e-карбоксіаміламід 4-(n-бутилуреїдосульфоніл)-оксанілової кислоти, який має гіпоглікемічну та протизапальну активність

ε-Карбоксіаміламід 4-(Nбутилуреїдосульфоніл)-оксанілової кислоти загальної формули: Винахід відноситься до хіміко-фармацевтичної галузі, зокрема до синтезу нових біологічно активних хімічних сполук у ряду амідів оксанілової кислоти, і може бути використаний в якості лікарської субстанції при створенні фармацевтичних препаратів з гіпоглікемічною та протизапальною активністю. Актуальною проблемою сучасної фармації є пошук нових біологічно активних сполук з широким спектром терапевтичної активності при низькій токсичності одержаних засобів. Відомий гіпоглікемічний засіб букарбан [1], який широко застосовується в медичній практиці. Цей препарат являє собою N-(параАмінобензолсульфоніл)-N-бутил-сечовину і призначений для лікування хворих на цукровий діабет II-го типу (інсуліннезалежний), на який страждає 80% від загальної кількості хворих на цукровий діабет. Разом з тим необхідно відмітити суттєві недоліки цього препарату. Внаслідок наявності у молекулі букарбану вільної групи NH2 у бензольному ядрі, що є характерним для сульфаніламідів з антибактеріальною активністю, цей препарат може призводити до порушення мікрофлори шлунку та кишок (дісбактеріоз). Крім того, він викликає шкірно-алергічні реакції та порушення кровотворення [1, 2]. Актуальним є питання пошуку протизапальних препаратів нестероїдної структури. Це пов'язано з тим, що протизапальні засоби стероїдної групи викликають порушення гормонального балансу в організмі, внаслідок чого виникають різного роду захворювання. Широке застосування в медичній практиці знайшли нестероїдні протизапальні препарати, такі як похідні фенілоцтової кислоти, зокрема диклофенак [1]. Суттєвими недоліками диклофенаку є виражена ульцерогенна дія та ряд ускладнень, які виявляються з боку шлунково-кишкового тракту, системи крові, функції нирок, нервової системи, шкіри. Ці недоліки знижують терапевтичну цінність диклофенака. В якості прототипу вибраний 1-карбокси-3метилтіопропіламід n-(бутил-уреїдосульфоніл)оксанілової кислоти [4] формули: HOOC(CH2)5NHCOCONH SO2NHCONHC4H9 (19) UA (11) 75538 (13) C2 , який має гіпоглікемічну та протизапальну активність. 3 75538 4 спектроскопії, а чистота та індивідуальність - меSO2NHCONHC4H9 CH3SCH2CH2 - CHNHCOCONH тодом тонкошарової хроматографії. Винахід ілюструється прикладами: COOH Приклад 1. Синтез  -карбоксиаміламіда 4-(Nякий проявляє антиалергійну та гепатозахисну бутилуреїдосульфоніл)-оксанілової кислоти форактивність і є найближчим структурним аналогом мули І. запропонованої сполуки. Проте відома сполука не До розчину 1,12 (0,02 Моль) калію гідроксиду в може бути використана в якості гіпоглікемічного та 5 мл води додають 2,62 (0,02 Моль)  протизапального засобу. амінокапронової кислоти. Одержаний розчин доЗадачею винаходу є одержання індивідуальної дають до розчину 3,71 (0,01 Моль) - етилового хімічної сполуки, яка проявляє виражену гіпоглікеефіру 4-(N-бутилуреїдосульфоніл)-оксанілової мічну та протизапальну активність. кислоти в 10 мл діоксану і залишають до зникненПоставлена задача вирішується шляхом оденя лужного середовища. До реакційної суміші доржання 4-(N -карбоксиаміламіду дають воду до розчинення осаду і підкислюють бутилуреїдосульфоніл)-оксанілової кислоти форНСl (1:1) до рН 2. Осад відфільтровують, висушумули: ють і кристалізують з пропанолу-2. Вихід 3,74 (82,1%). Т.пл. 226-228°С (пропанол-2). Знайдено, HOOC(CH2)5NHCOCONH SO2NHCONHC4H9 % N 12,56; S 7,28. C19H28N4O7S. Вирахувано, % N (1), 12,27; S 7,02. Спектр ПМР,  , м.д.: 12,1 який має гіпоглікемічну та протизапальну ак(1Н,у.с.).11,1; 11,0 (1Н,у.с.).8,8; 9,0 (1Н,с).7,8-8,2 (Н тивність. аром,м).3,0; 2,2; 1,7-1,0; 0,8 м.д. (Н аліф,м). ІЧСинтез заявленої сполуки здійснюють за схеспектр,  , см-1 : 3360, 3240 (NH); 3040 (ОН); 2940, мою: NHCOCOOC2H5 NHCOCONH(CH2)5COOH 2880 ((CH2); 1720 (СО); 1520 (  NH); 1320, 1160 (SO2). MON Приклад 2. Вивчення гіпоглікемічної активності + NH2(CH2)5COOH заявленої сполуки формули І проведено на щурахсамцях популяції Вістар масою 160-200 г. Сполуку, яку досліджували, вводили тваринам однієї досліSO2NHCONHC4H9 SO2NHCONHC4H9 , дної групи перорально в дозі 50 мг/кг у вигляді де M - лужний метал, наприклад К тонкої суспензії в 2% розчині крахмального клейсСинтез оснований на амідуванні етилового теру. Тварини іншої дослідної групи одержували ефіру 4-(N-бутилуреїдосульфоніл)-оксанілової букарбан у дозі 50 мг/кг, використаний в якості кислоти  -амінокапроновою кислотою в присутнопрепарату порівняння [5]. Третя група тварин була сті лугів, наприклад, калію гідроксиду, при кімнатконтрольною. Рівень глюкози в крові, взятої з хвоній температурі. При подальшому підкисленні реастової вени щурів, визначали за допомогою феркційного середовища,наприклад, додаванням НСl ментативного аналізатора глюкози "Эксан-Г" у утворюється цільовий продукт з виходом 82%. Це тварин, які попередньо голодували протягом ночі, безбарвна кристалічна речовина, яка розчиняєтьчерез 2, 4, 6 та 8 годин. ся у водних лугах та більшості органічних розчинРезультати досліджень наведені в таблиці 1. ників. Будова синтезованої сполуки підтверджена елементним аналізом, даними ПМР- та ІЧТаблиця 1 Вивчення гіпоглікемічної активності -карбоксиаміламіда 4-(N-бутил-уреїдосульфоніл)-оксанілової кислоти Вихідний рівень Зниження глікемії після введення сполуки через 2, 4, 6, 8 годин, % глюкози, ммоль/л 2 4 6 8 Заявлена сполука 4,38±0,23 32,24±0,48* 40,50±1,11* 55,47±5,44* 59,32±0,58* Букарбан 3,23±0,18 16,12±1,88 25,20±3,11 34,10±2,64 27,31±2,38 Контроль 3,14±0,24 Сполука Примітка: * - Р< 0,05 при порівнянні з букарбаном. З даних таблиці 1 видно, що заявлена сполука має виражену гіпоглікемічну активність в усі терміни дослідження і значно перевищує активність букарбану. Відсоток зниження концентрації глюкози (глікемії) в крові щурів після перорального введення у заявленої сполуки нижче ніж у букарбана через 2 години на 16,12%, 4 години - на 15,30%, 6 годин на 21,37%, 8 годин - на 32,00%. При цьому максимальний гіпоглікемічний ефект у букарбана дося гається через 6 годин, а до 8-ї години іде на зменшення, в той час як у заявленої сполуки до 8-ї години спостерігається значне зниження концентрації глюкози в крові дослідних тварин. Приклад 3. Протизапальну активність досліджуваної сполуки вивчали на дослідних щурах на моделі гострого запального набряку, який викликаний субплантарним введенням в задню лапку щура 0,05 мл 1% розчину карагеніну. Дослідження виконані на безпородних білих щурах масою 218269 г по 7 тварин в дослідних і контрольній групах. Вимір об'єму лапки здійснювали за допомогою 5 75538 6 онкомера до початку досліду та в момент максиVк  Vд % гноблення   100 мального розвитку набряку (4 години). Заявлену Vк сполуку вводили у дозі 50 мг/кг внутрішньочереде Vк і Vд відповідно об'єм лапки в контролі винно за 30 хвилин до введення флогогенного та в досліді [5]. В якості препаратів порівняння агента. Ступінь гноблення набряку (протизапальну вибрані диклофенак та індометацин. активність) розраховували за формулою: Результати одержаних експериментальних даних представлені в табл. 2. Таблиця 2 Вивчення протизапальної активністі -карбоксиаміламіда 4-(N-бутилуреїдосульфоніл)-оксанілової кислоти Сполука Заявлена сполука Диклофенак Індометацин Контроль Доза, мг/кг Приріст об'єму лапки через 4 години Протизапальна активність, Довірчий інтервал при В % до контро% M±m Р=0,05 лю 50 1,15±0,14 0,81-1,49 45 55 10 10 0,91±0,06 1,01±0,04 2,53±0,01 0,76-1,06 2,35-2,55 2,51-2,55 36 40 100 64 60 З даних таблиці 2 видно, що заявлена сполука викликає зменшення запального набряку по відношенню до контролю на 55%, протизапальна активність у дослідах з диклофенаком та індометацином складала 64 і 60% відповідно. Таким чином, заявлена сполука проявляє виражену протизапальну активність, яка дещо поступається аналогічній активності високоефективних препаратів диклофенака та індометацина, що широко застосовуються в медичній практиці. Приклад 4, Вивчення гострої токсичності заявленої сполуки проведено у дослідах на білих нелінійних мишах обох статей масою 18-24 г. Речовину вводили тваринам внутрішньошлунково у вигляді 3-5% тонкодисперсної водної суспензії, стабілізованої Твином-80. Кожну дозу досліджували на 5 тваринах. З метою вивчення і одержання необхідної інформації про летальні і максимально переносим! дози цієї сполуки, виявлення картини отруєння, а також широти терапевтичної дії, за тваринами проводили спостереження протягом 14 днів після однократного введення. Кількість загиблих тварин і тих, що вижили реєстрували через кожні 24 години. ЛД50 розраховували за методом Кьорбера [6, 7]. В дослідах на щурах встановлено, що для заявленої сполуки ЛД50 при внутрішньошлунковому введенні складає 5000 мг/кг. Відповідно гостра токсичність препаратів порівняння дорівнює: диклофенаку 360 мг/кг, індометацину - 30 мг/кг, букарбану - 400 мг/кг. Таким чином, заявлена сполука в 14 разів менш токсична ніж диклофенак, в 166 разів-ніж індометацин і в 12,5 разів-ніж букарбан і згідно з класифікацією К.К.Сидорова [8] відноситься до практично нетоксичних. Предметом винаходу є нова індивідуальна хімічна сполука 4-(N -карбоксиаміламід бутилуреїдосульфоніл)-оксанілової кислоти, яка проявляє виражену гіпоглікемічну та протизапальну активність і є практично нетоксичною. Заявлену сполуку одержують з використанням стандартних доступних хімічних реактивів простим технологічним способом, який може бути здійснений в умо вах хіміко-фармацевтичного підприємства на стандартному обладнанні. Заявлена сполука представляє інтерес для подальших доклінічних та клінічних досліджень з метою створення на її основі нових ефективних і безпечних гіпоглікемічних і нестероїдних протизапальних засобів з низькою токсичністю. Джерела інформації. 1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. В 2-х томах. - 14-е изд. - М.: Новая волна, 2004. T.1. - С. 170; Т.2. - С.19. 2. Ceriello A. // Diabetic Medicine. - 1998. - Vol. 15, № 3. - P.188-193. 3. Пат. 48021 Україна, МКВ С07С143/82, А61К31/63 Бензиламід-4-(  диметиламінопропілоксамідо)бензолсульфонілоксамінової кислоти, який проявляє аналгетичну та антигіпоксичну активність / І. П. Банний, В. П. Черних, Є. Л. Снітковський та ін. (Україна). - № 4220227. Заявл. 30.03.1987; Опубл. 15.08.2002, Бюл. № 8. 4. Пат. 48024 Україна, МКВ С 07 С 143/833, А 61 К 31/63 1-Карбокси-3-метилтіопрпіламід n(бутилуреїдосульфоніл)-оксанілової кислоти, який прявляє антиалергійну та гепатозахисну активність / І. П.Банний, В. П. Черних, С. М. Дроговоз та ін.-№ 4281731. Заявл. 10.07.1987; Опубл. 15.08.2002, Бюл. №8. 5. Доклінічні дослідження лікарських засобів : Метод, рекомендації / Под ред. А.В.Стефанова К.: "Авіцена", 2001. - С. 375-384. 6. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / 2-е изд. Л.: Медицина, 1963. - С.99-107. 7. Прозоровский В. Б. Использование наименьших квадратов для пробитанализа кривых летальности // Фармакол. и токсикол. - 1962. - Т.25, №1. - С.115-118. 8. Сидоров К.К. О классификации токсичности ядов при парентеральных способах введения. Токсикология новых промышленных веществ. - М., 1973, - №13. - С.47-51. 7 Комп’ютерна верстка М. Клюкін 75538 8 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601