади Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601