Спосіб визначення стійкості картоплі до alternaria solani (ell. et mart.) та alternaria alternata (keissler)

Реферат: Спосіб визначення стійкості картоплі до альтернарії включає в себе зараження збудником хвороби бульб різних за стійкістю до патогену сортів картоплі. Аналіз ураження рослин проводять способом інфрачервоної спектроскопії за довжини хвилі 1510 нм. UA 100610 U (12) UA 100610 U UA 100610 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до галузі сільського господарства, зокрема до захисту рослин від негативної дії шкідливих організмів та хвороб. В сільському господарстві відомий метод інфрачервоної мікроскопії для діагностики ушкодження і стійкості зернових до шкідників [1]. В картоплярстві відомі польові [2] та лабораторні способи визначення стійкості сортів та гібридів картоплі до альтернаріозу Alternaria solani (Ell. Et Mart.) [3, 4]. Польовий спосіб включає в себе зараження бульб картоплі спорами Alternaria solani (Ell. Et Mart.) або Alternaria alternata (Keissler) у вогнище хвороби [4]. Через місяць після сходів картоплі проявляються симптоми хвороби і проводиться облік уражених зразків. Лабораторний спосіб заснований на зараження бульб картоплі інокулюмом Alternaria (прототип) [5]. Спосіб, що вирішується у прототипі, полягає в тому, що він включає в себе зараження бульб картоплі інокулюмом альтернарії. Через 7 тижнів проводять облік ураження хворобою. У сприйнятливих сортів картоплі спостерігається поява коричневих плям на листках, стеблах та на бульбах, а у стійких - їх відсутність. Згадані способи та спосіб-прототип мають такі недоліки: 1. Вони є трудомісткими. 2. Їх використання пов'язане з витратами часу. В основу корисної моделі поставлена задача розробити спосіб визначення стійкості картоплі до збудника альтернарії шляхом інфрачервоної спектроскопії. Поставлена задача вирішується тим, що у запропонованому способі шляхом зараження альтернарією бульб різних за стійкістю до патогену зразків картоплі з наступним їх аналізом інфрачервоною спектроскопією за довжини хвилі 1510 нм вдається визначити ступінь стійкості до хвороби. 1. Запропонований спосіб дозволяє визначити ступінь стійкості за значно коротший термін часу - за 20 хвилин (при прототипі - протягом 4-х годин). 2. Суттєвою відмінністю нового способу є те, що інфрачервоною спектроскопією вдається точніше визначити ступінь стійкості картоплі до альтернарії, ніж іншими способами, особливо способом-прототипом. Отже, спосіб, що заявляється, відповідає критерію винаходу "новизна" та "суттєві відміни". ПРИКЛАДИ ЗДІЙСНЕННЯ СПОСОБІВ Приклад 1 (прототип). Лабораторну оцінку стійкості картоплі до Alternaria проводили шляхом зараження бульб картоплі різних сортів із внесенням інокулюму (двотижневої-культури патогену на картопляноглюкозному агарі) шприцом (1 мл, що вміщує 5000 конідій патогену) в бульбах на глибину 10 мм. Інокульовані бульби зберігалися протягом 6-7 тижнів за 4-8 °C перед проявом захворювання. Інокуляція бульб проводилася в червні - липні, тобто в період найбільшої сприйнятливості бульб до хвороби [3, 4]. Ступінь ураження визначають на основі оцінки кожної окремої рослини за дев'ятибальною шкалою: 0 - рослини без симптомів ураження; 1 - незначне ураження, окремі плями, що займають менше 2,5 % поверхні листків; 2 - окремі плями, що займають не більше 5 % площі листків; 3 - уражено 10 % площі листків; 4 - середнє ураження, симптоми на 15 % поверхні листків; 5 - середнє ураження, майже кожен листок уражений, до 25 % поверхні листків засохло; 6 - дуже значне ураження, до 50 % листків загинуло, початок ураження стебел; 7 - до 75 % площі листків загинуло, прогресує ураження стебел; 8 - всі рослини загинули. В аналізованих таким чином 5 сортах картоплі (таблиця 1, додаток 1) ступінь ураження збудником Alternaria склала: Лугівська - 3 бали; Червона рута - 5 балів; Явір - 2 бала; Віринея - 3 бали; Загадка - 6 балів. Приклад 2 Рослини сортів картоплі були заражені збудником хвороби в лабораторних умовах (як за прикладом 1) за 4-8 °C протягом 7 тижнів [2, 3, 4]. Після цього провели аналіз реакції зразків 2 картоплі на зараження патогеном. Для цього листки картоплі 1 см , що були заражені збудником 1 UA 100610 U 5 10 15 20 25 30 35 Alternaria, поміщали у кювету інфрачервоного аналізатора ІФА-61 (фірми JEOL, Японія) і за довжини хвилі 1510 нм визначали їх ступінь ураження хворобою (у %) [1]. Математичну обробку даних проводили за Масловим Ю.І. [6] Результати досліджень представлено у таблиці 1, додаток 1, рисунок 1, додаток 1). За результатами аналізу, ступінь ураження картоплі альтернарією у сприйнятливого сорту картоплі Загадка становив 43 %; у середньо стійкого сорту Червона рута ступінь ураження склав 38 %; у стійких сортів картоплі Явір, Лугівська та Віринея ступінь ураження сягав лише 2427 % (таблиця 1, додаток 1, рисунок 1, додаток 1). На кресленні зображено ступінь ураження стійких до Alternaria solani (Ell. Et Mart, та Alternaria alternata (Keissler) сортів картоплі Лугівська - 26 %, Явір - 24 %, Віринея - 2 7 %, середньостійкого до хвороби сорту Червона рута - 38 % та сприйнятливого до альтернарії сорту картоплі Загадка - 43 %. Таким чином, аналізом ураження контрастних за стійкістю до Alternaria сортів картоплі методом інфрачервоної спектроскопії вдається визначити їх ступінь стійкості до патогену. Процес визначення ступеню стійкості 5 сортів картоплі до Alternaria інфрачервоною спектроскопією склав 20 хвилин, а способом зараження бульб картоплі суспензією хвороби (прототипом) - 4 години. Запропонований спосіб визначення стійкості картоплі до Alternaria підтверджує експериментальна перевірка, яка здійснювалась при ураженні патогеном сортів картоплі, отриманих із Інституту картоплярства НААН, Поліського відділення Інституту картоплярства НААН України. Джерела інформації: 1. Вилкова И.А. Использование инфракрасной спектроскопии для діагностики повреждения и устойчивости зерновок к клопам. Шапиро И.Д., Борщова Т.А. //Методы исследований патологических изменений растений. М., "Колос". - 1986. - С. 216-219. 2. Методы фитопатологии. // Кирай З., Клемент З., Шоймоши Ф., Вереш Й. - М.: Колос, 1974. - С. 82-159. 3. Хвороби і шкідники картоплі. //Положенець В.М., Марков І.Л., Мельник П.О. Житомир:Полісся, 1994. - 246 с. 4. Методичні рекомендації щодо проведення досліджень з картоплею. Немішаєве, 2002. - С. 143-144. 5. Иванюк В.Г. Защита картофеля от болезней, вредителей и сорняков. / В.Г.Иванюк, С.А. Банадысев, Г.К. Журомский, - Минск: Белпринт, 2005, - 696 с. 6. Маслов Ю.И. Статистическая обработка данных биохимических исследований // Методы биохимического анализа растений. Л., 1978. - С. 163-178. Таблиця 1 Ступінь ураження зразків картоплі альтернарією, визначений різними способами (2013 р.) № п/п 1 1. 2. 3. 4. 5. Сорти, гібриди картоплі 2 Лугівська Червона рута Явір Віринея Загадка Ступінь ураження Прямим способом Способом інфрачервоної зараження (бали) спектроскопії, в % (М±m) (прототип) 3 4 4 26±0,33 5 38±0,33 2 24±0,66 4 27±0,66 6 43±0,33 40 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 45 Спосіб визначення стійкості картоплі до альтернарії, що включає в себе зараження збудником хвороби бульб різних за стійкістю до патогену сортів картоплі, який відрізняється тим, що аналіз ураження рослин проводять способом інфрачервоної спектроскопії за довжини хвилі 1510 нм. 2 UA 100610 U Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3