Спосіб моделювання подагричного артриту

Реферат: Спосіб моделювання подагричного артриту, який включає вигодовування тварин дріжджовим аутолізатом з молібденом та інозином, уведення щурам повного ад'юванту Фрейнда з дезоксирибонуклеїновою кислотою й бичачим сироватковим альбуміном, проведення електростимуляції організму, крім того додатково в подушку задньої лапи вводять суспензію кристалів сечової кислоти і підключають негативний електрод від електростимулятора в місце введення кристалів сечової кислоти. UA 75339 U (54) СПОСІБ МОДЕЛЮВАННЯ ПОДАГРИЧНОГО АРТРИТУ UA 75339 U UA 75339 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Спосіб належить до медицини, а саме до патологічної фізіології і ревматології, може бути використаний для моделювання на щурах подагричного артриту. Відомий спосіб моделювання подагри, взятий як прототип [1]. Цей спосіб здійснюється наступним чином. Тваринам (самчукам білих безпородних щурів) у корінь хвоста в 2 точки уводять повний ад'ювант Фрейнда (ПАФ), змішаний з розчином селезінкової дезоксирибонуклеїнової кислоти великої рогатої худоби (1 мг на 100 г маси) в обсязі 0,3 мл із дотримуванням правил антисептики й асептики. Потім тварин наркотизують внутрішньочеревним уведенням тіопенталу (50 мг/кг) та фіксують на операційному столі. Шкіру хвоста у його основі і в зоні спини тричі обробляють спиртовим розчином йоду. По середній лінії розсікають шкіру хвоста скальпелем та виділяють на лігатурі хвостову вену, в яку уводять стерильний електрод (№ 1). Електрод № 1 фіксують лігатурою, шкіру ушивають й обробляють спиртовим розчином йоду. Інший електрод (№ 2) уводять під шкіру спини і також фіксують. Електрод № 2 підключають до негативної клеми електростимулятора ЕС-50-01, а електрод № 1 - до позитивної. На електростимуляторі установлюють наступні параметри подразнення: період імпульсу 0,1 мс (що відповідає частоті 10000 Гц) тривалість 50 мкс, амплітуда 0 мА. В подушку задньої лапи уводять 100 мкг бичачого сироваткового альбуміну (БСА), вмикають електростимулятор і, поступово, провертаючи ручку "Сила струму", встановлюють амплітуду стимуляції, що дорівнює підпороговому значенню, яке викликає посмикування лапи. По закінченні електростимуляції електроди витягують. У подальшому тварин дотримують на дієті, у котрій білок заміщують з дріжджовим аутолізатом. Аутолізат отримують із дріжджів витримуванням їх протягом 2 діб при 60 °C, наступною стерилізацією при 1,0-1,3 атм, 120130 °C протягом 30 хвилин) з додатком 0,3 мг молібдату амонія і 100 мг інозину на одного щура за добу. При цьому за два тижні артрит розвивається лише у 10-15 % тварин. За основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення способу моделювання і підвищення частоти розвитку артриту. Запропонований спосіб здійснюється наступним чином. Тваринам (самчукам білих безпородних щурів) у корінь хвоста в 2 точки уводять повний ад'ювант Фрейнда (ПАФ), змішаний з розчином селезінкової дезоксирибонуклеїнової кислоти великої рогатої худоби (1 мг на 100 г маси) в обсязі 0,3 мл із дотримуванням правил антисептики й асептики. Потім тварин наркотизують внутрішньочеревним уведенням тіопенталу (50 мг/кг) та фіксують на операційному столі. Шкіру хвоста у його основі і в зоні гомілковостопного суглоба тричі обробляють спиртовим розчином йоду, після чого уводять 1 % розчин новокаїну. В подушку задньої лапи вводять 0,1 мл суспензії кристалів сечової кислоти (уратів), що отримані за методикою [2]. По середній лінії розсікають шкіру хвоста скальпелем та виділяють на лігатурі хвостову вену, в яку уводять стерильний електрод (№ 1). Електрод № 1 фіксують лігатурою, шкіру ушивають й обробляють спиртовим розчином йоду. Інший електрод (електрод № 2) уводять в подушку задньої лапи і також фіксують. Електрод № 2 підключають до негативної клеми електростимулятора ЕС-50-01, а електрод № 1 - до позитивної. На електростимуляторі установлюють наступні параметри подразнення: період імпульсу 0,1 мс (що відповідає частоті 10000 Гц) тривалість 50 мкс, амплітуда 0 мА. В подушку задньої лапи уводять 100 мкг бичачого сироваткового альбуміну (БСА), вмикають електростимулятор і поступово, повертаючи ручку "Сила струму", встановлюють амплітуду стимуляції, що дорівнює підпороговому значенню, яке викликає посмикування лапи. По закінченні електростимуляції електроди витягують. У подальшому тварин дотримують на дієті, у котрій білок заміщують з дріжджовим аутолізатом. Аутолізат отримують із дріжджів витримуванням їх протягом 2 діб при 60 °C, наступною стерилізацією при 1,0-1,3 атм, 120-130 °C протягом 30 хвилин) з додатком 0,3 мг молібдату амонію (стимулятор ксантиноксидази) і 100 мг інозину (попередник сечової кислоти) на одного щура за добу. При цьому за два тижні артрит розвивається лише у 10-15 % тварин. в основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення способу моделювання і підвищення частоти розвитку артриту. За тиждень у тварин почав розвиватися артрит. Критерієм об'єктивності служили 100 експериментальних тварин, розподілених на дві групи. У 1-й (50 щурів) подагричний артрит моделювали за методикою прототипу, а в 2-й (50 щурів) пропонованим способом. Під ефірним наркозом через два тижні від початку експерименту шляхом декапітації тварин виводили з експерименту, гомілковостопний суглоб фіксували в 90° спирті, зрізи зафарбовували гематоксиліном-еозином й проводили морфологічне дослідження суглобових тканин. В 1-й групі артрит розвився у 6 (12 %) щурів, а в 2-й групі - у 48 (96 %), тобто в 8 разів частіше. Перевагою запропонованого способу є зменшення кількості тварин, що потрібні для моделювання подагричного артриту в 8 разів, зменшення часу і витрат на морфологічне дослідження суглобових тканин. 1 UA 75339 U Джерела інформації: 1. Патент 37040 UA, G01N33/50, А61K35/36. Опубл. 16.04.01; Бюл. № 3. 2. Ginsberg M.H., Kozin F., Chow D. Adsorption of polymorphonuclear leukocyte lysosomal enzymes to monosodium urate crystals // Arthr. Rheum.-1977. - Vol. 20, N 8. - P. 1538-1542. 5 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 10 Спосіб моделювання подагричного артриту, який включає вигодовування тварин дріжджовим аутолізатом з молібденом та інозином, уведення щурам повного ад'юванту Фрейнда з дезоксирибонуклеїновою кислотою й бичачим сироватковим альбуміном, проведення електростимуляції організму, який відрізняється тим, що додатково в подушку задньої лапи вводять суспензію кристалів сечової кислоти і підключають негативний електрод від електростимулятора в місце введення кристалів сечової кислоти. Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2