N,n ‘-біс-(теофілін-7-ілметилен)-піперазин, що володіє противірусною та протимікробною активністю

0 ЛЛЯ СЛУЖІЬНОІИ ПОЛЬЗОВАНИЯ ЖЗ я :"f ^ I '.' • - *• СОЮЗ СОВЕТСНИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК ( 5 0 4 С 07 D 4 7 3 / 0 8 , А 61 К 31/52 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТШИЙ И ОТНРЫТИИ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4119623/31-04 (22) 10.07.86 (71) Московская ветеринарная академия им. К.И.Скрябина и Институт молекулярной биологии и генетики АН УССР (72) Б.Ф.Бессарабов, А.И.Потопальс— кий, Л.В.Лозюк, Е.И.Бесядецкая, А.Н.Миролюбова и Н.К.Сушкова (53) 547.857.4 (088.8) і (56) I.M.Peushdi, El-Sebai A. Ibrahim, S.M.Rida and F.Pshour. 7-Substituted Theophyllines (J), Theophylline-7-acetamides and-malondiamides. Die Pharmazie, 1973, 5, 300-303. S.M.Ride, A.M.Farghaly and F.A.Ashour. - Synthesis and Pharmakological Testing of Some Theophylline Estess. Die Pharmazie, 1977, 11, 672-676. (54) N,N'-BHC-(TE00HJmH-7-HJlMETHЛЕН)-ПИПЕРАЗИН, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОВИ РУСНОЙ И ПРОТИВОМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТЬЮ (57) И з о б р е т е н и е к а с а е т с я замещенных пиперазина, в частности N,N'-6HC~(теофиллин—7-илметилен)'пиперазина (ТП), обладающего п р о т и в о в и р у с н о й и противомикробной а к т и в н о с т ь ю , ч т о м о жет быть и с п о л ь з о в а н о в птицеводстве и м е д и ц и н е . Цель — с о з д а н и е новых м а л о т о к с и ч н и х веществ у к а з а н н о г о к л а с са с нехарактерной для него а к т и в н о с тью. Синтез ТП в е д у т р е а к ц и е й пипе— р а з и н а и теофиллина в среде э т а н о л а при 60 °С, Выход 7 9 , 5 £ , т . п л . 282 °С, брутто—ф—ла C2oH 2 6 N^ 0 0^ . Токсичность д л я куриных эмбрионов (эмб) 2 0 м г / э м б , т е р а п е в т и ч е с к и й индекс ( п р о т и в о в и р у с ный^ 5, к о н ц е н т р а ц и я противомикроб— ная 0,5—2 м г / э м б , п р о т и в о г р и п п о з н а я д о з а д л я мышей 15—35 м г / к г . Кроме т о г о , ТП повышает степень выводимости цыплят на 4 , 3 % , а и н т е н с и в н о с т ь их р о с т а на 11,А—12,3%. 3 т а б л . ее О5 13-88 1387376 Изобретение относится к новому биологически активному соединению — N , N ' - 6 H C - (теофиллин—7—илметилен)— пи перазину формулы 1 г ]0 который может найти применение в ветеринарии, промышленном птицеводстве и медицине. Цель изобретения — поиск в ряду пиперазинотеофиллинов новых малоток- 15 сичных соединений, обладающих новыми видами активности, нехарактерными для данного ряда — противовирусной и пр о тиво микр о б ной. Изобретение иллюстрируется следую20 щими примерами. П р и м е р 1. N-N -Бис-(теофил— лин—7—илметилен)—пиперазин (I). К раствору 0,97 г (0,005 моль) пиперазинатексагидрата в 15 мл эта- 25 нола, нагретого до 60°С, прибавляют при помешивании 1 г 98 г (0,01 моль) теофиллина. К полученной смеси добавляют 2 мл 36%—ного раствора формаль— дегида. При этом происходит растворе— 30 ниє исходных веществ с последующим выделением осадка -белого цвета. Реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре от 30 мин до 48 ч, после чего отфильтровывают выделив— 35 шийся осадок, который отмывают от исходных веществ кипящей водой и этанолом. Сушат при 105°С. Выход соединения I 1,87 г (79,5%) т.пл. 282°С. Белое кристаллическое вещество без за— 40 паха, слегка горьковатое на вкус, нерастворимое в воде, этаноле, диметил— формамиде, хлороформе, растворимое в разбавленных соляной, уксусной кислотах, 7%—ном растворе лимонной кисло— д5 ты и 5%-ном растворе аскорбиновой кислоты., диметилсульфоксиде н растворителе, состоящем из 1 об.ч. диметил— сульфоксида и 3 об.ч. полиэтиленгли— коля-400. 50 Найдено, %: С 5J.40; Н 5,77; N 29,83. С 2 0 H a 6 Що О, Вычислено, %: С 51,05; Н 5,57; N 29,76. 55 УФ~спектр в 0,1 н. НС1, AMQKC , нм (lg Є );• 269-270 (4,00); в этаноле (насыщенный раствор) 270 ( .£ 175). R/ 0,77 (бензол:этанол:вода:уксусная кислота -20:20:10:1); 0,13 (хлороформ :ацетон:25%-ный аммиак - 12:24:1). П р и м е р 2. Противовирусная активность соединения I. При исследовании биологической активности установлена низкая токсичность соединения I £МПК для эмбрионов 20 мг/эмб). Терапевтическая кон— центрация для мышей 35 мг/кг, химио— терапевтический индекс 5. Антивирусный эффект отмечен в отношении вируса гриппа типа А и А (H3N2), а также герпесвируса (штамм ВНИИП К0 24). Результаты опытов приведены в табл. І—З. Данные табл. 1 свидетельствуют о выраженном противовирусном действии соединения I, которое зависит от вре— мени начала применения и концентрации вещества, а также от множествен— ности заражения. Химиотерапевтическии эффект соединения І в опытах на мышах, инфициро— ванных вирусом А (Англия) 42/72H3N2 в дозах (10-100) Л Д У 0 , выражающийся купированием инфекционного процесса и высоким защитным действием (95— 97%), свидетельствует о корреляции антигриппозного эффекта in ovo и in vivo (табл. 2), Антигерпетическая активность предлагаемого соединения подтверждена опытами на развивающихся куриных эмбрионах, инфицированных на хорионаллан— тоисную оболочку (ХАО) при множественности инфицирования J0O ЗИД—50. Ингибирование репродукции вируса оценивали по выживаемости зародышей, а также по патологоанатомическим изменениям — отсутствию характерных бляшек на ХАО. Результаты приведены в табл. 3. П р и м е р 3. Антимикробное действие соединения I. Исследование антимикробной активности проведено в отношение ряда микроорганизмов, в том числе сальмонелл (диких и музейных штаммов), патогенных и условно патогенных грамположи— тельных и грамотрицателъных бактерий, а также дрожжеподобных грибков. В результате лабораторных испытаний обнаружено, что наиболее чувствительными к препарату оказались сальмонеллы, в частности Salmonella pullorum g.t вызывающая заболевание цыплят, передающееся трансовариальным путем. '387376 Чувствительность Salmonella pullorum g. к препарату в эксперименте обнаружена в диапазоне концентраций 4^0—0,0132 мг/мл. Концентрация 0,0132 мг/мл является бактерицидной, сохраняет активность длительное время (7 сут) и может быть использована неоднократно. Препарат использовали в растворителе, состоящем из 1 об.ч. диметилсульфоксида и 3 об.ч. полиэтиленгликоля—А00. телей при выращивании молодняка посте предынкубационной обработки и обработки суточных цыплят свидетельствовал об отсутствии каких—либо отклонений от нормы. Применение предлагаемого соединения привело к повышению интенсивности роста цыплят (в среднем на 11,4—12,3% по отношению к кон— Среднесуточный привес повысился на 9,03%, убойный выход мяса составил 82,2%. Проведены испытания по глубинной обработке предынкубационных яиц. Предварительно очищенные от загрязнеФ о р м у л а и з о б р е т е н и я ний предынкубационные яйца погружали в раствор препарата (О,025%—ный растN,N -Бис-(теофиллин—7—илметилен)вор по отношению к погружной жидкоспиперазин формулы ти у в специальные ванны, где создавали перепад давления и выдерживали в 20 растворе 10 мин- Затем яйца закладывали в инкубатор. СН Б ходе испытаний установлено повышение выводимости цыплят на 4,3%.Анаобладающий противовирусной и противо— лиз полученных зоотехнических показа- 25 микробной активностью. Т а б л и ц а Влияние соединении I на репродукцию вируса гриппа in ovo в зависимости от штамме вирусе Штаммы вируса И инфицирующие дозы (ЭИД**50) їремя введения КонцентраMr /эмбр Г" \