Спосіб одержання засобу з протизапальною та антимікробною активністю
Номер патенту: 96882
Опубліковано: 12.12.2011
Автори: Малоштан Людмила Миколаївна, Малий Володимир Валентинович, Данилова Ірина Анатоліївна, Хворост Ольга Павлівна
Формула / Реферат
Спосіб одержання засобу з протизапальною та антимікробною активністю, що включає трикратну екстракцію рослинної сировини водно-спиртовою сумішшю, об'єднання одержаних екстрактів з подальшим їх відстоюванням, фільтрацією та концентруванням до густого стану, який відрізняється тим, що як рослинну сировину використовують листя в’язу граболистого Ulmus Carpinifolia suckow, екстракцію здійснюють 40-60 % спиртом етиловим протягом двох годин при загальному співвідношенні сировина:екстрагент 1:(15-20) при температурі кипіння екстрагенту.
Текст
Спосіб одержання засобу з протизапальною та антимікробною активністю, що включає трикратну екстракцію рослинної сировини водноспиртовою сумішшю, об'єднання одержаних екстрактів з подальшим їх відстоюванням, фільтрацією та концентруванням до густого стану, який відрізняється тим, що як рослинну сировину використовують листя в’язу граболистого Ulmus Carpinifolia suckow, екстракцію здійснюють 40-60 % спиртом етиловим протягом двох годин при загальному співвідношенні сировина:екстрагент 1:(15-20) при температурі кипіння екстрагенту. (19) (21) a201013778 (22) 19.11.2010 (24) 12.12.2011 (46) 12.12.2011, Бюл.№ 23, 2011 р. (72) МАЛИЙ ВОЛОДИМИР ВАЛЕНТИНОВИЧ, ДАНИЛОВА ІРИНА АНАТОЛІЇВНА, ХВОРОСТ ОЛЬГА ПАВЛІВНА, МАЛОШТАН ЛЮДМИЛА МИКОЛАЇВНА (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ (56) RU 2152797 C1, 20.07.2000 UA 13236 U, 15.03.2006 UA 77795 C2, 15.01.2007 3 96882 рактів з подальшим їх відстоюванням, фільтрацією та концентруванням до густого стану, на відміну від прототипу передбачено, що як рослинну сировину використовують листя ільму граболистого, екстракцію здійснюють 40-60 % спиртом етиловим при загальному співвідношенні сировини до екстрагенту 1:15-1:20 протягом двох годин при температурі кипіння екстрагенту. Як рослинну сировину для здійснення заявленого засобу вибрано листя ільму (в'язу) граболистого (Ulmus Carpinifolia suckow) [3]. Відоме використання в народній медицині кори ільму граболистого у формі відварів або водних настоїв для лікування запалення слизових оболонок та лікування у вигляді компресів на рани, що погано загоюються. Листя ільму граболистого не є офіціальною сировиною, а використання його спирто 4 вих екстрактів з лікувальною метою невідоме з джерел інформації. Авторами вперше досліджено протизапальну та антимікробну дію густого екстракту з листя ільму граболистого, одержаного за заявленим способом, та стандартизовано зазначений екстракт як лікарську субстанцію, придатну для використання як безпосередньо, так і у складі лікарських засобів, виконаних у різних лікарських формах для внутрішнього і зовнішнього застосування. Всі ознаки заявленого способу визначені експериментальним шляхом. Критерієм визначення оптимального екстрагенту було вибрано вихід екстрактивних речовин і особливо суми окиснюваних фенолів з сировини. Результати дослідів узагальнено у таблиці 1. Таблиця 1 Вибір екстрагента № з/п 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Використаний екстрагент Вода очищена 10 % спирт 20 % спирт 30 % спирт 40 % спирт 50 % спирт 60 % спирт 70 % спирт 80 % спирт 96 % спирт Вихід сполук, (X ± Х) екстрактивних речовин суми окиснюваних фенолів 36,81 ±0,75 4,13 ± 0,15 28,18 ±1,05 3,26 ±0,11 28,20 ±0,92 4,28 ±0,14 26,79 ± 0,70 3,73 ±0,14 28,04 ±0,61 4,45 ±0,14 27,87 ±0,56 4,81 ±0,16 21,72 ±0,28 4,54 ±0,15 21,74 ±0,27 4,60 ±0,17 23,26 ±0,48 4,72 ±0,17 20,25 ±0,74 3,47 ±0,10 За результатами експериментів як екстрагент вибрано 40-60 % спирт етиловий, переважно 50 % спирт етиловий, (за співвідношенням суми окиснюваних фенолів та екстрактивних речовин). Узагальнені експериментальні дані з вибору співвідношення сировина: екстрагент для 50 % спирту етилового наведені у таблиці 2. Таблиця 2 Вибір співвідношення сировина: екстрагент № з/п Співвідношення сировина-екстрагент 1 2 3 4 1:5 1:10 1:15 1:20 За максимальним виходом екстрактивних речовин і суми окиснюваних фенолів визначено ефективне співвідношення сировина : екстрагент 1:15-1:20. Збільшення співвідношення понад 1:20 є економічно недоцільним і не призводить до суттєвого збільшення виходу корисних речовин. Експериментальним шляхом визначено, що оптимальному варіанту здійснення заявленого способу відповідає трикратне екстрагування сировини протягом 2 години кожного разу при сумарному співвідношенні сировина: екстрагент у заявленому інтервалі 1:15-1:20, причому процес Вихід сполук, (X ± Х) екстрактивних речовин суми окиснюваних фенолів 18,72 ±0,28 3,41 ±0,11 23,26 ±0,48 4,45 ±0,14 25,79 ±0,70 4,60 ±0,17 27,45 ±0,14 4,72 ±0,17 найбільш ефективний при температурі кипіння вибраного екстрагенту. Сукупність ознак заявленого способу є новою, невідомою з джерел інформації. Заявлений спосіб здійснюють наступним чином. Сухе, подрібнене листя ільму граболистого екстрагують 40-60 % спиртом етиловим протягом двох годин при температурі кипіння екстрагенту. Одержаний екстракт зливають. Процес здійснюють тричі при сумарному співвідношенні сировина: екстрагент 1:15-1:20. Одержані екстракти 5 96882 об'єднують, відстоюють протягом 24-48 годин при кімнатній температурі, фільтрують та концентрують переважно упарюванням під вакуумом до густого стану. Вихід кінцевого продукту становить 23-25 % від ваги повітряно-сухої сировини. Одержаний за заявленим способом густий екстракт листя ільму граболистого має вигляд темно-коричневої смолеподібної субстанції зі слабким специфічним запахом та смаком, яка легко розчинна у 50 % спирті етиловому, дуже малорозчинна у 96 % спирті етиловому, практично нерозчинна у хлороформі та діетиловому ефірі. Згідно з параметрами стандартизації густого екстракту листя ільму граболистого, одержаного за заявленим способом, вміст суми окиснюваних фенолів у перерахунку на абсолютно сухий залишок має бути не менше 12,0 %, а вміст суми кислот гідроксикоричних у перерахунку на абсолютно сухий залишок у розрахунку на кислоту хлорогенову має бути не менше 5,0 %. Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1. 5 кг подрібненого до середнього розміру часток 3,16±0,07 мм сухого листя ільму граболистого екстрагували 25 л 50 % спирту етилового (1:5) (тут і надалі кількість екстрагенту наведено без збільшення на поглинання сировиною та інші технологічні втрати), при температурі кипіння екстрагента 84 °С протягом 2 годин. Одержаний екстракт злили у збірник. Ту ж саму порцію сировини ще двічі екстрагували 50 % спиртом етиловим при співвідношенні 1:5 (загальне співвідношення 1:15) за аналогічних умов. Всі одержані екстракти об'єднали, відстояли протягом доби при кімнатній температурі та профільтрували з метою очищення від механічних домішок та баластних речовин, що випали в осад при відстоюванні. Очищений екстракт упарили у вакуум циркуляційному апараті до густого стану. Вихід склав 24 % від повітряно-сухої сировини. Приклад 2. 7 кг подрібненого сухого листя ільму граболистого трикратно екстрагували 40 % спиртом етиловим способом, аналогічним наведеному у прикладі 1. Вихід готового продукту – 23 % від повітряно сухої сировини. Приклад 3. 5 кг подрібненого сухого листя ільму граболистого тричі екстрагували 60 % спиртом етило 6 вим по 2 години при температурі кипіння екстрагенту і загальному співвідношенні сировина: екстрагент 1:20. Об'єднаний екстракт відстоювали протягом двох діб. Після упарювання одержали густий екстракт листя ільму граболистого з виходом 25 % від повітряно сухої сировини. Приклад 4. Вивчення протизапальної активності густого екстракту листя ільму граболистого у дозі 50 мг/кг проводили на моделі зимозанового набряку у щурів. Густий екстракт розчиняли у воді для ін'єкцій та вводили дослідним тваринам внутрішньошлунково. Як референт-препарат було вибрано кверцетин у дозі 50 мг/кг, яка є дозою ЕД 50 за протизапальною активністю. Досліджувані препарати вводили за 1 год. до індукції запалення. Контрольним тваринам вводили еквівалентну кількість води. Гостре асептичне запалення відтворювали введенням щурам зимозану субплантарно у вигляді 2 % суспензії у дозі 0,1 мл на тварину через 1 год. після введення досліджуваних препаратів. Вимірювання величини набряку лап у щурів проводили за допомогою механічного онкометра за Захаревським А.С. у динаміці: через 1, 2, 3, 6 і 24 год. після введення зимозану. Протизапальну активність густого екстракту листя ільму граболистого при гострому ексудативному запаленні визначали антиексудативним ефектом, тобто здатністю зменшувати розвиток набряку у порівнянні з групою контрольної патології, і розраховували за наступною формулою: А=100- , де А - протизапальна активність, %; Мо - об'єм набряклої лапи в досліді (у лікованих тварин); Мз - об'єм здорової лапи в досліді; к Мо - об'єм набряклої лапи в контролі (у нелікованих тварин); к Мз - об'єм здорової лапи в контролі. Результати проведеного дослідження наведені в таблиці 3. Отримані дані свідчать, що в умовах зимозанового запалення густий екстракт листя ільму граболистого виявляє виражену протизапальну активність та достовірно, порівняно з контролем, зменшує об'єм набряклої кінцівки. Протизапальна активність густого екстракту у дозі 50 мг/кг на Таблиця 3 Протизапальна активність густого екстракту листя ільму граболистого на моделі зимозанового набряку у щурів (n=6) Умови досліду Дози, мг/кг Об'єм набряку, у/о контроль 29,0±2,4 густий екстракт листя іль50 16,8 ±0,65*/** му граболистого Кверцетин 50 22,01,77* *- розбіжність вірогідна по відношенню до контролю; ** - розбіжність вірогідна по відношенню до препарату порівняння Протизапальна активність, % 42,0 24,0 7 моделі зимозанового набряку становила 40,2%, що в 1,67 рази вище за активність препарату порівняння кверцетин (24,0%). Приклад 5. Антимікробну активність заявленого засобу вивчали у дослідах in vitro за відомими методиками дифузії в агар (метод "колодязів") з використанням двошарової заливки чашок Петрі. Для випробування використовували наступні штами 96882 8 мікроорганізмів: Staphylococcus aureus, штам АТСС 25923; Echerichia coJi, штам АТСС 25922; Bacillus subtiJis, штам АТСС 6633; Candida albicans, штам АТСС 85/653. Як критерій фармакологічної активності вибрано діаметри зон затримки росту мікроорганізмів. Результати вивчення спектру антимікробної активності засобу, одержаного за заявленим способом, наведені у таблиці 4. Таблиця 4 Вивчення антимікробної активності густого екстракту листя ільму граблистого Досліджуваний засіб Діаметри зон затримки росту мікроорганізмів (мм) St. aureus АТСС B. subtillis АТСС С. albicans АТСС E. соlі АТСС 5922 Густий екстракт листя 25923 6633 85/653 ільму граболистого 14,80± 1,04 14,80±1,04~ 15,20 ±1,04 13,60 ±1,42 Аналіз отриманих даних свідчить, що засіб, одержаний за заявленим способом, проявляє достовірну антимікробну дію у відношенні найпоширеніших патогенних мікроорганізмів. Таким чином, заявлено новий спосіб одержання засобу рослинного походження, а саме з листя ільму граболистого, з протизапальною та антимікробною дією. Одержаний за новим способом засіб призначений для використання як лікарської субстанції у фармацевтичних препаратах з різними лікарськими формами, і може знайти застосування у різних галузях медицини: стоматології, отоларингології, дерматології, гастроентерології тощо. Заявлений спосіб простий у Комп’ютерна верстка І. Скворцова використанні, може бути здійснений на стандартному обладнані фармацевтичних підприємств, причому для впровадження даного способу існує достатня вітчизняна сировинна база. Джерела інформації 1. Патент 77347, Україна, МПК (2006) А61К36/185, А61К127/00(2006.01), А61Р29/00, А61Р31/00, А61Р13/00, заявл. 26,04.2005, опубл. 11.11.2006, бюл. №11. 2. Патент 2152797, РФ, МПК 7 А61К35/78, А61Р17/02, заявл. 02.06.1999, опубл. 20.07.2000, бюл. № 20. 3. http:// medicina.kharkov.ua/herbal/vjaz.html Підписне Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethod for receipt of means with antiinflammatory and antimicrobial activity
Автори англійськоюMalyi Volodymyr Valentynovych, Danylova Iryna Anatoliivna, Khvorost Olha Pavlivna, Maloshtan Liudmyla Mykolaivna
Назва патенту російськоюСпособ получения средства с противовоспалительной и антимикробной активностью
Автори російськоюМалый Владимир Валентинович, Данилова Ирина Анатольевна, Хворост Ольга Павловна, Малоштан Людмила Николаевна
МПК / Мітки
МПК: A61K 36/18, A61K 127/00, A61P 29/00
Мітки: протизапальною, одержання, антимікробною, активністю, спосіб, засобу
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/4-96882-sposib-oderzhannya-zasobu-z-protizapalnoyu-ta-antimikrobnoyu-aktivnistyu.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб одержання засобу з протизапальною та антимікробною активністю</a>
Попередній патент: Камерна піч “субсол”, що трансформується, для термічної обробки керамічних виробів
Наступний патент: Спосіб одержання легкорозчинного співполімеру поліакриламіду (“епаа-м”)
Випадковий патент: Упаковка для зберігання й транспортування озброєння та боєприпасів