Спосіб визначення конфідору 200 sl (імідаклоприду) в біологічних об’єктах

Реферат: UA 82588 U UA 82588 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до ветеринарної токсикології, а саме до виявлення Конфідору 200 SL (імідаклоприду) на тонкошарових хроматографах. Конфідор 200 SL (діюча речовина - імідаклоприд) - 20 % водорозчинний концентрат з групи неонікотиноїдів, який являє собою високоефективний малотоксичний інсектицид, системної і контактної дії проти широкого спектра шкідників. Відомий спосіб визначення імідаклоприду в яблуках, сливах і винограді, що включає екстракцію імідаклоприду хлороформом, подальше очищення екстрактів від коекстрактивних речовин сумішшю ацетону з гексаном на колонці з оксидом алюмінію, випарювання, нанесення елюенту ацетоном на платівки для хроматографії "Силуфол" або "Сорбфіл" з подальшою розгонкою в різних системах рухливих розчинників, ідентифікацію реагентами ортотолідину або розчином бромфенолового синього і лимонної кислоти. [Методические указания по определению имидаклоприда в яблоках, сливах и винограде методом тонкослойной хроматографии. Сборник № 30. - Киев, 2001. - С. 63-68]. Недоліками даного способу є його трудомісткість і тривалість, що утруднюють відтворення зазначеної чутливості. Використання великої кількості наважки сприяє утворенню великої кількості коекстрактивних речовин, що заважають проведенню аналізу та вимагають включення етапу очищення екстракту, що веде до зниження чутливості методу і збільшення часу для проведення аналізу. Найбільш близьким за технічною суттю до способу, який заявляється, є (Патент RU № 2467323, МПК G01N30/90 Способ определения имидаклоприда в биологических объектах с использованием тонкослойной хроматографии) заявл. 20.06.2011; опубл. 20.11.2012-3 с.). За цим способом проводять відбір проби, екстракцію, фільтрацію, дегідратацію натрію сульфатом безводним, упарювання, нанесення розчиненого сухого залишку на хроматографічну платівку, розгонку в системі рухомих розчинників, використовуючи суміш гексан-ацетон 4:3, (при цьому Rf складає 0,48±0,05) та проводять проявлення розчином ортотолідину з подальшим опроміненням ультрафіолетовими променями. Це рішення може бути найближчим аналогом. Недоліком цього способу є недостатня чутливість та селективність. В основу корисної моделі поставлена задача розробити ефективний спосіб визначення Конфідору 200 SL (імідаклоприду) в біологічних об'єктах, що включає відбір проби, екстракцію, фільтрацію, дегідратацію натрію сульфатом безводним, упарювання, нанесення розчиненого сухого залишку на хроматографічну платівку, розгонку в системі рухомих розчинників, використовуючи суміш гексан-ацетон 4:3 (при цьому Rf складає 0,48±0,05) та проявлення розчином ортотолідину з подальшим опроміненням ультрафіолетовими променями шляхом використання як рухомої фази суміші етилацетат-ацетон 3:2 (при цьому Rf складає 0,74±0,05). і додаткового висушування платівки за температури 100 °C, щоб забезпечити ефективність способу. Порівняльний аналіз з найближчим аналогом дозволяє зробити висновок, що використання як рухомої фази суміші етилацетат-ацетон 3:2, (при цьому Rf складає 0,74±0,05) та додаткового висушування платівки за температури 100 °C підвищує точність визначення, що відповідає критерію "новизна". Спосіб виконується таким чином: Беруть 200 мг паренхіматозних органів або тканин, подрібнюють і екстрагують ацетоном по 3 4 см тричі по 30 хвилин. Екстракт фільтрують через лійку з паперовим обеззольним фільтром "червона стрічка", заповненим натрієм сульфатом безводним, в колбу. Об'єднаний екстракт 3 упарюють при температурі водяної бані 40 °C до об'єму 1 см , а потім насухо в струмі сухого 3 повітря. Сухий залишок розчиняють 0,2 см ацетону і наносять на платівку для тонкошарової хроматографії "Сорбфіл". Платівку поміщають в камеру, насичену парами етилацетат: ацетон (3:2). Після підйому фронту розчинника на 10 см платівку обробляють розчином ортотолідину та висушують при температурі 100 °C протягом 2 хвилин і поміщають під УФ-лампу на 3-5 хвилин. Імідаклоприд проявлявся у вигляді плям округлої форми з чіткими межами блакитного кольору на світлому фоні. Rf складало 0,72-0,74. Мінімальна кількість препарату, яку визначали, дорівнювала 0,5 мкг. Приклад 1. Для виявлення Конфідору 200 SL (імідаклоприду) використовували платівки для тонкошарової хроматографії "Сорбфіл". Перед використанням на платівці проводили розмітку за загальними правилами хроматографічних досліджень: лінія старту на 1,2-1,5 см від нижнього краю платівки, відстань між точками нанесення - 2 см. В першу точку наносили 2 мкг імідаклоприду, у другу - 1 мкг, у третю - 0,5 мкг імідаклоприду зі стандартного розчину з 3 концентрацією препарату 10 мкг/см . Хроматографування проводили в системі рухливого розчинника - етилацетат:ацетон у співвідношенні 3:2. Після чого платівку обробляли розчином ортотолідину висушували при температурі 100 °C протягом 2 хвилин, а потім опромінювали під 1 UA 82588 U 5 10 УФ-лампою 3-5 хвилин. Імідаклоприд проявлявся у вигляді плям округлої форми з чіткими межами блакитного кольору на світлому фоні. Rf складало 0,72-0,74. Мінімальна кількість препарату, яку визначали, дорівнювала 0,5 мкг. Приклад 2. Хроматографічну платівку приготували за методичними вказівками, які використовуються як найближчий аналог. В три точки також нанесли 2, 1, 0,5 мкг імідаклоприду 3 зі стандартного розчину з концентрацією препарату 10 мкг/см . Хроматографування проводили в системі рухливого розчинника - гексан:ацетон (4:3), потім платівку висушили, обробили розчином ортотолідину і помістили під УФ-лампу. Імідаклоприд проявився у вигляді слабопомітних плям синього кольору на світлому фоні. Rf склало 0,48±0,05. Мінімальна кількість препарату, яка визначалась, дорівнювала 1 мкг. Кількість препарату в дослідних об'єктах визначали за виведеною нами формулою: A  S2 X S1  m  K1  K 2 , де X - кількість препарату в дослідних об'єктах, мг/кг, А - кількість препарату, нанесеного на пластинку, зі стандартного розчину, 2 S1 - площа п'ятна стандартної проби, мм , 2 S2 - площа п'ятна дослідної проби, мм , М - маса проби, що досліджувалась, г, К1 - коефіцієнт, що враховує кількість екстракту, який досліджували, від загального об'єму 15 1/2, 20 25 К2 - коефіцієнт, що враховує погрішності виявлення препарату при підготовці проби до аналізу та його розрахунку, %. Спосіб виявлення Конфідору 200 SL (імідаклоприду) на тонкошарових хроматограмах, що пропонується, є ефективним. Його використання спрощує процедуру аналізу, підвищує точність визначення і є економічно вигідним. Спосіб може бути використаний для визначення його залишкових кількостей в продуктах тваринного походження і патологічному матеріалі та при діагностиці отруєнь тварин цим інсектицидом. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 30 35 Спосіб визначення Конфідору 200 SL (імідаклоприду) в біологічних об'єктах, що включає відбір проби, екстракцію, фільтрацію, дегідратацію натрію сульфатом безводним, упарювання, нанесення розчиненого сухого залишку на хроматографічну платівку, розгонку в системі рухомих розчинників, використовуючи суміш гексан-ацетон 4:3, (при цьому Rf складає 0,48±0,05) та проявлення розчином ортотолідину з подальшим опроміненням ультрафіолетовими променями, який відрізняється тим, що використовують як рухому фазу суміші етилацетатацетон 3:2 (при цьому Rf складає 0,74±0,05) та додатково висушують платівки за температури 100 °C. Комп’ютерна верстка І. Мироненко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2