Спосіб отримання речовини з протипухлинною активністю 1,1′-/2″-бром-2″-хлоретеніл/-біс-/5-фторурацид/

Спосіб отримання речовини з протипухлинною активністю 1,1'-(2"-бром-2"- хлоретеніл)-біс-(5фторурацил) Корисна модель відноситься до хімії гетероциклічних сполук, а саме, до 1,1'-(2"-бром-2"хлоретеніл)-біс-(-5-фторурацил)-у (далі, сполука), яка може бути використана у якості субстанції для виготовлення протипухлинного лікарського засобу, та способу його отримання. Сполука має виражену протипухлинну активність, яка досліджена на моделях експериментального пухлинного зросту різного гістогенезу: Лімфосаркомі Пліса, Карциномі Герена, Саркомі 45. Вказана властивість дозволяє передбачити можливість використання синтезованої сполуки в практичній медицині, а саме, в онкології. Структурні аналоги (біциклічні адукти), які мають протипухлинну активність, не відомі (літературний опис відсутній). Однак, структурними компонентами молекули біциклічного адукту- сполуки є дві молекули 5фторурацилу та фрагмент молекули фторотану (2бром-1,1,1-трифтор-2-хлоретан), які застосовуються у якості лікарських засобів при лікуванні онкологічних захворювань. Відкриття 5-фторурацилу - це рідкісний приклад створення лікарського засобу на основі теоретичних розробок. Після синтезу похідних урацилу, а особливо, 5-фторурацилу та фторафуру, які продемонстру що включає взаємодію 5-фторурацилу з фторотаном (молярне співвідношення 2:1,5) в системі розчинників (бензол-диметилформамід) в умовах міжфазного каталізу дибензо-18-краун-6-ефіром в присутності гідроксиду калію. вали високу протипухлинну активність, значно зросла кількість досліджень з цього напрямку. Починаючи з 1981 року в світі щорічно публікують біля 100 наукових робіт та патентів, які стосуються методів синтезу, вивчення будови й хімічних властивостей урацилу та його похідних. За останні роки кількість публікацій на дану тему зросла до 130-150 на рік. Серед них біля половини присвячена 5-фторурацилу та сполукам, які створені на його основі. Стало відомо, що пухлини використовують молекули урацилу активніше, ніж нормальні клітини. Оскільки ван-дер-ваальсові радіуси водню та фтору близькі, можна очікувати, що 5-фторурацил (або його похідне) буде виконувати роль субстрату та/або інгібітору ферментів і буде переважно поглинатися тканинами пухлини. З іншого боку, молекули 5-фторурацилу та його похідних, інших галогеновмісних гетероциклів, здатні виконувати роль фтор(галоген)вмісних синтонів в органічному синтезі з метою створення оригінальних біологічно-активних молекул. Введення фтор(галоген)вмісних фармакофорів в гетероциклічну молекулу призводить до підвищення розчинності сполук в ліпідах та робить лікарські засоби ефективнішими у зв'язку із легкістю їх транспорту в організмі [1, 2]. CO О) 00 CD О) 6893 В основу винаходу поставлено розробку способу отримання 1,1'-(2"-бром-2"-хлоретеніл)-біс-(5фторурацил)-у, який має протипухлинну активність, шляхом взаємодії відомого протипухлинного препарату 5-фторурацилу з фторотаном у молярному співвідношенні 2:1,5. Реакції проводилися у системі розчинників (бензол-диметилформамід) в умовах міжфазного каталізу дибензо-18-краун-б-ефіром в лужному середовищі з метою забезпечення отримання 1,1'(2"-бром-2"-хлоретеніл)-біс-(5-фторурацил)-у, який має протипухлинну активність. Спосіб отримання був розроблений під час виконання дисертаційної роботи [3, 4]. 1,1 '-(2"-бром-2"-хлоретеніл)-біс-(5фторурацил) отримують взаємодією 5-фторурацилу з фторотаном (молярне співвідношення 2:1,5). Реакція проводиться в системі розчинників (бензол - диметилформамід) в умовах міжфазного каталізу дибензо-18-краун-6-ефіром в присутності гідроксиду калію. Практичний вихід 50%. Ознаки способу. Методика синтезу 1,1'-(2"-бром-2"хлоретеніл)-біс-(5-фторурацил)-у. Приготування розчину №1. 2г гідроксиду калію (О.ОЗбмоль), 0,2г дибензо18-краун-6-ефіру. 60мл сухого бензолу перемішують при температурі 60°С біля 15 хвилин до утворення на стінках хімічного реактора білого полімерного нальоту, тобто утворення калієвого комплексу з дибензо-18-краун-6-ефіром. Отриманий розчин охолоджують до кімнатної температури, додають до нього краплями розчин 2,96г (0,015моль) фторотану в 20мл діетилового ефіру. Приготування розчину №2. 2,6г (0,02моль) 5-фторурацилу розчиняють в 70мл диметилформаміду при температурі 60°С в окремому хімічному посуді. Отриманий розчин №2 охолоджують до 30°С. Розчин №2 додають краплями через ділильну лійку до розчину №1, перемішують при температурі 80-90°С 14 годин, фільтрують у гарячому стані, відганяють простою перегонкою розчинники. Залишок обробляють безводними гексаном, бензолом. Отриманий осад фільтрують, промивають безводними метанолом, діетиловим ефіром. Сушать у вакуумі водострумного насосу. Практичний вихід 2,98г (50%). Т.пл. 238-240°С. Індивідуальність синтезованої сполуки контролювали методом тонкошарової хроматографії, склад підтверджували даними елементного аналізу. Спектр ПМР синтезованої сполуки І записували на приладах "Bruker WP-200" (виробник "Bruker", Switzerland), "Varian T-60" (виробник "Varian", USA) з робочою частотою 200-132МГц у виді розчинів ДМСО-De та CFBre (внутрішні стандарти ТМС та ГМДС). ІЧ-спектр записували на спектрофотометрі UR-20 (виробник "Charles Ceise Hena", Germany). ТШХ виконували на пластинах Silufol-254. ГРХ визначали на газорідинному хроматографі "Perkin Е1тег"з УФ-детектором (виробник "Perkin", Germany). Хроматограма, ІЧ-, ПМР-спектри кінцевого продукту ідентифікували у порівнянні з хроматограмами, ІЧ-, ПМР-спектрами вихідних сполук. Синтезована сполука - це кристалічний порошок блідо-жовтого забарвлення, нестійкий до дії гарячого органічного розчинника; при перекристалізації він розпадаються до вихідного урацилу. Дані елементного аналізу на С, Н, N синтезованої сполуки відповідають розрахованим значенням. ІЧ-спектр синтезованої сполуки характеризуються інтенсивними сигналами карбонільних груп С=О гетероциклічних фрагментів молекули при 1710, 1750, 1752см"1. В ІЧ-спектрі синтезованої сполуки ідентифіковано сигнали галогенів (F, Вг, СІ) при 550, 615,695см'1. Співвідношення інтегральних інтенсивностей сигналів в ПМР-спектрі синтезованої сполуки підтверджує відсутність протонів у атомів N(l) молекули урацилу при 11.00-11.25м.д. (малюнок 1). Фізико-хімічні характеристики та дані елементного аналізу синтезованої сполуки наведено в таблиці 1. Таблиця 1 Фізико-хімічні характеристики та дані елементного аналізу сполуки 1. 1 Обчислено, ІЧ-спектр (КВг), см" 7 С-НаІ, Спектр ПМР (ДМСО-De), 5 , м . у С=О у%, С Н N fl.(J, Гц) 510,550,690 (С-СІ, 4.532(2Н, 30,21 1,13 уш.с.,2 N(3) H), 7.447 30,08 1,15 13,78 CioHUN^BrFaCI C-Br);1150, 1210(C-F); 14,09 (2Н,д.,2С(6)-Н) 1735, 1750(С=О) Знайдено, у% С HN Бруттоформула Завданням корисної моделі є синтез нових хімічних сполук, які мають підвищену протипухлинну активність під час лікування Лімфосаркоми Пліса, Карциноми Герена, Саркоми 45. Вивчення фізіологічної активності біциклічного адукту - синтезованої сполуки проводилося згідно із літературними вказівками у відділі онкофармакології Інституту фармакології та токсикології АМН України [5, 6]. 6893 Протипухлинна активність вивчена на перевивних моделях експериментального пухлинного росту різного гістогенезу : Саркома 45, Лімфосаркома Пліса, Карцинома Герена. Література: 1. Соединения фтора. Синтез и применение./ Под ред. Н. Исикава. - М.: Мир, 1990. - Гл.5. С. 183-265. 2. Ягупольский Л.М.// Ароматические и гетероциклические соединения с фторсодержащими заместителями. - Киев: Наукова думка, 1988. С.90-105. 3. Вельчинская Е.В., Радченко О.А., Ильченко А.Я. Полифторзамещенные алкины и алкадиино вые кислоты. III. Замещенные пропаргиловые эфиры и их реакции.// ЖОрХ. - 1992. - Т.28. Вып.6.-С.1120-1125. 4. Вельчинська О.В. Поліфторозаміщені кисневмісні моно- та діацетиле-нові сполуки. // Автореферат дис. ... канд. хім. наук. - К., 1992. - 16с. 5. Прозоровский В.Б., Прозоровський В.П., Демченко В.М. Експрес метод визначення середньої ефективності дози та її помилки. // Фармакол. та токсикол. -1978. - ВИП.4. - С.497. 6. Експериментальна оцінка протипухлинних препаратів в СРСР та СПІА. М.: Медицина, 1979. 286с. Спосіб оіримання речовини з протипухлинною активністю 1, Г - (2"~бром-2"- хлоретеніл)-біс-(5-фторурацид). »| й •tr < І 'З Si МалЛ Комп'ютерна верстка В. Мацело Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул. Глазунова, 1, м. Київ-42, 01601