Спосіб зниження полімікробної активності асоціації candida albicans i staphylococcus aureus

Реферат: Спосіб зниження полімікробної активності асоціацій бактерій та грибів включає комбіноване застосування лікарських засобів. Зниження полімікробної активності асоціації Candida albicans і Staphylococcus aureus досягають шляхом комбінованого застосування антимікотика тербінафіну та антисептика бензоїлпероксиду. UA 88795 U (12) UA 88795 U UA 88795 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, а саме до медичної мікробіології та антимікробної хіміотерапії і може бути використана для зниження полімікробної активності асоціації мікроорганізмів Candida albicans і Staphylococcus aureus. Визначну роль у розвитку інфекційного процесу мають біологічні властивості збудників. В процесі еволюції як стратегії виживання мікроорганізми набули здатності об'єднуватися в міжвидові співтовариства. Так, C. albicans і S. aureus здатні утворювати складні асоціації засновані на відносинах синергизму. На сьогоднішній день, зниження активності мікроорганізмів - це складний процес, у зв'язку з високим рівнем їх резистентності. З метою пригнічення активності мікрорганізмів використовують фізичні (ультразвук, рентгенівське випромінювання та ін.) та хімічні методи (антисептики та хімічні сполуки) [Al-Fattani M.A. Biofilm matrix of Candida albicans and Candida tropicalis: chemical composition and role in drug resistance / M.A. Al-Fattani, L.J. Douglas // J. Med. Microbiol. - 2006. - Vol. 55, № 3. - P. 999-1008]. Комплексне застосування протимікробних препаратів є найбільш доступним і ефективним методом впливу на мікробні агенти. Це дозволяє максимально розширити спектр дії та посилити антибактеріальний ефект, особливо при змішаних інфекціях, коли збудники мікробних асоціацій мають різну чутливість до хіміотерапевтичних препаратів [Al-Fattani M.A. Biofilm matrix of Candida albicans and Candida tropicalis: chemical composition and role in drug resistance / M.A. Al-Fattani, L.J. Douglas // J. Med. Microbiol. - 2006. - Vol. 55, № 3. - P. 999-1008]. Даний спосіб зниження полімікробної активності асоціації Candida albicans і Staphylococcus aureus є найбільш близьким до того, що заявляється, за технічною суттю і результатом, який може бути досягнутим, тому його вибрано за прототип. В основу корисної моделі поставлена задача розширення спектра ефективних способів зниження полімікробної активності асоціації Candida albicans і Staphylococcus aureus. Поставлена задача вирішується тим, що у відомому способі зниження полімікробної активності асоціацій бактерій та грибів, який включає комбіноване застосування лікарських засобів, згідно з корисною моделлю, зниження полімікробної активності асоціації Candida albicans і Staphylococcus aureus досягають шляхом комбінованого застосування антимікотика тербінафіну та антисептика бензоїлпероксиду. Технічний ефект, а саме розширення спектра ефективних способів зниження полімікробної активності асоціації Candida albicans і Staphylococcus aureus, обумовлений застосуванням комбінації протимікробних засобів на основі антимікотичного препарату тербінафіну та антисептичної речовини банзоїлпероксиду. Антимікотичні препарати на основі тербінафіну отримали досить широке використання у зв'язку з високою ефективністю субстанції у відношенні до грибів роду Candida та низькою економічною вартістю. Тербінафін - це речовина похідна аліламінів, що має високу терапевтичну ефективність і низьку токсичність. Крім того, тербінафін є ліпофільною речовиною, тому накопичується в органах, багатих жировою тканиною, і таким чином, повинен добре включатися в ліпідні везикули, тому він може використовуватись для лікування інфекцій, що супроводжуються утворенням біоплівок. Механізм дії тербінафіну пов'язаний з пригніченням скваленепоксидази в клітинній мембрані грибів. Це призводить до дефіциту ергостеролу і внутрішньоклітинного накопичення сквалену, що викликає загибель клітини збудника [Иванова Н.Н. Антигрибковая активность липосомального тербинафина в отношении биопленок Candida albicans / H.H. Иванова, В.Н. Васильченко, А.П. Белозеров // Дерматологія та венерологія. 2010. - Т. 47, № 1. - С. 36-40]. Бензоїлпероксид - лікарська речовина антисептичної дії, яка має ефективність у відношенні багатьох мікроорганізмів, надає протимікробну дію відносно грампозитивних бактерій, має кератолітичну дію, покращує оксигенацію тканин, знижує утворення жиру сальними залозами шкіри [Медичний словник Дорланда. - Львів: Видавничий дім НАУТІЛУС, 2002. - У 2 томах. 2688 с.]. Спосіб виконують наступним чином: зниження полімікробної активності асоціації Candida albicans і Staphylococcus aureus досягають шляхом комбінованого застосування антимікотика тербінафіну та антисептика бензоїлпероксиду. Ефективність способу доказана експериментальним шляхом. Протимікробну активність антимікотичного препарату тербінафіну та антисептичної речовини бензоїлпероксиду відносно асоціації С. albicans і S. aureus вивчали в дослідах in vitro методом серійних розведень. Бактеріальну культуру S. aureus та С. albicans засівали на поживний агар та інкубували у термостаті при температурі 37 °C впродовж 24 год. Змиви агарової культури готували на 9 фізіологічному розчині та доводили до стандарту щільності за МакФарландом 10 клітин/мл. 1 UA 88795 U 5 10 15 Мінімальну інгібуючу концентрацію (МІК) лікарських речовин на асоціацію С. albicans і S. aureus визначали в полістиролових планшетах для імуноферментного аналізу, до яких вносили по 150 мкл поживного середовища (поживне середовище Luria-Bertani для S. aureus, рідке середовище Сабуро для С. albicans). В першу лунку вносили по 50 мкл протимікробних речовин та титрували, крім останньої, яка складала контрольні показники. В усі лунки вносили по 10 мкл добової культури мікроорганізмів, розведеної 1:100. Після цього планшети інкубували при температурі 37 °C впродовж 24 год. Для визначення МІК протимікробних речовин використовували наступні концентрації: бензоїлпероксид - 50 мкг/мл, тербінафін - 64 мкг/мл. При визначенні комбінованої дії лікарських речовин були використані їх половинні концентрації. Результати оцінювали за оптичною щільністю при довжині хвилі 545 нм на аналізаторі LabLine90 та підрахунком кількості колонієутворюючих одиниць (КУО) після відповідних розведень. Отримані дані обробляли за допомогою пакета програми Excel. Результати дослідження наведені в таблиці 1. При визначенні протимікробної дії антимікотика тербінафіна на клітини C. albicans показники середньої оптичної щільності склали (0,0451±0,007) од. ОЩ, МІК - 4 мкг/мл. При визначенні дії антисептичної речовини бензоїлпероксиду на клітини C. albicans показники середньої оптичної щільності склали (0,0563±0,006) од. ОЩ, МІК склала - 6,25 мкг/мл. Показники середньої оптичної щільності при визначенні дії бензоїлпероксиду на клітини S. aureus склали (0,0505±0,006) од. ОЩ, МІК склала - 3,1 мкг/мл. 20 Таблиця 1 Показники середньої оптичної щільності при визначенні МІК комбінації протимікробних речовин на асоціацію C. albicans і S. aureus Назва штаму C. albicans C. albicans S. aureus C. albicans+S. aureus Концентрація протимікробної речовини, мкг/мл тербінафін (64) бензоїлпероксид (50) бензоїлпероксид (50) тербінафін (32) + бензоїлпероксид (25) 0,0451±0,007* 0,0563±0,006* 0,0505±0,006* Мінімальна інгібуюча концентрація (МІК) мкг/мл 4,0 6,25 3,1 0,0401±0,012* 1,3 Середня оптична щільність (од. ОЩ) Примітка: * - різниця достовірна р