Спосіб моделювання подагричної нефропатії

Спосіб моделювання подагричної нефропатії, що складається із уведення щурам повного ад'юванту Фрейнда з дезоксирибонуклеїновою кислотою і вигодовування тварин дріжджовим аутолізатом з молібдатом амонію та інозином, який відрізняється тим, що додатково уводять бичачий сироватковий альбумін, імплантують позитивний електрод у хвостову вен у і негативний електрод під шкіру спини, проводять електростимуляцію серією прямокутних імпульсів постійного струму частотою 10000 Гц протягом двох годин. (19) (21) 2000031444 (22) 14.03.2000 (24) 16.04.2001 (33) UA (46) 16.04.2001, Бюл. № 3, 2001 р. (72) Синяченко Олег Володимирович, Мухін Ігор Віталійович, Баринов Едуард Федорович, Ніколенко Юрій Іванович, Аста хова Наталя Юріївна (73) Донецький державний медичний університет ім. М. Горького 37040 основи і в зоні спини тричі обробляють спиртовим розчином йоду. По середній лінії розсікають шкіру хвоста скальпелем та виділяють на лігатурі хвостову вену, в яку уводять стерильний електрод (№ 1). Електрод № 1 фіксують лігатурою, шкіру ушивають й обробляють спиртовим розчином йоду. Інший електрод (електрод № 2) уводять під шкіру спини і також фіксують. Електрод № 2 підключають до негативної клеми електростимулятора EC50-01, а електрод № 1 - до позитивної. На електростимуляторі встановлюють наступні параметри подразнення; період імпульсу 0,1 мс (що відповідає частоті 10000 Гц) тривалість 50 мкс, амплітуда 0 мА. В подушку задньої лапи уводять 100 мкг БСА. Вмикають електростимулятор і поступово обертаючи ручку ''Сила струму'', встановлюють амплітуду стимуляції, що дорівнює підпороговому значенню, яке викликає посмикування лапи. По закінченню електростимуляції електроди витягують. У подальшому тварин дотримують на дієті, у котрій білок заміщують дріжджовим аутолізатом. Аутолізат отримують із дріжджів витримуванням їх протягом 2 діб при 60°С, наступною стерилізацією при 1,0-1,3 атм. 120-130°C протягом 30 хвилин) з додатком 0,3 мг молібдату амонію і 100 мг інозину на одного щура за добу. Через 2 тижні під ефірним рауш-наркозом тварин декапітують, нирки фіксують у 96° спирті, зрізи забарвлюють гематоксиліном-еозіном і за ван Гізоном, ставлять PASреакцію и проводять морфологічне дослідження ниркових тканин. За наявності змін у клубочках стромі, канальцях та судинах міркують про відтворювання способу. Критерієм об'єктивності даного способу моделювання подагричної нефропатії були результати дослідження тканин нирок у 100 самців білих безпородних щурів (з масою 180-220 г), яких розподілили на дві групи. 1-у (основну) групу склали 50 тварин, у котрих проведено моделювання подагричної нефропатії за даним способом, а у 2-у (контрольну) - за способом прототипу. В 1-й гр упі зміни з боку нирок виявлено у 50 (100%) щурів, причому ураження клубочків - у 50 (100%), строми - у 50 (100%), канальців - у 49 (98%) та судин - у 44 (88%). У 2-й групі зміни з боку нирок виявлено у 35 (70%) тварин, причому ураження клубочків - у 35 (70%), строми - у 28 (56%), канальців - у 27 (54%), судин - у 19 (38%). Таким чином, подагрична нефропатія моделюється даним способом в 2 рази швидше, а клубочки, строма, канальні і судини втягуються у патологічний процес відповідно у 1,4, 1,8, 1,8 і 2,3 раза частіше, аніж при прототипі. Приклад Самцю білого безпородного щура з масою 200 г у корінь хвоста (в 2 точки) уводили ПАФ, змішаний з розчином селезінкової дезоксирибонуклеїнової кислоти крупної рогатої худоби (1 мг на 100 г маси) в об'ємі 0,3 мл із дотримуванням правил антисептики й асептики. Потім тварину наркотизували внутрішньочеревним уведенням тіопенталу (50 мг/кг) та фіксували на операційному столі. Шкіру хвоста у його основи і в зоні спини тричі обробляли спиртовим розчином йоду. По середній лінії розсікали шкіру хвоста скальпелем та виділяли на лігатурі хвостову вену, в яку уводили стерильний електрод (№ 1). Електрод № 1 фіксували лігатурою, шкіру ушивали й обробляли спиртовим розчином йоду. Інший електрод (електрод № 2) уводили під шкіру спини і також фіксували. Електрод № 2 підключали до негативної клеми електростимулятора EC-50-01, а електрод № 1 - до позитивної. На електростимуляторі установлювали наступні параметри подразнення: період імпульсу 0,1 мс (що відповідає частоті 10000 Гц) тривалість 50 мкс, амплітуда 0 мА. В подушку задньої лапи уводили 100 мкг БСА, вмикали електростимулятор і поступово обертаючи ручку ''Сила стр уму'', встановлювали амплітуду стимуляції, що дорівнювала підпороговому значенню, яке викликає посмикування лапи. Після закінчення електростимуляції електроди витягували. У подальшому тварину дотримували на дієті, у котрій білок заміщували дріжджовим аутолізатом. Через 2 тижні під ефірним рауш-наркозом тварину декапітували, нирки фіксували у 96° спирті, зрізи забарвлювали гематоксиліном-еозіном і за ван Гізоном, ставили PASреакцію і проводили морфологічне дослідження ниркових тканин. Вміст сечової кислоти у крові був 214 мкмоль/л. Морфологічне дослідження нирки; вогнищеве потовщення базальної мембрани клубочків, проліферація мезангільних й епітеліальних клітин, збільшення мезангіального матриксу, зрощування капілярів з капсулою ШумлянськогоБоумена, її склероз, лімфогістіоцитарна інфільтрація строми, її склероз, дистрофія й атрофія канальців, склероз судин. Перевагою даного винаходу є підвищення надійності моделювання ураження окремих ниркових структур при подагричній нефропатії у 1,4-2,3 раза, зменшення часу експерименту у 2 рази. Джерело інформації 1. A.с. 1561089 СССР. Способ моделирования подагрической нефропатии / Ю.И. Николенко, О.В. Синяченко, А.И. Дядык и др. (СССР). Заявлено 12.04.88 (№ 4427273), зарегистр. 3.01.90. – 2 с. 2 37040 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 3