“семикарбазон-2, 7-біс-[2-(дієтиламіно)-етокси]флуоренону-9, який має противірусну та інтерфероніндуцируючу активність”

Семикарбазон 2,7-бис[2-(диэтиламино^этокси^-флуоренона^ формулы обладающий противовирусной и интерферониндуцирующей активностью. і (Л N3 00 О5 СО .-., 1 1221869 Настоящее изобретение относится к неописанному в литературе семикарбазону 2,7-бис [,2-(диэтиламино)-этокси} -флуоренона-9 формулы I Оценка острой токсичности препарата ИС-91 Препарат который обладает противовирусной и интерферониндуцирующей активностью. Доза п р е - Путь Колипарата, вве- ч е с т - МГ/КГ де- во выМГ/КГ ния живших из числа в опыте 4000 15 ИС-91 Целью изобретения я в л я е т с я выявление новых производных з ряду 2 , 7 -бис-С 2-(диэтиламино)-этокси] -флуо- 20 р е н а - 9 , обладающих противовирусной и интерферониндуцирующен активностью с пониженной токсичностью. 1 Т а б л и ц а 3000 0/W Перорально 5/W 2000 10/10 1000 3000 10/10 Тило1071 Перо25 рон П р и м е р 1. Семикарбазон раль2,7-~бис- [ 2 - ( д и э т и л а м и н о ) - э т о к с и J но -флуоренона-9 дихлоргидрат. 4,83 г (0,01 моль) тилорона в спирте смеКак следует из данных табл. 1, шивают с водным раствором 1,42 г токсичность семикарбазона 2,7-бис(0,012 моль) солянокислого семикар30 С2-(дизтиламино)-этокси] -флуоренобазида и кипятят 0,5 ч в присутстна-9 (ИС-91) при пероральном введевии 1,4 г (0,017 моль) ацетата н а т нии составляет 3000 мг/кг, что знария. Раствор охлаждают и прибавляют чительно ниже, чем у тилорона к нему водный аммиак до слабощелоч1071 мг/кг. ной среды. Выпавший осадок отфильтро- 35 При внутрибрюшинном введении вывают и промывают водой. При перепрепарата ИС-91 доза 250 мг/кг м а с кристаллизации из бензола получают сы токсична и вызывает 100% гибель продукт в виде основания с т . пл, животных. ЛД при внутрибрюшинном 196-197 °С. Полученное основание р а введении равно 135 мг/кг для ИС-91 и створяют в толуоле н подкисляют 40 141 мг/кг для тилорона. эфирным раствором ЇЇСЇ. Семикарбазон Из приведенных данных следует, выпадает в осадок в виде дихлоргидчто семикарбазон 2,7-бис [ 2 - ( д и э т и л р а т а . Получают 4,6 г(85%) соединеамино)-этокси] -флуоренона-9 з н а ния желто-оранжевого ц в е т а ; т . п л , чительно менее токсичен, чем тнлорон 209-210°С. 45 при пероральном введении. Найдено, %: С 57,89; Н 7,15; Противовирусную активность семикарбазона изучали на белых беспородN 12,73; Наг 13,35. ных мышах массой 18-20 г . Вычислено, %: С 57,76; Н 7,29; N 12,96; НаГ 13,11. Препарат вводили per 05 по т ик-спектр (\> см" ): С=О-169О; 50 0,5 мл однократно за 24 ч до заражеNH e 3450; C-O-C 1120-1110; N-C-N 1080; ния в разовой дозе 250 и 125 мг/кг C-C-N 1150-1140; С-Н 2930-2840. массы. Животных заражали подкожно вирусом ЕЕЕ в дозе 10. ДЦ 5о » Срок Острую токсичность семикарбазона наблюдения 14 дней. Результаты оценопределяли на беспородных белых мы- 55 ки противовирусной активности семикаршах массой 18-20 г по методу базона 2,6-бис-[2-(диэтиламино)-этокИ.П. Ашмарина и А.А. Воровьева. Реси "J-флуоренона-9 представлены в зультаты представлены в табл. 1., табл. 2, З 1221869 4 Т а б л и ц а Оценка защитной эффективности ИС-91 Препарат Доза препарата мг/кг Способ введения 125 125 р 70 60 20 < 0, 01 Перорально 12/20 60 50 18 < 18/20 90 80 43 < Перорально 12/20 60 50 2/20 10 250 Тилорон Т 14/20 250 ИС-91 Кол-во Процент Провыжив- выжива- цент ших из емости защичисла ты зараженных 2 Контроль вируса (плацебо) о,01 30 < о,01 8 - средняя гармоническая продолжительность жизни животных в днях; Р - уровень достоверности„ Статистическую обработку проводили по методу Фишера-Стьюдента. вии с требованиями и методами рекоКак следует из данных табл. 2, мендованными для испытания и оценки противовирусная активность семииндукторов интерферона. Препарат карбазона в дозе 125 мг/кг относительно вируса ЕЕЕ находится на 35 растворяют в изотоническом растворе уровне тилорона. В то же время NaCl и применяют однократно в токсичность этого препарата знаобъеме 0,2 мл внутрибрюшинно и п е чительно ниже, чем у тилорона, рорально, что составило 30 и что обусловливает более высокий 200 м г / к г . Для сравнения в качестве химиотерапевтический индекс 40 эталонного индуктора интерферона и с (см. табл. 3 ) , пользовали тилорон, который применяли per 05 в дозе 250 мг/кг и внутриХТИ препарата (отношение ЛД50 брюшиино (в/б) в дозе 30 м г / к г , что к минимальной ЕД) для ИС-91 соответотвечает наиболее оптимальной схеме ствует 24. 45 введения указанного препарата. Т а б л и ц а 3 т Сводные данные сравнительной оценПродукцию интерферона определяли ки ИС-91 и тилорона через 6, 12, 18, 24 и 48 ч после введения препаратов. Титровали интерХТИ Препарат ЛД 5 О , Защитный ферон микрометодом на пластиковых мг/кг эффект* S0 96-луночных панелях по подавлению 24 цитопатического действия (ЦЦЦ) тест60 ИС-91 3000 вируса энцефаломиокардита мышей (ЕМС) в перевиваемой культуре клеток мышиТилорон 1071 60-80 ных фибробластов Z-929. За единицу * от ю msa. 55 активности интерферона (ед/0,2 мл) принимали величину обратную конечноИнтерферониндуцирующую активность му разведению исследуемого образца, ИС-91 определяют на белых беспородпри которой наблюдается защита 50% ных мышах весом 10-12 г в соответстП р и м е ч а н и е Т 01 1221869 не отличалась от таковых показателей у тилорона. Как интерферониндуцирующая, так , и противовирусная активность препарата находятся на уровне таковых у тилорона. Тем не менее, значительно более низкая токсичность ИС-91, наКак видно из данных, табл. 4, ИС-91 ряду с одинаковой минимальной эффекпроявляет интенферониндуцирующую ак10 тивной дозой, обусловила более высотивность при обоих видах введения. кий по сравнению с тилороном химиотеУровень продукции интерферона и дирапевтический индекс. намика интерфероногенеза существенно клеток от 100 ЦПД индикаторного вируса. Результаты сравнительной интерферониндуцирующей активности ИС-91 и тилорона представлены в табл. 4. Таб. л и ц а Интерферониндуцирующая активность ИС-91 и тилорона Титр интерферона в крови мышей по часам Препараты I 18 ИС-91 4 .30 Внутри- 20-40 брюшинно 250 Перорально 10-20 24 320 320-640 320 80 320 48 10 640-1280 10 • 1 - і Тилорон 30 250 Редактор А. Цасимова Внутрибрюшинно 10 80 640 Перорально 40 320 640 Составитель Л. Иоффе Техред И.Верес 320 640-1280 20 Корректор Заказ 266/ДСП Тираж 261 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 10 А. Обручар