Спосіб моделювання симптоматичної артеріальної гіпертензії у дрібних гризунів

Реферат: Спосіб моделювання симптоматичної артеріальної гіпертензії у дрібних гризунів шляхом багаторазового внутрішньом'язового введення самцям щурів лінії Вістар кортикостероїдного гормону та здійснення сольового навантаження, причому застосовують старих щурів віком 1820 місяців, як кортикостероїдний гормон використовують преднізолон, введення гормону здійснюють протягом 30 днів два рази на добу вранці о 7-00 годині у дозі 2 мг/кг та ввечері о 2000 у дозі 4 мг/кг із одночасним примусовим випаюванням 5 мл сольового розчину (NaCl 2,3 %). UA 102234 U (12) UA 102234 U UA 102234 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель стосується медицини, а саме патологічної фізіології та експериментальної медицини, і може бути застосована для моделювання експериментальної патології в кардіології та фармакології з метою визначення особливостей патогенезу та розробки засобів запобігання і лікування хвороби. Проблема створення адекватної моделі симптоматичної артеріальної гіпертензії є актуальною не тільки для експериментальної медицини. Це пов'язано з тим, що артеріальна гіпертензія - одна з найважливіших медико-соціальних проблем сучасності. Зацікавленість цим захворюванням обумовлена його широкою розповсюдженістю, частими й важкими ускладненнями, високою летальністю. Артеріальна гіпертензія є основним чинником ризику розвитку серцево-судинних захворювань, таких як інфаркт міокарда, інсульт, серцева недостатність, що займають перші позиції по захворюваності, причинам смертності й інвалідізації працездатного населення. Слід зазначити, що за етіопатогенетичними механізмами розвитку це захворювання є неоднорідним, з віком хвороба прогресує й досягає піка близько 5060 років. Згодом у людей з артеріальною гіпертензією виникає поразка органів - мішеней, а саме кровоносних судин, сітківки ока, нирок, серця, головного мозку. З огляду на той важливий факт, що артеріальна гіпертензія у своїй етіології й механізмах патогенезу неоднорідна, має певні особливості розвитку й плину процесу, супроводжується незворотними змінами в органах - мішенях, виникає необхідність в експериментальних дослідженнях розробити найбільш адекватну експериментальну модель даної патології для всебічного її вивчення, розробки методів ранньої діагностики, профілактики й лікування. Адекватна експериментальна модель артеріальної гіпертензії - це модель, при якій у лабораторних тварин формується стійке підвищення артеріального тиску, розвиваються специфічні поразки органів мішеней, тотожні змінам у людей, що страждають артеріальною гіпертензією. При цьому повинна зберігатися висока виживаність тварин. Тому розробка нової адекватної та високоспецифічної моделі симптоматичної артеріальної гіпертензії є актуальним питанням сучасної медицини і викликає необхідність приділити увагу розробці такого способу. Аналогом є спосіб моделювання артеріальної гіпертензії у щурів (Dexamethasone hypertension in rats:role of prostaglandins and pressor sensitivi to norepinephrine /Handa M., Kondo K., Suzuki H., Saruta T //Hypertension. - 1994. - Vol. 6. - P. 236-241.) який полягає у призначенні щурам протягом 7-мі днів спеціальної дієти із вмістом натрію 0,23 г /100 г і калію 0,77 г /100 г та щоденними випаюваннями per os дексаметазону в дозі 0,1 мг на день для однієї тварини. Спільними суттєвими ознаками аналога і корисної моделі, що заявляється, є такі: - внутрішньо-м'язові введення аналога стероїдного гормону; - навантаження хлоридом натрію. Цей спосіб не є достатньо ефективним, тому що потребує використання складної дієти, при випаюванні тварин розчином дексаметазону щури не завжди отримують потрібну дозу препарату, 7 денний строк моделювання не завжди призводить до змін в органах-мішенях, що патогномонічні для артеріальної гіпертензії. Найбільш близьким за технічною суттю та результатами, що досягаються, є спосіб моделювання кардіовазоренальної артеріальної гіпертензії у щурів (Патент № 2327228 РФ, G09B23/28. Способ моделирования кардиовазоренальной артериальной гипертензии у крыс /Новгородцева Т.П., Антонюк М.В., Котельников В.Н. и др. /заявл. 2006-10-11; публ. 20.06.2008), який полягає у призначені протягом 14 днів щурам лінії Вістар кардіовазонефропатогенної напівсинтетичної дієти, збагаченої холестерином, навантаженою солями двозаміщеного фосфорно-кислого водного натрію при дефіциті калію та магнію, щоденних внутрішньом'язових введень суспензії гідрокортизону ацетату в дозі 1,5 мг на 100 г маси тварини, заміною питної води 1 %-ним розчином хлориду натрію, з одноразовим на 13 сутки холодовим впливом в умовах утримання щурів протягом 4 годин при t=+4 °C. Прототип та спосіб, що пропонується, мають такі спільні суттєві ознаки: - застосування самців-щурів лінії Вістар; - багаторазове внутрішньом'язове введення кортикостероїдного гормону; - навантаження хлоридом натрію. Але спосіб-прототип є недостатньо ефективним, тому що потребує використання дуже складної дієти, необхідно мати спеціально підготовлену холодну кімнату для утримання щурів при +4 °C. В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення способу моделювання симптоматичної артеріальної гіпертензії у дрібних гризунів шляхом створення умов мультифакторного впливу, а саме старий вік тварин, підвищення рівня кортикостероїдів із альдостероновою активністю, циркадний дисбаланс стероїдів протягом дня, сольове 1 UA 102234 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 навантаження протягом тривалого часу, що забезпечить підвищення адекватності та високоспецифічності моделі симптоматичної артеріальної гіпертензії. Поставлена задача вирішується тим, що у способі, який включає застосування самців-щурів лінії Вістар, яким проводять внутрішньом'язове багаторазове введення кортикостероїдного гормону та здійснюють сольове навантаження, новим є те, що застосовують старих щурів віком 18 - 20 місяців, як кортикостероїдний гормон використовують преднізолон, введення гормону здійснюється протягом 30 днів два рази на добу вранці о 7-00 годині у дозі 2 мг/кг та ввечері о 20-00 у дозі 4 мг/кг із одночасним примусовим випаюванням 5 мл сольового розчину (NaCl 2,3 %). Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю ознак, що заявляються, та технічним результатом полягає у такому: - для моделювання використовують тільки старих щурів-самців, це пов'язано з тим що симптоматичні артеріальні гіпертензії частіше розвиваються в похилому віку; - дворазове введення преднізолону із максимальною дозою ввечері призводить до порушення добового циркадного рівня стероїдних гормонів, формування якого спостерігається у більшості пацієнтів, хворих на артеріальну гіпертензію. - використання преднізолону для індукції артеріальної гіпертензії дозволяє утворити підвищення рівня не тільки кортикостероїдів, але й альдостерону, активність якого він має. - довготривале моделювання симптоматичної артеріальної гіпертензії протягом 30 днів дозволяє не тільки досягти стійкого підвищення артеріального тиску у щурів від 155±5 мм рт. ст. та вище, але і отримати патогномонічні морфологічні зміни в органах-мішенях (гіпертрофії міокарду лівого шлуночку, ознакам ниркової недостатності, патології сітківки ока). Спосіб здійснюють таким чином: Старим щурам-самцям лінії Вістар віком 18-20 місяців протягом 30 днів два рази на добу внутрішньом'язово вводять преднізолон вранці о 7-00 годині у дозі 2 мг/кг та ввечері о 20-00 у дозі 4 мг/кг із одночасним примусовим випаюванням 5 мл сольового розчину (NaCl 2,3 %). Приклад. Для моделювання симптоматичної артеріальної гіпертензії старих щурів-самців лінії Вістар віком 18-20 місяців розподілили на дві групи, першу, загальною кількістю 15 тварин склали інтактні щури. У щурів другої групи в кількості 15 осіб протягом 30 днів здійснювали моделювання симптоматичної артеріальної гіпертензії. Щури-самці лінії Вістар були отримані з віварію Об'єднання ветеринарної медицини ПП "Біомодельсервіс" міста Києва. Протокол дослідження погоджено з локальним етичним комітетом. Всі дослідження були проведені в осінньо-зимовий період у віварії Запорізького державного медичного університету. Тварини знаходилися в приміщенні при температурі повітря 20-25 °C, при світловому дні 7-00-20-00, із вільним доступом до їжі та води. Для моделювання симптоматичної артеріальної гіпертензії щурам другої групи протягом 30 днів два рази на день внутрішньом'язово вводили преднізолон вранці о 7-00 годині у дозі 2 мг/кг та ввечері о 20-00 у дозі 4 мг/кг із одночасним примусовим випаюванням 5 мл сольового розчину (NaCl 2,3 %). Щурам обох груп до початку моделювання, на 7-й, 14-й, 21-й та 30-й день вимірювали систолічний артеріальний тиск методом плетизмографії за допомогою приладу Transonic Animal Research Flowmeter T-106 Series (Transonic Systems Inc., США). У щурів 1-ї групи систолічний артеріальний тиск протягом усіх вимірювань складав 125±5 мм рт. ст., у щурів 2-ї групи на 7-й день 155±5 мм рт. ст. на 14-й, 21-й та 30-й відмічалося стійке підвищення систолічного артеріального тиску до 175±5 мм рт. ст. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 50 55 Спосіб моделювання симптоматичної артеріальної гіпертензії у дрібних гризунів шляхом багаторазового внутрішньом'язового введення самцям щурів лінії Вістар кортикостероїдного гормону та здійснення сольового навантаження, який відрізняється тим, що застосовують старих щурів віком 18-20 місяців, як кортикостероїдний гормон використовують преднізолон, введення гормону здійснюють протягом 30 днів два рази на добу вранці о 7-00 годині у дозі 2 мг/кг та ввечері о 20-00 у дозі 4 мг/кг із одночасним примусовим випаюванням 5 мл сольового розчину (NaCl 2,3 %). 2 UA 102234 U Комп’ютерна верстка О. Гергіль Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3