3-(2,4-динітрофеніл)-гідразон 7-карбоксиізатину, який проявляє антимікробну активність у відношені staphylococcus aureus та антигрибкову активність у відношенні candida albicans

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается синтеза биологически активных веществ, а именно 3-(2,4-динитрофенил)-гидразона 7-карбоксиизатина формулы: Указанное соединение проявляется выраженную антимикробную активность в отношении Staphylococcus aureus, а также антигрибковую активность в отношении Candida albicans и может быть использовано в медицинской практике в качестве эффективного противогрибкового и антимикробного средства. Изыскание новых антимикробных и антигрибковых средств является актуальной проблемой медицины. В настоящее время одним из наиболее широко применяемых в медицинской практике антимикробных препаратов является фурацилин [1]. Однако несмотря на высокий терапевтический эффект, ему присущи и ряд недостатков. Так, при его применении внутрь, возможны различные побочные эффекты: тошнота, иногда рвота, головокружение, аллергические сыпи, угнетение аппетита, невриты. Кроме того, этот препарат не обладает антигрибковым действием. Наиболее распространенным среди антигрибковых препаратов является низорал [2]. Он также как и фурацилин, оказывает и ряд побочных эффектов, и не является одновременно антимикробным средством. Наиболее близким, как по химической структуре, так и по направленности действия, является соединение 3,3-ди-(п-толил)-5-нитро-2-оксоиндолин-1-уксусная кислота [3], формулы: выбранное в качестве прототипа, которое обладает комплексным действием, как на микроорганизмы Staphylococcus aureus, так и на грибы Candida albicans. Предлагаемое соединение отличается от прототипа тем, что относится к другому классу соединений, а именно, к классу гидрозонов и имеет в 7-м положении аннелированного бензольного кольца заместитель карбоксильную группу, тогда как аналог - в 5-м положении нитрогруппу. В предлагаемом соединении отсутствует в 1-м положении остаток уксусной кислоты, а в 3-м положении вместо п-толильных радикалов содержатся 2,4-динитрофенил гидразоновый остаток. Задачей, решаемой изобретением, является расширение арсенала отечественных лекарственных средств, обладающих более высоким антимикробным и антигрибковым действием и малой токсичностью. Поставленная задача достигается синтезом нового химического соединения I, которое получено путем конденсации изатин 7-карбоновой кислоты (III) с 2,4-динитрофв-нилгидразоном (IV) в среде диоксана и ледяной уксусной кислоты. Полученный 3-(2,4-динитрофенил)-гидразон 7-карбоксиизатина представляет собой кирпично-красный кристаллический порошок, легко растворим в диметилформамиде (ДМФА) растворим в диоксане, не растворим в воде и трудно в спирте. Данное соединение не известно из источников научной литературы, что свидетельствует о его новизне. Предлагаемое изобретение иллюстрируется следующими примерами. Πример 1. 3-(2,4-Динитрофенил)-гидразон-7-карбоксиизатина формулы: К 0,96 г (0,005 моля) изатин-7-карбоновой кислоты и 0,99 г (0,005 моля) 2,4-динитрофенилгидразина прибавляют 1,5 мл ледяной уксусной кислоты и растворяют смесь в 15 мл диоксана. Реакционную смесь кипятят в течение 50 мин. Осадок отфильтровывают, сушат, Вы ход 1,4 г (76%). Кристаллизация из водного ДМФА. Кирпично-красные иглы. Т.пл. 346-348°С(разл.). C15H9N5O 7, мол. масса 371,26. Найдено %: N 18,65. Вычислено %: N 18,86. ИК-спектр, см-1: 3375-2650 ( n ΝΗ,ΟΗ ассоц.); 1710, 1690, 1620 (n СО); 1530, 1520 (n NO2as); 1345, 1320 (NO2S). Индивидуальность соединения I подтверждена данными ТСХ. Примечание: 1. ИК-спектр 3-(2,4-динит-рофенил)-гидразона 7-карбоксиизатина снят в таблетках калия бромида (концентрация вещества -1%) на инфракрасном спектрофотометре "Specord-IR-75 Пример 2. Изучение антибактериальной активности заявляемого соединения было проведено методом двукратных серийных разведений на жидком питательной среде - бульоне на переваре Хоттингера с содержанием амминного азота 120-140 мг/% и рН 7,2-7,4 [4,5]. Для испытаний использовали штаммы микроорганизма Staphylococcus aureus - 209 p. Микробная нагрузка составила 500 тыс. микробных тел 18-ти часовой культуры в 1 мл среды. Пример 3. Антигрибковую активность также проводили методом серийных разведений в агаре Сабуро в концентрациях 50 мкг/мло и ниже [4-6]. В качеств тест-культуры патогенных грибов использованы клинические штаммы дрожжеподобного гриба Candida albicans. Исследуемое вещество растворяли в диметилформамиде (ДМФА) и параллельно изучали активность растворителя в тех же разведениях. Для исследуемого соединения была изучена острая токсичность на интактных белых мышах обоего пола массой 16-20 г при однократном пероральном введении им исследуемого вещества по методу Пастушенко Л.В. [7]. Данные по изучению антимикробной активности в отношении Staphylococcus aureus, антигрибковой активности в отношении Candida albicans и острой токсичности заявляемого соединения и препаратов сравнения [2,9] приведены в таблице. По классификации Сидорова К.К. [8] заявляемое соединение относится к практически нетоксичным соединениям, Результаты полученных экспериментальных данных показывают, что 3-(2,4-ди-нитрофенил)-гидразон 7карбоксиизатина в 11,7 - 23,2 раза эффективнее фурацилина в отношении Staphylococcus aureus и в 30 раз менее токсичен его, а также в 24 раза превышает по активности низерал и в 8 раз менее токсичен его. Заявляемое соединение также эффективнее прототипа в 3,77 раза в отношении Staphylococcus aureus и в 1,26 раза в отношении Candida albicans, а также в 2,5 раза менее токсично. Проведенные исследования позволят отнести 3-(2,4-динитрофенил)-гидразон 7-карбоксиизатина к веществам, обладающим высокой биологической активностью и практической нетоксичностью, что может иметь значение для медицинского применения. ЛИТЕРАТУΡА 1. Ма шковский М.Д. Лекарственные средства: в 2-х ч.-М., 1988, ч. II,-с. 299-301. 2. Проспект химического завода Гедеон. Рихтер А.О. на препарат низорал. Будапешт-Венгрия. 3. Экспресс-информация. Новые лекарственные препараты. - М., Медицина, 1990. Вып. 6. - С. 3 (прототип). 4. Государственная фармакопея СССР.-ІІ-е изд. Вып. I - М., Медицина, 1989, Т. 2. -С. 194-196. 5. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования/Под ред. М.О. Биргера. - М., Медицина, 1973.-С. 175-180. 6. Навашин СМ., Фомина И.П. Справочник по антибиотикам. - М., Медгиз, 1974. -С. 36-45. 7. Пастушенко Л.В., Маруший Л.Б., Жуков Α.Α., Пилипенко Ю.А. Экспресс-метод определения среднесмертельных доз химических ве ществ//Гигиена и санитария, -1975. -Ν: 6. -С. 46-48. 8. Сидоров К.К. О классификации токсичности ядов при парентеральных способах введения//в кн. Токсикология новых промышленных химических веществ. - М., Медицина. 1973. - Вып. 13 - С. 47-51. 9. Заев СП., Крузметр Л.В. Чувствительность стафилококков к фурагину и комбинациям фурагина с антибиотиками//В сб. Фурагин и солафур. Внешторгиздат. - С. 39-43.