Спосіб покращення розслаблення гладеньких м’язів судин за рахунок відновлення рівнів синтезу сірководню при старінні

Реферат: Спосіб покращення розслаблення гладеньких м'язів судин за рахунок відновлення рівнів синтезу сірководню при старінні включає введення вітаміну. Як органічну хімічну сполуку (вітамін) використовують кофактор Н2S-синтезуючих ферментів піридоксаль-5-фосфат, пероральне введення якого у дозі 0,7 мг/кг впродовж 14 днів підвищує вміст сірководню і, як наслідок, збільшує розслаблення судин при старінні. UA 122865 U (12) UA 122865 U UA 122865 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, геронтології і кардіології і може бути використана для відновлення рівнів сірководню та корекції порушення ендотелійзалежного розслаблення судин при старінні. Старіння можна вважати сучасною пандемією. У Євросоюзі (ЄС) до 2060 року приблизно одна третина населення становитиме 65 років і старше [1], тоді як у США кожен 7 американець вже старше 65 років [2]. Серцево-судинні захворювання залишаються важливою причиною смертності у всьому світі. Однією з найбільш клінічно важливих змін, які сприяють збільшенню ризику серцево-судинних захворювань при старінні є розвиток судинної ендотеліальної дисфункції [3]. Дослідження в нашому відділі підтвердили ендотеліальну дисфункцію у старих щурів, виявлено порушення ендотелійзалежного Ацетилхолін(АХ)-індукованого розслаблення гладеньких м'язів (ГМ) аорти [4]. Крім того ми показали, що газові трансмітери оксид азоту і сірководень (H2S) відіграють велику роль в подоланні ендотеліальної дисфункції за умов старіння та артеріальної гіпертензії. Було встановлено зменшення рівнів H2S у тканинах судин і серця при старінні. Після введення донору сірководню спостерігалось суттєве покращення ендотелійзалежного розслаблення гладеньких м'язів аорти у старих щурів. [5]. Враховуючи центральну роль ендотеліальної дисфукції судин у розвитку клінічних коронарних, цереброваскулярних та периферичних артеріальних захворювань, пошук нових засобів, здатних відновлювати рівні сірководню і тим самим покращувати розслаблення судин при старінні, вважається важливою терапевтичною метою для зниження ризику захворюваності та смертності від серцево-судинних захворювань. Для збільшення ендотелійзалежного розслаблення судин використовуються деякі вітаміни та їх кофактори: альфа-токоферол, віт С, холекальциферол, кальцитріол, але тривалість застосування і доза в більшості випадків є великою, ефективність при застосуванні саме в умовах старіння суперечливою, а механізм впливу залишається до кінця невизначеним. Як прототип виступає використання холекальциферолу/вітаміну D3/, який регулює кальцієво-фосфорний обмін, має кардіо-, васкулопротекторні властивості і здатен, зокрема, покращувати ендотелійзалежне розслаблення гладеньких м'язів судин при старінні [6]. Даний спосіб використання холекальциферолу для покращення ендотелійзалежного розслаблення є найбільш близьким до запропонованої корисної моделі, тому що обидві сполуки є вітамінами, які використовувалися в експериментах in vivo і мали подібні ефекти, збільшували амплітуду АХ-індукованого розслаблення. Недоліком даного способу є введення підшкірно і довготривале введення впродовж 6 тижнів, відсутність стимуляції ендогенного синтезу сірководню. В основу корисної моделі поставлена задача відновити рівень сірководню та збільшити розслаблення судин при старінні. Поставлена задача вирішується тим, що спосіб покращення розслаблення гладеньких м'язів судин за рахунок відновлення рівнів синтезу сірководню при старінні, що включає введення вітаміну. Як органічні хімічні сполуки /вітаміну/ використовують кофактор Н2S-синтезуючих ферментів піридоксаль-5-фосфат, пероральне введення якого у дозі 0,7 мг/кг впродовж 14 днів підвищує вміст сірководню і, як наслідок, збільшує розслаблення судин при старінні. Технічним результатом корисної моделі є економічна вигода, ефективний вплив на розслаблення судин за рахунок стимуляції синтезу ендогенного сірководню при старінні. Приклад. Досліди проведено на дорослих (6 міс., 200-250 г) та старих (22-24 міс., 300-350г) самцяхщурах лінії Вістар, яких утримували на стандартному раціоні віварію. При дослідженні враховано Міжнародні принципи Європейської конвенції про захист тварин, які використовуються для експериментальних цілей (Страсбург, 1986). У цільних препаратах грудної аорти визначали вміст H2S. Для цього до аліквот проб додавали 0,5 мл 1 % розчину ацетату цинку, інкубували при 37,5 °C протягом 10 хв, далі додавали 0,5 мл 20 ммоль/л розчину N, N-DPD (диметил-п-фенілендіамін) та 0,5 мл 30 ммоль/л розчину FeC13. Після інкубації в темряві на холоді досліджували оптичну густину при λ=670 нм [7]. Реєстрацію скорочувальної активності м'язових препаратів грудної аорти проводили методом тензометрії. Для активації гладеньких м'язів (ГМ) аорти до перфузуючого розчину 5 Кребса додавали норадреналін (НА, 10~ моль/л, "Sigma", США). Розчин Кребса за своїм складом та концентрацією речовин є близьким до складу плазми крові і складався з (ммоль/л):№С1-133,0; NaHCO3-16,3; NaH2PO4-1,38; КСl-4,7; MgCl2-1,05; глюкози - 7,8; СаСl2-2,5; рН 7,4. Стійкий рівень НА-залежного скорочення ("плато") приймали за 100 %. Щодо нього проводили розрахунки зміни амплітуди ендотелійзалежних скорочувальних реакцій ГМ аорти на -5 аплікацію ацетилхоліну (АХ, 10 моль/л, "Sigma", США). Вплив модулятора ендогенного 1 UA 122865 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 сірководню вивчали за допомогою кофактора Н2S-синтезуючих ферментів — піридоксаль-5фосфату(П5Ф), який вводили per os старим щурам з розрахунку 0,7 мг/кг впродовж 14 діб. Блокування синтезу NO за дії П5Ф здійснювали введенням N-нітро-L-аргінін метилестергідрохлориду (L-NAME, "Sigma", США), внутрішньоочеревинно в концентрації 27 мг/кг за 30 хв. до декапітації. Наші дослідження показали, що рівень H2S у тканинах судин істотно зменшується з віком. Так, вміст H2S у аорті старих щурів виявився в 1,6 разу нижчим, ніж у дорослих щурів (див фіг.1). Введення П5Ф (кофактора H2S-синтезуючих ферментів) викликало достовірне підвищення вмісту H2S у 2,4 разу порівняно зі старими тваринами, (див фіг.1). На фіг.1 представлені пули H2S в тканинах аорти старих щурів за дії П5Ф, *Р