2-етокси-6,9-діаміноакридинію галогенбензоати, що проявляють антимікробну, протизапальну, антиоксидантну, мембраностабілізуючу та кардіопротектну активнасть

Данное изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к синтезу новых химических соединений 2-этокси-6,9-диаминоакридиния гало-генбензоатов, проявляющих антимикробную, противовоспалительную, антиоксидантную, мембраностабилизирующую и кардиопротекторную активность. Полученные соединения и их свойства в литературе не описаны. Изыскание новых антимикробных, противовоспалительных, антиоксидантных, мембраностабилизирующих и кардиопротекторных средств является актуальной проблемой медицины. Известны лекарственные препараты преимущественно противовоспалительного действия: этакридина лактат, индометацин, вольтарен, витамин Е [1]. Однако основной тенденцией в создании лекарственных средств является повышение их терапевтической активности и расширение гармонически сочетающегося спектра действия. Наиболее близким по структуре и направленности действия является 2-амино-4-нитро-бензоат 2-этокси6,9-диаминоакридина, проявляющий антимикробную активность [2]. К недостаткам известного соединения можно отнести их относительно невысокую активность и узкий спектр действия. В основу изобретения поставлена задача создания химических соединений акридинового ряда, проявляющих антимикробную, противовоспалительную, антиоксидантную, мембраностабилизирущую и кардиопротекторную активность, что позволит расширить арсенал лекарственных средств аналогичного спектра действия. Поставленная задача решается путем синтеза новых соединений 2-этокси-6,9-диаминоакридиния галогенбензоатов проявляющих указанную активность. Заявляемые соединения получают сливанием спиртовых растворов 2-эктокси-6,9-диаминоакридина и 2бромбензойной кислоты при получении 2-этокси-6,9-диаминоакридиния 2-бромзоата (I) и сливанием спиртовых растворов 2-этокси-6,9-диамино-акридина и 2-хлорбензойной кислоты при получении 2-этокси-6,9диаминоакридиния 2-хлорбензоата (II). Полученные вещества - 2-этокси-6,9-ди-аминоакридиний галогенбензоаты представляют собой кристаллические порошки желтого цвета, растворимые в воде, плохо - в этаноле, хорошо растворимые в диоксане, ацетоне, ДМФА, ДМСО. Структура соединений подтверждена элементным анализом и ИКспектром. Изобретение иллюстрируется следующими примерами: Пример 1. Получение 2-этокси-6,9-диаминоакридиния 2-бромбензоата (1). 2,53 г (0,01 моль) 2-этокси-6,9диаминоакридина растворяют при нагревании в 15 мл этанола, 2,01 г (0,01 моль) 2-бромбензойной кислоты растворяют в 10 мл этанола. Затем растворы сливают и оставляют при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат. Выход 4,22 г (93%). Тпл 215°С с разл. C22H20BrN3О3 M.M. 454, 322 Найдено: С, % 68.07; Н, % 4,52; N, % 9,11 Вычислено: С, % 58,16; Н, % 4,44; N, % 9,24 ИК-спектр в KBr, см-1: 3350, 3200, 1642, 1598, 1500, 1.417, 1383, 1232, 1171, 1140, 1048. Пример 2. Получение 2-этокси-6,9-диаминоакридиния 2-хлор-бензоата (II). 2,53 г (0,01 моль)2-этокси-6,9диаминоакридина растворяют при нагревании в 15 мл этанола, 1,56 г (0,01 моль) 2-хлорбензойной кислоты растворяют в 10 мл этанола. Затем растворы смешивают и оставляют при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат. Выход 4,00 г (99%). Тпл 192°С с разл. C22H20N3O3CI М.м. 409,870 Найдено: С, % 64,50; Н, % 5,02; N. % 10,32 Вычислено: С, % 64,46; Н, % 4,92; N, % 10,25 ИК-спектр в КВr, см-1: 3302, 3145, 1640, 1581, 1496, 1397, 1249. 1179, 1150, 1055. Пример 3. Определение антимикробной активности заявленных соединений проводилось методом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде. Для испытаний использовано 4 штамма микроорганизмов: - золотистый стафилококк, шт, АТСС 25923; - сенная палочка, шт. АТСС 7241; - кишечная палочка, шт. АТСС 25922; - синегнойная палочка, шт. АТСС 27853. Для культивирования бактерий использовали аминопептид, предварительно разбавленный два раза дистиллированной водой, рН 7,2. Микробная нагрузка бактерий составляла 105-106 микробных тел в 1 мл среды. Результаты изучения антимикробной активности и токсичности 2-этокси-6,9-ди-аминоакридиния 2-бромбензоата (1), 2-этокси-6,9диаминоакридиния 2-хлорбензоата (II), препарата сравнения этакридина лактата и прототипа (III) представлены в таблице 1. Как видно из данных, приведенных в таблице 1, соединения I и II проявляют более высокую антимикробную активность и значительно меньшую токсичность. Соединение I проявляет более высокую антимикробную активность в сравнении с прототипом (III): по отношению к золотистому стафилококку в 2 раза, по отношению к синегнойной палочке в 2 раза; в сравнении с этакридина лактатом: по отношению к золотистому стафилококку в 8 раз; по отношению к сенной палочке в 4 раза, по отношению к кишечной палочке в 4 раза, поотношению к синегнойной палочке в 8 раз. Соединение II проявляет более высокую антимикробную активность в сравнении с прототипом (IIІ); по отношению к золотистому стафилококку в 2 раза, по отношению к синегнойной палочке в 4 раза; в сравнений с этакридина лактатом; по отношению к золотистому стафилококку в 8 раз; по отношению к сенной палочке в 4 раза; по отношению к кишечной палочке в 4 раза; по отношению к синегнойной палочке в 16 раз. Сравнение острой токсичности новых соединений показало, что соединение I менее токсично по отношению к прототипу (III) в 1,1 раза, по отношению к этакридина лактату в 164,8 раза. Соединение II менее токсично по отношению к прототипу (III) более, чем в 1,3 раза, по отношению к этакридина лактату более, чем в 190,5 раза. Пример 4. Изучение противовоспалительной активности заявляемых соединений I и II проводили на модели каррагенинового отека у мышей массой 18-20 г. Для воспроизведения модели острого асептического воспаления мышам в одну из задних конечностей субплантарно вводили 0,05 мл 1% раствора каррагенина ("Sigma", США). Через 4 часа задние лапки животных ампутировали на уровне тазобедренного сустава и взвешивали. По разнице в весе отечных и неотечных лапок животных по сравнению с контролем рассчитывали анти-экссудативную активность, которую выражали в % угнетения отека. В качестве эталонного препарата использовали индометацин какодин из наиболее эффективных в настоящее время НПВС. Заявляемые вещества и стандартные препараты вводили внутрижелудочно, однократно. В каждой серий опыта использовали по 6 животных. Результаты исследования представлены в таблице 2. Как видно из таблицы 2 заявляемые вещества обладают достаточно высокой противовоспалительной активностью, не уступающей индометацину и вольтарену, кроме того: вещество I в среднем в 8,2-9,8 раз менее токсично, чем вольтарен и индометацин, а вещество II в среднем в 11,3-133,3 раза менее токсично, чем вольтарен и индометацин, соответственно. Характеризуя широту терапевтического действия, отмечается еще более выраженное преимущество заявляемых соединений. Вещество I превосходит по данному показателю вольтарен и индометацин в 6,5; 98 раз, а вещество II поданному показателю превосходит вольтарен и индометацин в 10,1; 151,5 раз, соответственно. Пример 5. Антиоксидантную, мембрано-стабилизирующую и кардиопротекторную активность определяли на модели изадрино-фуразолидонового поражения миокарда у крыс. Данная модель характеризуется деструктивно-дистрофическими изменениями в миокарде, повышением активности перекисного окисления липидов (ПОЛ). Крысам массой 180-200 г внутрижелудочно, через зонд вводили фуразолидон в дозе 200 мг/кг. Через 1 час внутримышечно вводили изадрин - 40 мг/кг. Вышеперечисленный спектр фармакологической активности оценивали на 4-е сутки (максимум изменений в миокарде). Антиоксидантную активность заявляемых соединений и препаратов сравнения (вольтарен, витамин Е) определяли по уровню малонового диальдегида в миокарде опытных и контрольных групп животных по реакции с тиобарбитуровой кислотой, Мембраностабилизирующую активность - по уровню маркерного фермента кардиомиолиза - аспартатаминотрансферазы (АсАТ), который определяли спектрофотометрически по реакции с 2,4-фенилгидразином. Кардиопротекторную активность рассчитывали как интегральный показатель среднего значения суммы мембраностабилизирующей и антиоксидантной активности. Заявляемые вещества и стандартные препараты вводили внутрижелудочно за 1 час до моделирования изадриново-фуразолидонового поражения миокарда и затем ежедневно в течение 4-х дней в эффективных дозах по противовоспалительному действию. Результаты проведенных экспериментов представлены в таблицах 3 и 4. Как видно из таблиц 3 и 4 заявляемые соединения обладают выраженной мембраностабилизирующей, антиоксидантной и кардиопротекторной активностью. Соединение I превосходит по указанным видам активности вольтарен в 2,4; 1,8; 2,1 раза, витамин Е - в 4,6; 1,9; 2,7 раза соответственно, а соединение II превосходит указанным видам активности вольтарен в 1,6 раза; витамин Е - в 3,0; 1,7; 2,2 раза соответственно. Следует отметить, что данная активность у соединений достигается дозами в 5 раз меньшими, чем у витамина Е. Таким образом, заявляемые соединения обладают антимикробной, противовоспалительной, мембраностабилизирующей, антиоксидантной и кардиопротекторной активностью, что делает их перспективными в плане дальнейшего изучения с целью создания высокоэффективных лекарственных препаратов с широким фармакологическим спектром, гармонично дополняющим друг друга.