Спосіб одержання антисироватки проти вірусу грипу

'•• •? * ДЛЯ СЛУЖЕБНОГО ПОЛЬЗОВАНИЯ ЭКЗ. № Ш СОЮЗ СОВЕТСНИХ СОиИАЛИСТИЧЕСНИХ РЕСПУБЛИК Л .- л І и 1 (50 А 61 К 3 9 / 1 2 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР ' ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ (21) 3986681/28-14 (22) 02.12.35 (71) Одесский научно-нсследовательский институт вирусологии и эпидемиологии им. И.И. Мечникова (72) Г.С. Скрипчеико, Т.М. Рыбакова^ И.М. Безброж и А.Г. Власова (53) 615.373(088.8) (56) Фукуока игаку дзасси, 1979, 70, К 6, с.301-319. » (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИСЫВОРОТКИ ПРОТИВ ВИРУСА ГРИППА (57) Изобретение относится к медицине и биологии, точнее к медицинской вирусологии. Предназначено для науч ных исследований по разработке путей повышения антителостимулирующей активности низкоиммуногенных антигенов различной природы и для научно-практической работы по повышению эффективности вакцин. Дель изобретения повышение титров специфических антител за счет использования в качестве адъювлнта иммуноглобулина с титром антнгемагглютинирующих антителгне менее 1:80 с получением его комплекса с вирусом. Оценку иммуногенности проводят по изменению титров гемагглютн1* нинов, т.к. существует корреляция между уровнем антител в крови и напряженностью иммунитета. § 00 со сл 17-88 1 1394519 го объема смеси и вводят мышам под эфирным наркозом по 0,3 мл внутрибрюшинно. Одновременно проводят иммунизацию инактивированным вирусом без иагружения антителами иммуноглобулина. Спустя 21 день производят . взятие крови и исследование сывороток в РТГА. Данные РТГА свидетельствуют о том, что антител остимулируклцая активность Целью изобретения является повывируса В (Сингапур) 222/79 при нагрушение титров специфических антител жении антителами возрастает в за счет использования в качестве 3,80 раза. адъюпанта иммуноглобулина с получеП р и м е р 2, Применяют методинием его комплекса с вирусом. 15 ку, аналогичную описанной в примере Способ осуществляется следующим 1. Используют экспериментально полуобразом. ченный (авт.св.. К 661018) вариант * При работе с антигенами вирусов 4/П-Хабаровск/74/77(Н1№1), характеригриппа в производственных сериях плацентарного иммуноглобулина опре- 20 зующийся пониженной иммуногенностью по сравнению с эталонным штаммом А деляется уровень антигемагглютининов (Хабаровск/74/77. Титр ГА 1:256, титр (СГА) к исследуемому штамму (выбираантител в иммуноглобулине 1:80. ются серии с титром антител не менее 1:80). Полученные данные свидетельствуют, 25 что антиген, нагруженный специфичесАллантоисная вируссодержащая жидкими антителами стимулирует титры кость или вирус ,инактивированный сог, антител в 3,16 раза выше, чем при ласно ТУ-42,14 Ъакция гриппозная введении только вирусного антигена. хроматографическая жидкая,с титром П р и м е р 3. Применяют методиГА 1:128-1:256 соединяют в равных ку, аналогичную описанной в примере объемах с иммуноглобулином. Получен- 30 1. Используют инактивнрованную комную смесь помещают на 18 ч при 4 С мерческую вакцину, содержащую вирус и затем центрифугируют при A(№1B)fa (H1№1). Титр ГА 1:2048, титр 20 тыс. об/мин в течение 1,5 ч. Посантител в иммуноглобулине 1:80. ле центрифугирования осадок ресуспендируют в физиологическом растворе в Полученные результаты свидетельст35 вуют о том, что антиген А(№1В)6, свяобъеме, равном половинному объему смеси. Наличие свободного вируса опзанный с антителами иммуноглобулина, ределяют в РГА, по отсутствию вируса стимулирует уровень специфических судят о прочности полученного компантител в 1,59 раза выше, чем при лекса. Мышей иммунизируют под эфириммунизации только вакциной. ным наркозом в количестве 0,3 мл ' При использовании серий иммуновнутрибрюшинно, взятие крови произвоглобулина, не содержащих антител дят спустя 21 день. Оценку иммуногенк вводимому в комплекс вирусу,* не ности проводят по изменению титров наблюдалось статистически достоверантигемагглютинииов, поскольку из-' ного повышения антителостимулируювестно, что существует корреляция щей активности. Это свидетельствует между уровнем антител в крови и нао необходимости наличия специфических пряженностью иммунитета. антител для создания комплекса, стимулирующего повышенное антителообраП р и м е р 1. Аллантоисную жидзование. При проверке на мышах полукость, содержащую вирус В (Сингапур) _. ченные комплексы оказались безвредны222/79, инактивируют УФО (ТУ-42.14 ми. Вакцина гриппозная хроматографическая жидкая), титр ГА 1:128, затем соединяют в равных объемах с иммуноТаким образом, использование опиглобулином (титр антигемагглютининов санного способа стимуляции иммуно1:80). После экспозиции 18 ч при 4 е С генной активности вируса гриппа и центрифугирования при 20 тыс.об/мин обеспечивает по сравнению с известныв течение 1,5 ч осадок разводят фими следующие преимущества: d помощью зиологическим раствором до половинноиспользуемого в качестве адъюванта Изобретение относится к медицине и биологии, а именно к медицинской вирусологии, и может быть использовано в научных исследованиях по разработке путей повышения антителостимулирующей активности ниэкоиммуногенных антигенов различной природы, а такке в научно-практической работе по повышению эффективности вакцин. 3 13945 19 официального иммунного препарата, не вакцины из эталонных штаммов. Выделяобладающего реактогенностью, повышаетемые в последние годы вирусы гриппа ся специфическая иммуногенность ввообладают, как правило, пониженной димых в организм антигенов вируса _ иммуногенностью. Данный метод дает гриппа; препарат иммуноглобулина шивозможность в короткий срок получать роко доступен для применения, полуинактивированные вакцины из свежевычение комплекса антиген-антитело проделенных от людей вирусов гриппа с водится в короткие сроки,(18-20 ч ) , низкой иммуногенной активностью путем в конечном продукте содержание неспе- 10 создания комплекса с антителами плацифических балластных белков и разруцентарного иммуноглобулина. шенных фрагментов иммуноглобулинов, действие которых на организм не изуФ о р м у л а и з о б р е т е н и я чено, значительно меньше^ чем в исСпособ получения антисыворотки ходном препарате. Процент очистки в 15 против вируса гриппа путем введения среднем составляет 80-97%, в организм животного инактивированного вируса с адъювантом, о т л и Использование предлагаемого меточ а ю щ и й с я тем, что, с целью да открывает перспективы для приготовления вакцин, в частности проти20 повышения титров специфических антител, в качестве адъюванта используют вогриппозных, из циркулирующих чируИммуноглобулин с титром антигемагсов, обеспечивающих, как известно, глютипирующих антител не менее,1:80. более высокий эффект защиты, чем Редактор Л. Волкова Составитель П. Бонарцев Техред Л. Сердюкова Корректор О. Кравцова Заказ 356/ДСП Тираж 491 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР . по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4