Спосіб прогнозування коліешерихіозного ендотоксикозу з урахуванням генетичних чинників

Реферат: Спосіб прогнозування коліешерихіозного ендотоксикозу з урахуванням генетичних чинників включає визначення якісного і кількісного складу мікрофлори кишечнику. Додатково виконують визначення клітинної і загальної імунологічної реактивності, аналізують алельний стан генів HSP70-2 (rs1061581) та IL-4 (rs2243250), причому носіїв мутантного А-алеля гена HSP70-2 та ТТ-генотипу гена IL-4 відносять до груп із високою прогностичною цінністю позитивного результату зниження неспецифічної резистентності організму та появи коліешерихіозного ендотоксикозу, а носіїв сприятливого С-алеля гена IL-4 - до груп низького ризику імунологічних порушень та формування коліешерихіозного ендотоксикозу. UA 117583 U (12) UA 117583 U UA 117583 U 5 10 15 20 25 30 35 40 Корисна модель належить до галузі медицини, а саме інфекції, епідеміології та клінічної патологічної фізіології, і може бути використана з метою прогнозування появи, тяжкості перебігу та профілактики коліешерихіозного ендотоксикозу (гострого гастроентероколіту). Коліешерихіоз реєструється у всіх регіонах світу. Актуальною проблемою для України залишається проблема гострих кишкових інфекцій, а саме коліешерихіозів, рівень захворюваності якими в ряді міст і областей країни зберігає тенденцію до зростання. Захворюваність коліешерихіозами в основному має спорадичний характер, а останнім часом відзначається зростання кількості спалахів гострих кишкових захворювань та харчових отруєнь, викликаних гострими гастроентероколітами (ГГЕК) (Ю.І. Гринаш, О.Б. Надрага, М.Б. Дашо та ін., 2015). У багатьох країнах ешеріхіози (ГГЕК), викликані ентерогеморагічними Е. соlі, стали розглядатись як проблема державного рівня в системі охорони здоров'я населення. На жаль, в Україні відсутня інформація щодо даної патології. Проблема діагностики, прогнозування появи та тяжкості перебігу, лікування та специфічної профілактики захворювань, викликаних ешерихіями, є надзвичайно актуальною. Прототипом корисної моделі є спосіб прогнозування дисбіозу кишечнику з урахуванням поліморфізму генів хворих на артеріальну гіпертензію (Пат. 56844 Україна, МПК А61В 10/00. Спосіб прогнозування дисбіозу кишечнику з урахуванням поліморфізму генів / Кушнір О.В., Сидорчук Л.П.; Заявник Кушнір О.В., Сидорчук Л.П. - № заяви u201009323 від 26.07.2010; опубл. 25.01.2011, бюл. № 2), в якому прогнозування дисбіотичних змін проводиться на підставі результатів якісного і кількісного складу мікрофлори кишечнику та визначення поліморфізмів I/D гена АСЕ, А1166С гена AGTR1 та T894G гена eNOS. Недоліком прототипу-способу є недостатня ефективність діагностики і прогнозування, так як не враховується імунологічна складова дисбіотичних змін, а також не визначаються гени, що потенційно залучені до регуляції локальної та загальної імунологічної відповіді, а також специфічної і неспецифічної імунореактивності організму. В основу корисної моделі поставлена задача вдосконалити спосіб прогнозування коліешерихіозного ендотоксикозу з урахуванням генетичних чинників шляхом додаткового до визначення якісного і кількісного складу мікрофлори кишечнику, визначення клітинної і загальної імунологічної реактивності, аналізу алельного стану генів HSP70-2 (rs 1061581) та IL-4 (rs2243250), причому носіїв мутантного А-алеля гена HSP70-2 та ТТ-генотипу гена IL-4 відносять до груп із високою прогностичною цінністю позитивного результату зниження неспецифічної резистентності організму та появи коліешерихіозного ендотоксикозу, а носіїв сприятливого С-алеля гена IL-4 - до груп низького ризику імунологічних порушень та формування коліешерихіозного ендотоксикозу. Спільними ознаками корисної моделі та прототипу є визначення якісного і кількісного складу мікрофлори кишечнику. Відмінними ознаками корисної моделі від прототипу є те, що додатково визначають клітинну і загальну імунологічну реактивність, аналізують алельний стан генів HSP70-2 (rs 1061581) та IL4 (rs2243250), причому носіїв мутантного А-алеля гена HSP70-2 та ТТ-генотипу гена IL-4 відносять до груп із високою прогностичною цінністю позитивного результату зниження неспецифічної резистентності організму та появи коліешерихіозного ендотоксикозу, а носіїв сприятливого С-алеля гена IL-4 - до груп низького ризику імунологічних порушень та формування коліешерихіозного ендотоксикозу. Порівняння корисної моделі та прототипу за ознаками представлене у наступній таблиці. 45 1 UA 117583 U Таблиця Порівняння корисної моделі та прототипу за ознаками Ознака Визначення якісного і кількісного складу мікрофлори кишечнику Визначення клітинної та загальної імунологічної реактивності Дослідження поліморфізму генів Прогностична цінність позитивного результату Ефективність прогнозування 5 10 15 20 25 30 35 40 Прототип Корисна модель виконують виконують не виконують виконують гени, що асоціюють із активністю ренінангіотензинової системи: АСЕ (I/D), AGTR1 (А1166С), eNOS (T894G) гени, що асоціюють із активністю системи неспецифічного імунітету: HSP70-2 (A1267G), IL-4(C-590Т) нижча вища 75,0 % 88,57 % Визначення термінів, які використовуються при описі корисної моделі: коліешерихіозний ендотоксикоз, поліморфізм, гени, HSP70-2 (A1267G), IL-4 (С-590Т), імунологічна реактивність. Теоретичні передумови здійснення корисної моделі. Задачею було розробити спосіб прогнозування появи коліешерихіозного ендотоксикозу у людей залежно від індивідуального генотипу, при якому досягається підвищення прогностичної цінності на основі об'єктивних даних наявності "мутації" гена білка теплового шоку типу 2 (HSP70-2, A1267G) та протизапального цитокіну інтерлейкіну 4 (IL-4, C-590T), які приймають участь у синтезі відповідних білкових структур і опосередковано регулюють діяльність імунної системи. В запропонованому способі прогнозування як виникнення, так і прогресування коліешерихіозного ендотоксикозу проводиться з урахуванням результатів визначення клітинної і загальної імунологічної реактивності і алельного стану генів HSP70-2 (rs1061581) та IL-4 (rs2243250). Корисна модель здійснюється наступним чином. З метою прогнозування коліешерихіозного ендотоксикозу визначають якісний і кількісний склад мікрофлори кишечнику, та додатково визначають клітинну і загальну імунологічну реактивність, аналізують алельний стан генів HSP70-2 (rs1061581) та IL-4 (rs2243250), причому носіїв мутантного А-алеля гена HSP70-2 та ТТ-генотипу гена IL-4 відносять до груп із високою прогностичною цінністю позитивного результату зниження неспецифічної резистентності організму та появи коліешерихіозного ендотоксикозу, а носіїв сприятливого С-алеля гена IL-4 до груп низького ризику імунологічних порушень та формування коліешерихіозного ендотоксикозу. Приклад практичного застосування корисної моделі. У дослідженні взяли участь 100 хворих на гострий гастроентероколіт (ГГЕК), яким методом мікробіологічного дослідження було проведено визначення кількісного та якісного складу порожнинної мікрофлори кишечнику, визначення імунологічної реактивності, а також за допомогою полімеразної ланцюгової реакції було проведено генетичний аналіз. За результатами дослідження у 35 хворих на ГГЕК встановили наявність мутантного А-алеля гена HSP70-2 та ТТ-генотипу гена IL-4 у геномі, зі зростанням клітинної реактивності, що підтвердилось збільшенням ядерного індексу ступеня ендотоксикозу (ІІ-ІІІ ступеня) та ознаками запального процесу із екзо - та ендоінтоксикацією переважно інфекційної природи, вираженою активацією клітинної і гуморальної ланок імунітету. Окрім того, коліентерит у було підтверджено у всіх цих випадках якісним та кількісним складом мікрофлори порожнини товстої кишки: виділено монокультури Escherichia coli із наважки випорожнень - ентеропатогенних кишкових паличок у 42,86 % пацієнтів, ентеротоксигенних - у 30 %, ентероінвазивних - у 22,86 %, ентерогеморагічних - у 11,42 % хворих, чи поєднання двох і більше сероваріантів, що зумовило клінічно виражений синдром діареї із домішками слизу і вкраплень крові у калі, здуття живота, нетравлення їжі, інтоксикацію, субфебрилітет. Прогностична цінність позитивного результату появи ГГЕК серед вище вказаних хворих із урахуванням генотипів генів HSP70-2 (rs1061581) та IL-4 (rs2243250) становить 88,57 %. 2 UA 117583 U 5 У решти хворих (n=65) виявили G-алель гена HSP70-2 та С-алель гена IL-4, ступінь імунологічних порушень був менш виражений (переважно І-ІІ), у 84,62 % хворих даної групи ешерихіозна інфекція не підтвердилась. Технічний результат. Запропонований спосіб дозволяє ефективно прогнозувати виникнення та клінічний перебіг коліешерихіозного ендотоксикозу з урахуванням індивідуального генотипу, що надасть можливість вчасно проводити його профілактику та індивідуалізоване лікування. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 10 15 Спосіб прогнозування коліешерихіозного ендотоксикозу з урахуванням генетичних чинників, що включає визначення якісного і кількісного складу мікрофлори кишечнику, який відрізняється тим, що додатково виконують визначення клітинної і загальної імунологічної реактивності, аналізують алельний стан генів HSP70-2 (rs1061581) та IL-4 (rs2243250), причому носіїв мутантного А-алеля гена HSP70-2 та ТТ-генотипу гена IL-4 відносять до груп із високою прогностичною цінністю позитивного результату зниження неспецифічної резистентності організму та появи коліешерихіозного ендотоксикозу, а носіїв сприятливого С-алеля гена IL-4 до груп низького ризику імунологічних порушень та формування коліешерихіозного ендотоксикозу. 20 Комп’ютерна верстка О. Гергіль Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3