Спосіб моделювання гострого токсичного ураження печінки у щурів

Реферат: Спосіб моделювання гострого токсичного ураження печінки у щурів шляхом введення 50 % олійного розчину тетрахлорметану. Тетрахлорметан вводять підшкірно в дозі 2,5 мл/кг маси тіла двічі через день. UA 104688 U (12) UA 104688 U UA 104688 U 5 10 15 20 25 30 35 40 Корисна модель належить до експериментальної медицини і може бути використана при моделюванні гострого токсичного гепатиту з подальшим скринінгом та вивченням гепатопротекторної активності біологічно активних сполук. На теперішній час за даними ВООЗ у світі нараховується понад 2 млрд. людей із захворюванням печінки. Лише в Україні за останні 10 років кількість пацієнтів з даною патологією збільшилась майже на 20 % [1]. Печінка відіграє важливу роль в обміні речовин, процесах згортання крові, детоксикації, імунної відповіді. Печінка є «фабрикою», де відбувається біотрансформація хімічних сполук та біологічних компонентів, що, в свою чергу, сприяє ушкодженню самого органа [2]. При цьому в печінці зменшується кількість функціонально активних гепатоцитів, знижується активність ферментів, які беруть участь в реакціях детоксикації та інактивації токсичних речовин [3, 4]. В результаті накопичення токсичних агентів в організмі розвивається ендогенна інтоксикація. Враховуючи зазначене, проблема створення високоефективних засобів для лікування та профілактики захворювань органів гепатобіліарної системи вельми актуальна. Дослідження потенціальних гепатопротекторних властивостей перспективних біологічно активних сполук проводять в умовах експериментальних моделей патології печінки [5-9]. Для моделювання гепатитів використовують гепатотоксичні ксенобіотики з обов'язковим дотриманням умов щодо максимального відтворення патології, адекватної захворюванню печінки у людини. Як моделі гострого ураження печінки найчастіше використовують гостру жирову дистрофію печінки, яка розвивається після введення тетрахлорметану (ССl4). Інтоксикація тетрахлорметаном є класичною моделлю пошкодження субклітинних структур гепатоцитів. Токсична дія CCl4 пов'язана з утворенням в результаті метаболізму в печінці продуктів вільнорадикального окиснення, які є індукторами перекисного окиснення ліпідів, в результаті чого порушується структура і функції клітинних мембран гепатоцитів. Для відтворення гострого токсичного гепатиту ССl4 вводять щурам у вигляді 50 % олійного розчину у дозі 1 мл/100 г маси тіла внутрішньошлунково або 0,8 мл/100 г маси тіла підшкірно протягом двох діб [7]. За такої моделі після 24-48 годин після введення ССl4 у тварин розвивається картина порушення функціонального стану печінки, яку характеризують: підвищення активності маркерних ферментів цитолізу (аланін- та аспартатамінотрансфераз, лужної фосфатази, гамаглутамілтранспептідази), зниження вмісту глікогену в печінці, збільшення рівня проміжних і кінцевих продуктів перекисного окиснення ліпідів (дієнових кон'югатів, гідроперекисів, активних сполук, що реагують з тіобарбітуровою кислотою) тощо та морфологічні зміни в печінці у вигляді жирової інфільтрації, дегенерації та центробулярного некрозу. Але практичне використання такої моделі може призвести до загибелі тварин і зупинки експерименту. Задачею корисної моделі є пошук адекватних режимів введення гепатотоксину тетрахлорметану для відтворення гострого токсичного гепатиту у щурів. Поставлена задача вирішується тим, що для відтворення гострого токсичного ураження печінки тетрахлорметан у вигляді 50 % олійного розчину вводять щурам підшкірно в дозі 2,5 мл/кг маси тіла двічі через день. Технічний результат - удосконалення тетрахлорметаніндукованої моделі гострого гепатиту. В експериментах на 80 щурах було опрацьовано 5 моделей гострого тетрахлорметаніндукованого гепатиту за різних режимів введення гепатотоксину. Таблиця 1 Моделі гострого тетрахлорметаніндукованого гепатиту № п/п 1 2 3 4 5 Доза ССl4 2,5 мл/кг м. т. 2,5 мл/кг м. т. 2,5 мл/кг м. т. 4 мл/кг м. т. 8 мл/кг м. т. Шлях введення ССl4 перорально перорально підшкірно перорально підшкірно Режим введення ССl4 6 разів через день 4 рази через день 2 рази через день 2 рази через день одноразово 45 По закінченні експериментів щурів було знеживлено через 48 годин після останнього введення CCl4 та визначено деякі показники функціонального стану печінки (табл. 2). 1 UA 104688 U Таблиця 2 Деякі біохімічні показники функціонального стану печінки на тлі різних моделей гострого токсичного тетрахлорметаніндукованого гепатиту X  Sx  Показник β-ліпопротеїни, г/л Глікоген, мкг/100 мг тканини АлАТ, мккат/л АсАТ, мккат/л АлАТ, мккат/л АсАТ, мккат/л SH-групи, ммоль/л Лужна фосфатаза, нкат/л Гідроперекиси, печінка, мкмоль/л β-ліпопротеїни, г/л АлАТ, мккат/л АсАТ, мккат/л АлАТ, мккат/л АсАТ, мккат/л Загальні ліпіди, г/л Загальний холестерол, мкмоль/л n Інтакт Перша модель 8 0,67±0,07 8 2593,0±348,2 Друга модель 5 0,64±0,11 5 1,12±0,08 Третя модель 11 0,64 [0,48; 1,49] 10 0,63±0,07 8 0,125±0,008 8 11244,5±1071,2 4 27,02±1,53 8 0,67±0,07 Четверта модель 5 0,64±0,11 5 1,12±0,08 П'ята модель 4 1,54±0,12 4 1,74±0,04 4 2,95±0,27 4 2,35±0,15  n Гепатит 6 7 0,43±0,05 1) 549,0±146,7 5 5 2,38±0,02 1) 1,59±0,04 5 5 5 5 5 5 2,26±0,18 1) 1,99±0,32 0,053 ±0,004' 2) 14196,7±960,2 1) 12,0±0,3 1) 0,23±0,03 4 4 2,44±0,04 1) 2,099±0,05 6 8 8 8 3,670±0,007 2) 2,08±0,10 1) 5,49±0,59 2) 3,07±0,24 1) 1) 1) 1) 1) Примітки 1) 1. Відхилення значуще (р