Спосiб профiлактики шлунково-кишкових захворювань молодняка сiльськогосподарських тварин

Изобретение относится к ветери Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для профилактики желудочно-кишечного тракта вирусной и микробной этиологии новорожденных животных, например телят. Целью изобретения является повышение эффективности профилактики заболеваний. Используемый штамм Bacillus subtilis 17 депонирован во Всесоюзной коллекции микроорганизмов института "ВНИИ генетика" и имеет коллекционный номер ВКМП В-4828, Штамм Bacillus subtilis ВКМП В4828 характеризуется следующими свойствами: Культурально-морфологические признаки. Клетки имеют палочковидную форму (0,7-0,8)*(2,0-3,0) мкм, одиночные, подвижные, по Граму окрашиваются положительно. Образуют эндоспоры эллипсовидной формы, располагающиеся на конце клетки. Клетку не раздувают. ; нарии и может быть использовано для повышения естественной резистентности организма животного, Целью изобретения является повышение эффективности профилактики заболеваний. Для этого в известный препарат токшлакт дополнительно вносят штамм B.subtilis ВКМЛ В-4828 в количестве 0,5-20 млн. кл./мл. Полученный препарат вводят перорально до приема молозива в первые 30 мин жизни в дозе 40-50 мл. Сохранность телят после приема препарата составляет 90-97%. 1 табл. На МПА растет в виде матовых, иногда морщинистых колоний. При посеве в МПБ - бульон сначала мутнеет, затем образуется пленка, а среда просветляется. Микроб непатогенный. При выращивании на 1%-ном глюкозном агаре глобул внутри клетки не образуется, реакция каталазы положительна, вырабатывает ацетон (реакция Фогес-Проскауэра положительная), разлагает маннит и глюкозу и не сбраживает лактозу и дульцит, нитраты восстанавлив аются в нитриты. П р и м е р 1. Для приготовления препарата Бовитокс отдельно получают следующие компоненты, Стимулятор иммунитета у животных. Из сухой или жидкой сибиреязвенной вакцины СТИ делают высев сплошным газоном на мясопептонный агар. Смыв выросших колоний производят физиологическим раствором или жидкой питательной средой для культуры ткани (гемогидролизат, среда 199, 0,5% З 1596525 нын раствор гидролизата лактальбумина и д р . ) . Готовят суспензию сибиреязвенных микробов, содержащую в 1 мл 1 млрд. микробных тел по оптическому стандарту. Суспензию засевают из расчета 50-100 млн. микробных клеток на 1 мл среды следующего состава: гемогидролизат 5%-ный для культуры ткани 1000 мл; сыворотка крови круп10 ного рогатого скота 100 мл; обезжиренное молоко 100 мл; глюкоза 10 г, рН 7,4-7,6. Вместо гемогидролизата можно использовать среду 199, гидролизат лактальбумина и другие пита15 тельные среды, применяемые в вирусологии (можно с просроченным сроком годности)» Вместо сыворотки крови крупного рогатого скота можно также использовать сыворотку крови других 20 теплокровных животных. Посевы инкубируют при 37 С в течение 27-36 ч, затем фильтруют через стерилизующие, бактериальные свечи. Фильтрат проверяют на стерильность и определяют титр экзотоксина по реакции диск-преципитации. Для изготовления препарата Бовитокс пригоден фильтрат с титром экзотоксина не ниже 1:32, что обеспечивает наибольший процент сохранности новорожденных телят, 25 30 Молочную закваску штамма Lactobacillus acidophilus 1 к получают путем выращивания культуры на обез- 35 жиренном молоке. Для этого к определенному количеству обезжиренного молока, например 1000 мл, добавляют 5,0% (50 мл) маточной молочной зак40 васки, в которой содержится 300400 млн,/мл микробных клеток. Выращивают в термостате в течение 2848 ч, пока кислотность культуральной среды не достигнет 150-250° Тернера 45 (Т), При такой кислотности в 1 мл содержится 100-400 млн./мл микробных клеток. Кисломолочную закваску из штамма Streptococcus lactis L-4 готовят 50 на обезжиренном молоке. Например, в 1000 мл молока добавляют 5,0% (50 мл) маточной молочной закваски, в которой содержится 300-400 млн./мл микробных клеток . Посев инкубируют при 28°С в течение 24-48 ч, пока «кис- 55 лотность культуральной жидкости не достигнет 100-120°Т и более. При та- • кой кислотности в 1 мл культуральной жидкости содержится 100—150 млн./мл < микробных тел. Молочную закваску из штамма Escherichia coli M-17 также готовят на обезжиренном молоке. Например, к 1000 мл обезжиренного молока добавляют 5% (50 мл) маточной молочной закваски, в которой содержится 100200 млн./мл микробных клеток. Выращивают при 37°С в течение 28-48 ч, пока кислотность культуральной жидкости не достигнет 100-130°Т. При такой кислотности в 1 мл содержится не менее 30-50 млн./мл микробных клеток. Культуру B.subtilis ВКМП Б-4828 выращивают на среде 199 (можно с истекшим сроком годности), гемогидроли-' зате, лактальбумине или др. Например, в колбу с 1500 мл среды добавляют 1% глюкозы, бактериологической петлей засевают выращенную на МЛА непатогенную культуру B.subtilis ВКМП В-4828 и вносят стерильный кусочек . металла (20-30 мм обыкновенного гвоздя) , запаянного в полиэтиленовую труб трубку. Колбу с посевом ставят на магнитную мешалку, помещенную в термостат. Выращивают при 37°С в течение 18 ч. Для перемешивания культуральной жидкости магнитная мешалка включается автоматически через каждый час на 10 мин при помощи автоматического • • устройства 2 РВМ или ему подобного. Через 18 ч инкубации культуру микроскопируют и, убедившись в чистоте и типичности роста, используют по назначению. В 18-часовой культуре содержится 10-40 млн./мл вегетативных клеток. Препарат Бовитокс готовят следующим образом: в стерильную бутыль вносят две части стимулятора иммунитета у животных с титром сибиреязвенного антигена 1:32, 1:64 по реакции дискпреципитации, две части кисломолочной закваски L.acidophilus с общей кислотностью не ниже 150-250*Т, две части кисломолочной закваски S,lactis L-4 с общей кислотностью 100-120°Т. Две части кисломолочной закваски E.coli М-17 с общей кислотностью не ниже Ю0-120°С, одну часть 18-часовой жидкой культуры B.subtilis ВКМП В4828, хорошо смешивают, фасуют по 500 мл и используют по назначению. П р и м е р 2. Полученный препарат применяют в хозяйствах, неблаго 1596525 роэнтеритом в легкой форме. Такие получных по диареям новорожденных животные по сравнению с необработантелят вирусной и бактериальной этиоными поддаются лечению. логии, сопровождающимся изнурительным Через 24 ч после обработки телят поносом и падежом. Бовитоксом титр интерферона сыворотки Для защиты новорожденных телят крови составляет 64-128 ед/мл (обратот заболевания в течение последующих ная величина), у контрольных телят 10 дней жизни (период массового забо0-2 ед/мл. левания и гибели новорожденных телят) им вводят до приема молозива в перВысокая эффективность защиты ново10 вые 30 мин жизни перорально 40,0рожденных телят от заболевания в не50,0 мл препарата. Данная доза осноблагополучных по диареям хозяйствах вана на результатах опытов (таблица) позволяет сохранить ^0,0-97,0% прии наблюдений за новорожденными теляплода. тами непосредственно в хозяйствах 15 в течение трех лет. Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я Результаты испытаний различных Способ профилактики желудочнодоз препарата Бовитокс на кишечных заболеваний молодняка сельноворожденных телятах 20 скокозяйственных животных, преимуще1 ственно телят, включающий пероральДоза, мл Обрабо- Защищено Процент ное введение в первые часы жизни тано от забо- сохранносзакваски из смеси культур штаммов телят левания ти к объему Lactobacillus acidophilus 1k, Esche25 richia coli M-17, Streptococcus lac100 100 6 6 tis L-4 и фильтрата культуральной 70 5 . 5 100 жидкости штамма Bacillus antracis 50 10 10 100 СТИ-1 с титром 1:16- 1:32, о т л и 100 40 14 14 ч а ю щ и й с я тем, что, с целью 30 6 86 7 20 30 повышения эффективности профилактики 80 Ъ: 10 заболеваний, в,смесь дополнительно 6 67 4 вносят штамм Bacillus subtilis ВКМП 60 Контроль 5 г В-4828, при этом концентрацию микроорганизмов устанавлнвают соответстУменьшение дозы снижает эффективность препарата, а увеличение приво- 35 венно равной 20-108, 5-20, 20-108 и 0,5-20 млн.кл./мл, а полученную дит к нерациональным расходам. смесь вводят в дозе 40-50 мл на одно Отдельные телята, обработанные животное. Бовитоксом, могут переболевать гаст Редактор Л.Павлова Составитель В.Романова Техред М.Дидык Корректор М.Шароши Заказ 3189/ДСП Тираж 414 Подписное ВНИИГШ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101