Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Спосіб виявлення тучних клітин шляхом виготовлення гістологічного препарату, проведення лектингістохімічної реакції, висновок препарату та світлової мікроскопії, який відрізняється тим, що лектингістохімічну реакцію проводять з N-ацетил-D-глюкозамінспецифічним лектином зародків пшениці (WGA).

Текст

Реферат: Спосіб виявлення тучних клітин шляхом виготовлення гістологічного препарату, проведення лектингістохімічної реакції, висновок препарату та світлової мікроскопії. Лектингістохімічну реакцію проводять з N-ацетил-D-глюкозамінспецифічним лектином зародків пшениці (WGA). UA 70754 U (12) UA 70754 U UA 70754 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, а саме анатомії, гістології, і може бути використана з метою вивчення морфології тучних клітин в органах і тканинах. Існує декілька способів виявлення тучних клітин на гістологічних препаратах з використанням панелі лектинів: α-D-манозоспецифічні лектини (лектин сочевиці (LCA), лектин гороху (PSA), лектин канавалії мечовидної (СоnА)), β-D-галактозоспецифічні лектини (лектин арахісу підземного (PNA), N-ацетил-β-галактозамінспецифічні лектини (лектин сої культурної (SBA)) [Луцик А.Д. Лектины в гистохимии / А.Д. Луцик, Е.С. Детюк, М.Д. Луцик. - Львов: Вища школа, 1989.-140 с.], але ці способи не дають повної інформації про наявність інших видів вуглеводних залишків в тучних клітинах, що викликало необхідність у розробці нових способів. Найбільш близьким за технічною суттю та результатом, що досягається, є способи які полягають у виявленні тучних клітин на гістологічних препаратах лектингістохімічним методом за наявності рецепторів до α-D-манозоспецифічного лектину канавалії мечовидної (СоnА), оскільки він взаємодіє з залишками D-манози, D-глюкози та N-ацетил-D-глюкозаміном. Виготовляють гістологічні препарати. Лектингістохімічне визначення рецепторів до канавалії мечовидної (СоnА), відбувається з використанням прямої реакції з кон'югатом лектину канавалії мечовидної (СоnА), та пероксидази хріну. Рецептори до лектину канавалії мечовидної (СоnА) виявляють по відкладенню часточок бензидину в цитоплазмі тучних клітин. Спільними суттєвими ознаками прототипу і корисної моделі, що заявляється, є такі: - виготовлення гістологічного препарату; - проведення гістохімічної реакції з лектином; - заключения препарату; - світлова мікроскопія. Цей спосіб є ефективним, але не достатньо інформативним, оскільки не дає повної інформації про наявність інших вуглеводних залишків в структурі тучних клітин. В основу корисної моделі поставлено задачу розширення способів виявлення тучних клітин та детальнішого вивчення їх морфології на гістологічних препаратах шляхом проведення лектингістохімічної реакції з N-ацетил-D-глюкозамінспецифічним лектином зародків пшениці (WGA), що має найвищу афінність до вуглеводних залишків N-ацетил-D-глюкозаміну і дозволить розширити способи виявлення тучних клітин та більш детальніше вивчити їх морфологію, а також визначати ступінь їх дегрануляції. Поставлена задача вирішується тим, що у способі, який включає виготовлення гістологічного препарату, проведення лектингістохімічної реакції, висновок препарату, світлову мікроскопію, новим є те, що гістохімічну реакцію проводять з N-ацетил-Dглюкозамінспецифічним лектином зародків пшениці (WGA). Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю ознак, що заявляються, та технічним результатом полягає у такому. Проведення лектингістохімічної реакції з N-ацетил-D-глюкозамінспецифічним лектином зародків пшениці (WGA) дозволить розширити способи виявлення тучних клітин на гістологічних препаратах, наприклад в форс-мажорних випадках, коли вищезгадані лектини відсутні; а також більш детально вивчити морфологію та визначати ступінь дегрануляції тучних клітин, а також оцінити розподіл речовин, які афінні до лектину зародків пшениці (WGA). Запропонований метод дозволить високоспецифічно диференціювати тучні клітини в тканинах, давати оцінку їх біохімічному складу та біосинтетичним процесам, що відбуваються в них, визначати їх кількість на умовній одиниці площі, наявність та рівень біосинтезу речовин, що афінні до лектину зародків пшениці (WGA) та робити висновки про морфо-функціональний стан тканини та органу в цілому. Таким чином, сукупність описаних позитивних факторів дозволить підвищити якість оцінки морфо-функціонального стану тучних клітин та органу в цілому. Позитивний момент полягає у можливості застосування N-ацетил-D-глюкозамінспецифічного лектину зародків пшениці (WGA) в тих випадках, коли інші лектини, афінні до тучних клітин, відсутні. Зміни ступеня спорідненості лектину зародків пшениці (WGA) до тучних клітин, що обчислюються напівкількісно, дають підстави робити висновки про зміни біосинтетичних процесів у клітинах, ступінь їх дегрануляції, та можливі зміни фізико-хімічних властивостей тканини та органу в цілому. Спосіб здійснюють таким чином. Для гістохімічного дослідження тканину фіксують в рідині Буена. Шматочки зневоднюють у висхідній батареї спиртів та хлороформів згідно із загальноприйнятою методикою та заливають у парафін. Виготовляють гістологічні зрізи товщиною 3-5 мкм. Гістохімічне виявлення рецепторів до лектину зародків пшениці (WGA) проводять з використанням прямої реакції з кон'югатом лектину та пероксидазою хріну. Рецептори до лектину зародків пшениці (WGA) виявляють по відкладенню бензидинової мітки в цитоплазмі тучних клітин. Морфологічний кількісний аналіз 1 UA 70754 U + 5 10 WGA тучних клітин проводять на оглядовій мікроскопії при малих збільшеннях, а + морфофункціональний стан WGA тучних клітин - при імерсійному збільшенні мікроскопу. Приклад. Після фіксації тканини в рідині Буена, зневоднення у висхідній батареї спиртів та хлороформів, заливки у парафін та виготовлення гістологічних зрізів товщиною 3-5 мкм проводять пряму гістохімічну реакцію з кон'югатом лектину і пероксидазою хріну. Рецептори до лектину зародків пшениці (WGA) виявляють по відкладенню бензидинової мітки в цитоплазмі + тучних клітин при імерсійному збільшенні мікроскопу. WGA тучні клітини неправильної овальносферичної форми розміром 20-35 мкм, цитоплазма має рясні коричневі гранулярні включення, що високоафінні до лектину зародків пшениці (WGA). ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 15 Спосіб виявлення тучних клітин шляхом виготовлення гістологічного препарату, проведення лектингістохімічної реакції, висновок препарату та світлової мікроскопії, який відрізняється тим, що лектингістохімічну реакцію проводять з N-ацетил-D-глюкозамінспецифічним лектином зародків пшениці (WGA). Комп’ютерна верстка Л. Купенко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Method for determination of mast cells

Автори англійською

Voloshyn Mykola Anatoliiovych, Fedotchenko Andrii Viktorovych

Назва патенту російською

Способ выявления тучных клеток

Автори російською

Волошин Николай Анатолиевич, Федотченко Андрей Викторович

МПК / Мітки

МПК: G01N 21/00

Мітки: виявлення, спосіб, тучних, клітин

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/4-70754-sposib-viyavlennya-tuchnikh-klitin.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб виявлення тучних клітин</a>

Подібні патенти