Спосіб цитогенетичної диференційної діагностики фіброаденом та раку молочної залози

Спосіб цитогенетичної диференційної діагностики фіброаденом та раку молочної залози, що включає підрахунок аргентофільних гранул у ядрі епітеліальних клітин пухлин молочної залози, який відрізняється тим, що кількісно визначають підтипи І та ІІ високоактивних нуклеолонемних ядерець інтерфазних епітеліальних клітин залозистого типу, і при вмісті нуклеолонемних ядерець І типу 85,00 0,35 % та ІІ типу 15,00 0,35 % діагностують доброякісні фіброаденоми, а при вмісті нуклеолонемних ядерець І типу 35,00 0,25 % та ІІ типу 65,00 0,25 % діагностують рак молочної залози. Винахід відноситься до медицини, зокрема, до онкології і стосується дитогенетичної діагностики фіброаденом молочної залози та раку молочної залози і може бути використаний для їх диференційної діагностики. Відомий спосіб диференційної гістологічної діагностики захворювань молочної залози [1], за допомогою якого проводили визначення активності ядерцевоутворюючих регіонів хромосом у хворих на рак молочної залози. Однак використання цих даних недостатньо для цитологічної диференційної діагностики доброякісних та злоякісних пухлин молочної залози. За прототип запропонованого способу використані дослідження [Лебекова Ж.Т, Шибанова А.И. Определение активности ядрышкоорганизующих зон в дифференциальной диагностике заболеваний молочной железы // Новости клинической цитологии России. - 2000. - Т.4, №3-4. С.90-92], які основані на визначенні в цитологічних препаратах пофарбованих за [методом Howell W., Black D. (1980) в модифікації Η.Η. Мамаева та співавт. (1984)], активності аргентумпозитивних ядерцевоутворюючих зон в ядерцях епітеліальних клітин пухлин молочної залози. Перевагою даного прототипу є встановлення найбільш характерних трьох типів розташування аргентофільних ядерцевоутворюючих регіонів хромосом в залежності від ступеню диференціювання (високого, помірного, низького) раку молочної залози. Недоліком прототипу є можливість визначення тільки середнього вмісту аргентофільних гранул на ядро та загальної кількості ядерець без встановлення їх типу, що не дає змоги проведення диференційної діагностики фіброаденом та раку молочної залози в залежності від вмісту підтипів високоактивних форм нуклеолонемних ядерець, (19) UA (11) 77350 (13) (21) a200504317 (22) 06.05.2005 (24) 15.11.2006 (46) 15.11.2006, Бюл. № 11, 2006 р. (72) Болгова Лідія Севастянівна, Туганова Тамара Миколаївна, Галахін Костянтин Олександрович, Смоланка Іван Іванович, Махортова Марина Геннадіївна, Алексєєнко Оксана Іванівна, Скляр Світлана Юріївна, Досенко Ірина Вікторівна, Руда Ольга Іванівна (73) ІНСТИТУТ ОНКОЛОГІЇ АКАДЕМІЇ МЕДИЧНИХ НАУК УКРАЇНИ (56) SU 1627138 A1, 15.02.1991 RU 2068995 C1, 10.11.1996 RU 2085943 C1, 27.07.1997 А.В. Упоров, Е.В. Цырлина, К.М. Пожарисский. Сравнительное изучение пролиферации (по выявлению антигена Кi-67) и активности ядрышковых C2 1 3 77350 4 для визначення злоякісної трансформації пухлинУЗД на межі зовнішніх квадрантів лівої молочної них клітин. залози виявлено ділянку структурно перебудоваВ основу винаходу поставлено задачу вдосконої тканини до 3см у діаметрі з нечіткими контураналити спосіб цитогенетичної діагностики фіброами. Заключення: фіброаденоматоз лівої молочної деном та раку молочної залози шляхом визначензалози. Під місцевою анестезією проведена пункня підтипів (в залежності від розташування ція новоутворення. З отриманого матеріалу вигоаргентофільних гранул) високоактивних нуклеолотовлені цитологічні препарати, які пофарбовані за немних ядерець інтерфазних епітеліальних клітин методом Паппенгейма. Мікроскопічне дослідження залозистого типу, які характеризують патологічний проводили за допомогою мікроскопа МБІ-15-2, з процес та відбивають його біологічну активність, використанням об'єктивів ( 10, 40, 90). що дозволить покращити цитологічну діагностику Цитологічне заключения №2731/97: жирнофіброаденом і раку молочної залози. краплинний детрит, комплекси епітеліальних кліПоставлена задача вирішується наступним тин зі збільшеними помірно поліморфними ядчином: рами. Матеріал пункційної біопсії фіброаденом чи Цитогенетичне дослідження проведено на зараку молочної залози наноситься тонким шаром барвлених модифікованим методом Howell W. та на сухі знежирені предметні скельця, цитологічні Blak D. [3] архівних цитологічних препаратах пункпрепарати висушуються на повітрі, після цього тату. Підраховані 100 аргентумпозитивних ядер. фіксуються та фарбуються за методом Howell W. Вміст нуклеолонемних ядерець 1-го типу склав et Blak D. в модифікації Л.С. Болгової, Т.М. Туга100%, а ІІ-го - 0%, що підтверджує доброякісний нової, І.С. Кузиної [3], з подальшим дослідженням характер процесу. безпосередньо в аргенумпозитивних епітеліальних Хворій проведена операція 23.09.97р. - сектозалозистих клітинах молочної залози вмісту підтиральна резекція лівої молочної залози. пів високоактивних нуклеолонемних ядерець. ЦиПатогістологічне дослідження №13078/97: тогенетичні дослідження виконані за допомогою Проліферативно-дольковий фіброаденоматоз. імерсійної системи мікроскопа МБІ-15-2. В кожноЗаключний клінічний діагноз; Фіброаденоматоз му випадку проводився підрахунок в 100 ядрах лівої молочної залози, ліпома лівої молочної заепітеліальних клітин молочної залози аргентофілози. льних гранул в залежності від їх розмірних градаII. П-ка Т. І, 1952 р. н. Історія хвороби цій та розташування у ядрі. №3328/96. Знаходилась з 06.06.96р. по 17.07.96р. Визначені два підтипи високоактивних нуклеов клініці Інституту онкології. Близько 20 років перелонемних ядерець інтерфазних епітеліальних клібувала на диспансерному обліку з приводу мастотин залозистого типу в залежності від розташупатії. В 1994 році помітила пухлинне утворення в вання аргентофільних гранул: лівій молочній залозі, не лікувалась. З діагнозом I (перший) - характеризується переважно пекіста лівої молочної залози направлена в Інститут риферійним розташуванням пилоподібних, дрібних онкології. При обстеженні лівої молочної залози на та середніх аргентофільних гранул по поверхні межі верхніх квадрантів пальпується пухлина досліджуємих ядерець (Фіг.1); 5,0 6,0см в діаметрі, з рівними контурами, регіоII (другий) - характеризується, окрім перифенарні лімфатичні вузли пальпаторно не збільшені. ричного розташування аргентофільних гранул, Під місцевою анестезією проведена пункція новорізним ступенем заповнення поверхні досліджуваутворення. З отриманого матеріалу виготовлені них ядерець аргентофільними гранулами, які мацитологічні препарати, які пофарбовані за метоють різні розмірні градації -пилоподібні, дрібні та дом Паппенгейма. Мікроскопічне дослідження переважно середні і великі (Фіг.2). проводили за допомогою мікроскопа МБІ-15-2, з Встановлені статистично вірогідні відмінності використанням об'єктивів ( 10, 40, 90). вмісту І підтипу морфофункціональних нуклеолоЦитологічне заключения №2110/96: Залозиста немних ядерець при доброякісних фіброаденомах карцинома. (85,00±0,35)% у 20 хворих (табл.1) при порівнянні з Цитогенетичне дослідження проведено на зараком молочної залози (35,00±0,25)% у 15 хворих барвлених модифікованим методом Howell W., (табл.2) та статистично вірогідним підвищенням ІІВідк D. [3] архівних цитологічних препаратах пункго підтипу при злоякісних процесах (залозистому тату. Підраховані 100 аргентумпозитивних ядер. раку) молочної залози (65,0±0,25)% у 15 хворих Вміст нуклеолонемних ядерець І-го типу склав (табл.2), в порівнянні з фіброаденомами 20,00%, а ІІ-го - 80,00%, що підтверджує злоякіс(15,0±0,35)% у 20 хворих (табл.1), на основі яких з ний характер процесу. урахуванням цитоморфологічних ознак можна виХворій проведена операція 20.06.96р. - радиносити об'єктивне діагностичне рішення. кальна мастектомія. Запропонований спосіб цитогенетичного досПатогістологічне дослідження №10557/96: Інлідження дозволяє проводити більш точну дифефільтруючий залозистий рак молочної залози (каренційну діагностику фіброаденом та раку молочрцинома, II стадія злоякісності). В лімфатичних ної залози. вузлах метастази раку. Переконливими доказами вірогідності способу Заключний клінічний діагноз: Рак лівої молочцитогенетичної діагностики фіброаденом та раку ної залози, T3N1M0, стадія III, кл. гр. II. молочної залози є витяги з 2-х історій хвороб: Пояснення до графічних матеріалів винаходу: І. Пацієнтка Л.М., 1960 р.н.. Історія хвороби Фіг.1. Цитограми фіброаденом молочної зало№4999/97p. Знаходилась в клініці Інституту онкози (І підтип нуклеолонемних ядерець в аргентумлогії з 21.09.97р. по 27.09.97p. Після проведення позитивних ядрах епітеліальних клітин). Фарбу 5 77350 6 вання за методом Howell W. et Blak D. в модиф., Таблиця 2 1000. Фіг.2. Цитограми раку молочної залози (II підПідтипи нуклеолонемних ядерець в цитологічних тип нуклеолонемних ядерець в аргентумпозитивпрепаратах хворих з клінічним діагнозом "Рак моних ядрах епітеліальних клітин). Фарбування за лочної залози" методом Howell W. et Blak D. в модиф., 1000. Таблиця 1 Підтипи нуклеолонемних ядерець в цитологічних препаратах хворих з клінічним діагнозом "Фіброаденома молочної залози" № П.І. та по- Кількість п/п батькові ядер Підтипи нуклеолонемних ядерець (%) І II 91,00 9,00 100,00 0 100,00 100,00 0 90,00 10,00 100,00 0 100,00 0 100,00 0 100,00 0 66,00 34,00 90,30 9,70 89,00 11,00 98,00 2,00 60,00 40,00 100,00 0 58,00 42,00 80,00 20,00 75,00 25,00 80,00 20,00 30,00 70,00 1. Б-та 100 2. Т-ка 100 3. С-юк 100 4. К-й 100 5. Я-ка 100 6. С-ук 100 7. Б-ор 100 8. Т-ка 100 9. Б-ка 100 10. Л-ец 100 11. Т-на 100 12. К-ак 100 13. С-ва 100 14. Ч-ко 100 15. С-ук 100 16. Т-ва 100 17. Ч-ин 100 18. Б-ко 100 19. З-ка 100 20. М-ка 100 Середні значення нуклеолонемних ядерець в за85,00±0,35 15,00±0,35 лежності від підтипу (М±m)% № П.І. та по- Кількість п/п батькові ядер Підтипи нуклеолонемних ядерець (%) І ІІ 10s00 90,00 50,00 50,00 20,00 80,00 10,00 90,00 25,00 75,00 30.00 70,00 60,00 40,00 60,00 40,00 40,00 60,00 40,00 60,00 30,00 70,00 30,00 70,00 45,00 55,00 35,00 65,00 40,00 60,00 1. Ч-на 100 2. И-ко 100 3. П-ка 100 4. Т-ка 100 5. В-юк 100 6. С-ка 100 7. К-ир 100 8. Г-ко 100 9. Б-ко 100 10. С-ва 100 11. К-ко 100 12. Л-ко 100 13. Т-ко 100 14. Я-ко 100 15. Г-ко 100 Середні значення нуклеолонемних ядерець в за35,00±0,25 65,00±0,25 лежності від підтипу (М±m)% Джерела інформації 1. Упоров А.В., Цырлина Е.В., Пожарисский К.М. Сравнительное изучение пролиферации (по выявлению антигена Кі-67) и активности ядрышковых организаторов клеток рака молочной железы. Вопросы онкологии. - 1998. - Т.44, №3. - С.316324. 2, Лебекова Ж.Т., Шибанова А.И. Определение активности ядрышкоорганизующих зон в дифференциальной диагностике заболеваний молочной железы. - Новости клинической цитологии России. - 2000. - Т.4, №3-4. С.90-92. (Прототип). 3. Болгова Л.С, Туганова Т.Н., Кузина І.С. Модификация окраски по Howell W., Blak D. на выявление ядрышкообразующих регионов хромосом при лимфопролиферативных заболеваниях. - ND 26735. Рукопись депонирована в ГЦНМБ (Россия) 20.04.2001., www SCS MU. PSSi - 24. 7 Комп’ютерна верстка О. Гапоненко 77350 8 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601