Спосіб визначення стійкості картоплі до збудника альтернаріозу alternaria (nees)

Реферат: Спосіб визначення стійкості картоплі до збудника альтернаріозу роду Alternaria (Nees) включає вирощування сортів картоплі у лабораторних умовах. Проводиться кондуктометричний аналіз витоку електролітів через мембрану листків картоплі з подальшим визначенням ступеню стійкості картоплі до збудника альтернаріозу. UA 97975 U (12) UA 97975 U UA 97975 U 5 10 15 20 25 30 35 Корисна модель належить до галузі сільського господарства, зокрема до захисту рослин від негативної дії навколишнього середовища. В сільському господарстві відомі польові та лабораторні способи визначення стійкості картоплі до збудника альтернаріозу. Польовий спосіб визначення стійкості картоплі до збудника альтернаріозу роду Alternaria (Nees) заснований на безпосередньому визначенні стійкості картоплі у природних польових умовах [2]. Лабораторний спосіб включає в себе зараження паростків та бульб картоплі інокулюмом чистої культури (найближчий аналог). Спосіб полягає в тому, що він включає в себе зараження бульб картоплі інокулюмом збудника альтернаріозу. Після 49 днів проводився облік реакції рослин на внесення культури патогену. Згадані способи та спосіб-аналог мають такі недоліки: 1. Вони є трудомісткими. 2. Їх використання пов'язане із затратами часу і займає цілий вегетаційний період розвитку рослин картоплі. 3. Їх використання потребує зараження зразків картоплі збудником альтернаріозу, що є збудником шкодочинного захворювання і потребує суворого дотримання правил роботи з даним організмом. В основу корисної моделі поставлено задачу: розробити спосіб визначення стійкості картоплі до альтернаріозу в лабораторних умовах. Поставлена задача вирішується тим, що згідно з корисною моделлю у способі проводять кондуктометричний аналіз витоку електролітів через мембрану листків картоплі з подальшим визначенням ступеню стійкості картоплі до збудника альтернаріозу роду Alternaria (Nees). 1. Даним способом вдасться визначити ступінь стійкості картоплі до альтернаріозу протягом 2-х годин кондуктометричним способом. 2. Суттєвою відмінністю нового способу є те, що даним способом вдається визначити ступінь стійкості картоплі до альтернаріозу в любий період року. ПРИКЛАДИ ЗДІЙСНЕННЯ СПОСОБІВ Приклад 1 Для дослідницької роботи використовують наступні сорти картоплі: Скарбниця, Загадка, Фантазія, Світанок Київський, Віринея, Лугівська, Поліське Джерело, Червона Рута, Слов'янка. Зразки бульб сортів картоплі заражують, вносячи інокулюм збудника альтернаріозу (двотижнева культура патогену на картопляно-глюкозному агарі) шприцом на глибину 10 мм. Інокульовані бульби зберігались протягом 6-7 тижнів при 25-30 °C до прояву захворювання, по закінченні даного терміну проводять облік уражених рослин картоплі. Ступінь ураження визначали на основі оцінки кожної окремої бульби, за даною шкалою: Бал ураження 0 0,1-1 2-3 4-5 40 45 50 55 Розвиток хвороби, % 0 5-10 20-30 50 Статистичну обробку даних проводили за Масловим Ю.І. [5]. В результаті проведених досліджень, ступінь ураження сортів картоплі: Скарбниця та Загадка склав 5 балів, сорт Світанок Київський - 4 бали, сорти Фантазія та Віринея - 3 бали, Лугівська - 2 бали, а сорти Поліське Джерело та Червона Рута - 1 бал. Отримані результати представлено в додатку 1, таблиця 1. Приклад 2 Як і у прикладі 1 використовували аналогічні сорти картоплі. Бульби сортів картоплі вирощували у лабораторних умовах до появи перших 2-х парних листків. Починаючи з апікального листка відбирали листки першої і другої пар. Промивали двічі дистильованою водою та висушували поверхню фільтрувальним папером. Це необхідно для видалення екзогенних електролітів, адсорбованих на поверхні листка. З відібраних та підготовлених листочків коркорізом вирізали диски діаметром 10 мм, поміщали в пробірки (по 3 диски в кожну) місткістю 0,2 мл з бідистильованою водою. Перед виміром витоку електролітів до кожної пробірки додавали 3,8 мл води і помішали в ультратермостат для інкубації в певному часовому діапазоні та температурі. Після зазначеного часу пробірки переносили у водяний термостат, інкубували 2 години за температури 100 °C при постійному коливанні і заміряли 1 UA 97975 U 5 10 15 20 електричну провідність за допомогою кондуктометра №5721М (Польща, додаток 2, рисунок 1). У кінці експерименту визначали максимальну електропровідність (Е55) після змертвіння листкових дисків кип'ятінням упродовж 30 хв. з наступним урівноваженням виходу електролітів інкубацією протягом 1 години за температури 55 °C з постійним коливанням. Електропровідність 2 вимірювали в S/cм . Відносний витік електролітів (ВВЕ) виражали співвідношенням електропровідності за певної температури (Е55) і (Е100) [1, 3, 4]. Статистичну обробку даних проводили за Масловим Ю.І. [5]. За результатами проведених досліджень з 9 аналізованих сортів картоплі Слов'янка, Скарбниця, Загадка, Фантазія, Віринея, Світанок Київський, Лугівська, Поліське Джерело, Червона Рута, найменше значення витоку електролітів виявлено у сортів картоплі: Слов'янка 2 2 2 (0,80 S/cм ); Червона Рута (0,81 S/см ), Поліське Джерело(0,85 S/см ), Лугівська (0,87 2 S/cм ). Дані сорти картоплі характеризуються вищою стійкістю до альтернаріозу. У решта 2 2 сортів картоплі витік електролітів склав: Віринея (0,91 S/см ), Фантазія (0,92 S/см ), Світанок 2 2 2 Київський (0,94 S/см ), Скарбниця (0,96 S/см ), Загадка (0,97 S/см ), (додаток 1, таблиця 1). Таким чином, шляхом визначення витоку електролітів кондуктомеричним способом вдасться визначити ступінь стійкості картоплі до альтернаріозу. Процес визначення стійкості картоплі до альтернаріозу склав 2 години, а способом прототипом - 49 днів. Спосіб визначення стійкості картоплі до альтернаріозу дозволяє: визначити стійкість в любий період року в лабораторних умовах. Запропонований спосіб визначення стійкості картоплі до альтернаріозу було підтверджено експериментальною перевіркою сортів, отриманих з Інституту картоплярства HAАH України, яка здійснювалась при ураженні патогеном. Таблиця 1 Ступінь стійкості сортів картоплі до збудника альтернаріозу роду Alternaria (Nees), визначений різними способами (2014 р.) № п/п 1 1. 2 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 25 30 35 Сорти картоплі 2 Загадка Скарбниця Фантазія Світанок Київський Віринея Лугівська Поліське Джерело Червона Рута Слов'янка Ступінь стійкості до альтернаріозу 2 Ступінь стійкості бульб Кондуктометрія (S/см ) (Прототип) (Спосіб, що заявляється) 3 4 5 0,97±0,01 5 0,96±0,0033 3 0,92±0,0058 4 0,94±0,0088 3 0,91±0,0058 2 0,87±0,0033 1 0,85±0,0033 1 0,81±0,0058 1 0,80±0,0058 Джерела інформації: 1. Зауров О.А. Кинетика экзоосмоса электролитов теплолюбивых растений при действии пониженных температур / О.А. Зауров, А.С. Лукаткин // Физиология растений. - 1985. - Т. 32, Вып. 2. - С. 347. 2. Кононученко В.И. Методичні рекомендації щодо проведения досліджень з картоплею. / В.В. Кононученко - Немішаєве, 2002. - 183 с. 3. Патент України на корисну модель № 45055 МКВ A01G7/00 від 15.03.2002 р. Спосіб оцінки стійкості сортів картоплі до посухи. / Григорюк І.П., Нижник Т.П, Мицко В.М., Ткачов В.І., Войцешина Н.І. опубл. 15.03.2002 р. //Офіційний бюлетень. Промислова власність, Бюл. № 3. С. 56. 4. Мельник П.О. Визначення стійкості рослин до високих температур методом витоку електролітів / П.О. Мельник, І.І Мойса, О.П. Даскалюк // Вісник аграрної науки. - 2006. - С. 44-46. 5. Маслов Ю.И. Статистическая обработка данных биохимических исследований / Ю.И. Маслов //Методы биохимического анализа растений. Л, 1978. - С. 163-178. 2 UA 97975 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 Спосіб визначення стійкості картоплі до збудника альтернаріозу роду Alternaria (Nees), що включає вирощування сортів картоплі у лабораторних умовах, який відрізняється тим, що проводиться кондуктометричний аналіз витоку електролітів через мембрану листків картоплі з подальшим визначенням ступеню стійкості картоплі до збудника альтернаріозу. Комп’ютерна верстка Д. Шеверун Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3