Біопрепарат для профілактики та лікування захворювань сільськогосподарських тварин на тлі порушень біоценозу кишечнику

1. Біопрепарат для профілактики та лікування захворювань сільськогосподарських тварин на тлі порушень біоценозу кишечнику, який містить композицію молочнокислих бактерій, біфідобактерій та поживне середовище, що включає автолізат, який відрізняється тим, що додатково містить дріжджі Sacchoromyces cerevisiae, композиція молочнокислих бактерій включає штами, а саме Lactobacillus casei, Lactococcus lactis, як біфідобак 3 ліпідів, викликаючи обезводнення і антиоксидантний стрес. Дисбактеріоз кишечнику замикає патогенетичний порочний круг, розірвати який необхідно як для успішної профілактики основного захворювання, так і для ліквідації його наслідків. У 50-х роках XX століття використання в кормах сільськогосподарських тварин антибіотиківстимуляторів росту привело до різкого збільшення продукції тваринництва за рахунок зниження захворюваності і поліпшення показників. Для людей використовують антибіотики у разі крайньої необхідності, для тварин їх іноді використовують постійно. Вони використовуються для прискорення росту, а також для контролю над захворюваннями, що виникають в умовах промислового тваринництва, де тварин містять в переповнених приміщеннях, а іноді і в антисанітарних умовах. Інтенсивна антибіотикотерапія прискорила темпи мінливості умовно-патогенних мікроорганізмів, підсилила генетичний обмін і швидкість формування клонів, що несуть плазміди лікарської стійкості і що нерідко включають гени, детермінуючі адгезивні, цитотоксичні і ентеротоксичні властивості умовнопатогенних бактерій, внаслідок чого були виведені штами мікроорганізмів, резистентних практично до всіх існуючих антибіотиків. У результаті створюються нові, могутніші препарати, а слідом за ними з'являються все більш стійкі бактерії. Але людині під силу частково «пригальмувати» подальшу еволюцію мікробів.. Наприклад, за рахунок введення жорсткого контролю використання антибіотиків - в першу чергу в тваринницькій галузі. Тому надмірне використання антибіотиків в тваринництві є однією з причин, чому часто основні препарати вже є неефективними або мало ефективними при лікуванні захворювань у людей. У 1997, 1998, 2003 роках ЄС прийняв розпорядження, які забороняли використовувати антибіотики-стимулятори росту для годування тварин і птиці. Вживання цих препаратів повинне було припинитися, починаючи з січня 2006 року. Дорадча рада комітету з мікробіологічної безпеки продуктів затверджує що: «Поліпшення умов утримовування тварин значно знизить необхідність у використанні антибіотиків» і що «антибіотики не повинні вживатися для компенсації поганих умов утримовування тварин». Зростання застосування антибіотиків при виробництві м'яса тварин пояснює також і зростання неприйнятності до ліків у світі. Споживання м'яса, що містить антибіотики приводить до резистентності мікрофлори у кишечнику людини до антибіотиків, тобто організм людини стає несприйнятливим до даних препаратів. В результаті різних захворювань набувають абсолютно нові форми. Особливо страждають від споживання м'яса з антибіотиками діти, організм яких не відрізняється високим рівнем імунної захищеності. Основні положення ЄС: • Постійне використання антибіотиків не з лікувальною метою для сільськогосподарських тварин не є необхідним, а тому і є неприйнятним. • Постійне використання антибіотиків представляє потенційну загрозу для здоров'я людей, оскі 57842 4 льки сприяє появі резистентних до антибіотиків бактерій. В даний час в багатьох країнах і, зокрема, в Україні розроблені і широко застосовуються способи профілактики та лікування бактерійних хвороб і поліпшення мікробіоценозу організму тварин за допомогою пробіотиків - ПАБК, СБА, ацидофілія, біфідум, бактисуптил, колибактерин, біоспорин та ін. Тому запропоновану тему потрібно планувати доцільно, оскільки вона має новизну і актуальність. Ці препарати більшою чи меншою мірою сприяють стабілізації кишкової мікрофлори тварин, пригнічують дію патогенної та умовнопатогенної мікрофлори. Недоліком вищезгаданих препаратів є порівняно невелика кількість живих клітин молочнокислих бактерій, слабка їх приживаність в кишечнику і зникнення кліток після закінчення прийому препаратів, низька фенолостійкість мікроорганізмів і низька адгезивність, тривалий курс лікування. Так, запропоновано придатний для лікування свійських тварин пробіотик за способом одержання препарату для профілактики та лікування шлунково-кишкових захворювань тварин що передбачає культивування ентерококів виду Euterococcus faeclum і молочнокислих бактерій в поживному середовищі, що включає ферментативний гідролизат кормових дріжджів, з виду Euterococcus faeclum використовують штам Euterococcus faeclum ВКПМ В-2579, з молочнокислих бактерій - штам Lactobacillus sallvarius ВКПМ В-2581, при культивуванні штаму Lactobacillus sallvarius ВКПМ В-2581 встановлюють pH поживного середовища 5,7-6,1, а після сушки культури штамів Euterococcus faeclum ВКПМ В-2579 і Lactobacillus sallvarius ВКПМ В2581 змішують в співвідношенні 7-9 : 1-3 по вазі відповідно (див. Пат. Укр. № 764, МПКА61 К35/66, 15.04.93). Проте, недоліком вищезгаданого біопрепарату є слабка приживаність молочнокислих бактерій в кишечнику за рахунок високого рівня pH препарату і зникнення кліток після закінчення прийому препарату, що знижує ефективність профілактики та лікування. Найбільш близьким до заявленої моделі є спосіб отримання бактерійного препарату (див. Патент України на корисну модель № 68657А, МІЖ А61 До 35/66, 2003), що є прототипом, в якому міститься велика кількість різних груп мікроорганізмів: лактобацили, лактококки, стрептококи, біфідобактерии, пропіоновокислі бактерії, а як поживне середовище виступає автолізат суміші грибків кефірів і «чайного» гриба, пивних дріжджів. Недоліком прототипу є складність технології виробництва біопрепарату, тривалість отримання готового продукту, використання такої великої кількості штамів приводить до подорожчання продукту. До того ж, використовувані штами не є спирто - і фенолостійкими, що не дозволяє їм приживатися у кишечнику тварини на тривалий термін, курс лікування тривалий. Ефективність від використання даного препарату має місце тільки під час його прийому і невеликий період часу після закінчення бактеріотерапії, закріплення результату на трива 5 лий період часу не відбувається, що різко знижує ефективність профілактики та лікування захворювань. Завданням корисної моделі, що заявляється, є створення біопрепарату з високими показниками, тобто підвищити ефективність профілактики та лікування інфекційних захворювань сільськогосподарських тварин на тлі порушень біоценозу кишечнику. Поставлене завдання вирішено створенням нового ефективного для профілактики та лікування захворювань сільськогосподарських тварин біопрепарату, який містить композицію молочнокислих бактерій, біфідобактерій та поживне середовище, що включає автолізат, згідно пропонованої корисної моделі він додатково містить дріжджі Sacchoromyces cerevisiae, композиція молочнокислих бактерій включає штами, а саме Lactobacillus casei, Lactococcus lactis, як біфідобактерії до композиції введено біомасу Bifidobacterium bifidum та Bifidobacterium longitm, а поживне середовище містить макроелементи, препарат «Мікровіт», джерело вуглеводів та розчин солей для підтримки низького окислювально-відновлювального потенціалу, як автолізат використовується дріжджовий автолізат. Згідно корисної моделі до складу поживного середовища, як джерело вуглеводів введено кукурудзяну патоку. Згідно корисної моделі до складу поживного середовища, як розчин солей для підтримки низького окислювальновідновлювального потенціалу введено аскорбінову кислоту, сульфіт кальцію, солянокислий цистеїн, сульфіт натрію та тіогліколат натрію. Між сукупністю суттєвих ознак корисної моделі і технічним результатом, що досягається, є такий причинно-наслідковий зв'язок: За рахунок змішування в рідкому середовищі штамів мікроорганизмів молочнокислих бактерій, а саме Lactobacillus casei, Lactococcus lactis, дріжджів Sacchoromyces cerevisiae, біомас Bifidobacterium fongura, Bifidobacterium bifidum, поживного середовища, що містить макроелементи, препарат «Мікровіт», дріжджовий автолізат, джерело вуглеводів, розчин солей для підтримки низького окислювальновідновлювального потенціалу та використання отриманого препарату досягається підвищення ефективності профілактики та лікування захворювань сільськогосподарських тварин на тлі порушень біоценозу кишечнику. Приклад приготування заявленого біопрепарату. Отримання біопрепарату, що заявляється, здійснюють шляхом змішування двох монокультур молочнокислих мікроорганізмів, дріжджів, двох біфідобактерій, поживного середовищу, що містить макроелементи, препарат «Мікровіт», дріжджовий автолізат, джерело вуглеводів та розчин солей для підтримки низького окислювальновідновлювального потенціалу в певному співвідношенні. Приготування суспензії мікробних культур, що входять в біопрепарат, здійснюється роздільним культивуванням кожного штаму окремо. При отриманні пробіотику для культивування мікроорганізмів, що входять в біопрепарат, поживне середовище збагачують. Приклад конкретного виконання корисної моделі 57842 6 Для проведення експерименту і порівняльного аналізу сформовано три групи однакової породи, віку поросят і в однаковій кількості з одним захворюванням - кишковий дисбактеріоз. У експерименті було використано 450 голів м'ясної породи. Спосіб утримовування - підлоговий. У контрольній групі використовували антибіотикотерапію, в дослідній групі № 1 застосовувався біопрепарат за прототипом, в дослідній групі № 2 використовували біопрепарат, що заявляється, під комерційним найменуванням «ЭМПРОБИО-Ж». Препарати додавали в добову норму води для пиття. Експеримент продовжувався 10 днів. Середньодобовий приріст маси тіла в контрольній групі склав 288 грамів, в дослідній групі № 1 - 252 грама, а в дослідній групі № 2 склав 327 грамів, тобто на 7,7 % вище; загальна жива маса поросят в групі № 2, відповідно більше на 49,5 кг в добу. Якщо порівняти збереження поголів'я у варіанті з використанням ЭМПРОБИО-Ж, то вона на 9,73 % більше, ніж в досвідченій групі № 1. На 10-й день проведено лабораторні дослідження. В групі № 1 є позитивні показники, але нормалізувати кишковий мікробіоценоз ще не вдалося. За допомогою біопрепарату «ЭМПРОБИО-Ж» вдалось нормалізувати кишковий мікробіоценоз, а саме, досягнуто домінування біфідобактерій і лактобацил, кількість протея доведено до 0. Лабораторні дослідження показали підвищену спирто - і фенолостійкість препарату (фенолостійкість даної асоціації мікроорганизмів ставить 0,40,5 %), що дозволило живим клітинам прижитися в кишечнику тварини на тривалий термін і продовжувати функціонувати навіть після закінчення прийому препарату. Асоціація мікроорганізмів, що знаходиться в заявленому біопрепараті нормально функціонує при рН=3,0-3,5, що дозволило мікробам пройти через верхні розділи шлунковокишкового тракту і досягнути кишечнику в кількості достатньої для досягнення терапевтичного ефекту, а також покращує засвоєння заліза, кальцію і інших мікроелементів, нормалізує рівень гемоглобіну і обмінні процеси в організмі, підвищує стійкість організму до інфекційних, токсичних і інших агентів, володіє адаптогенним ефектом (зняття стресів при скупченому утримовуванні, підвищеній температурі, при переході на інші раціони кормів). Механізм дії пробіотиків на відміну від антибіотиків направлений не на знищення, а на конкурентне виключення умовно-патогенних бактерій з складу кишкового мікрофлори, щоб запобігти посиленню і передачі чинників вірулентності в популяції умовно-патогенних бактерій. Приклад 1 (таблиця 1) Для проведення експерименту і порівняльного аналізу сформовано дві групи однакової породи і віку телят в кількості - 400 одиниць. По 200 одиниць на групу. Дослідну групу № 1 годували препаратом за прототипом, а дослідну групу № 2 годували за заявленим біопрепаратом. Препарати додавали в добову норму води для пиття. Схема годування телят стандартна, така, що включає молоко, ЗЦМ, а також сіно, силос і сінаж. Антибіотики не застосовувалися. Оцінка ефективності препарату проводилася за показниками нарощу 7 57842 вання живої маси, імунологічних, біохімічних, морфологічних змінах в крові, а також захворюваності і збереженні тварин. Проведені імунологічні дослідження крові триразово протягом всього досвіду показали, що використання пробіотичного препарату «ЭМПРОБИО-Ж» стимулює імунітет у телят. У тварин з пониженою активністю внутріклітинних антибактеріальних систем (понижена фун 8 кціональна активність нейтрофільних гранулоцитів) застосування препарату підвищує резерв захищеності від інфекції. У телят групи № 1 були шлунково-кишкові розлади аліментарної природи, тоді як в дослідній групі № 2, отримуючою «ЭМПРОБИО-Ж» таких випадків відмічено не було. Збереження телят 100%. Таблиця 1 Вік телят Кількість препарату, що вживається, на 1 голову (мл) 1-2 місяці 2-3 місяці 3-4 місяці 4-5 місяців Середньодобовий приріст (г) Група № 1 Група № 2 452 537 531 904 830 940 937 992 674 831 5 10 20 20 середнє Приклад 2 Вивчення впливу препарату «ЭМПРОБИО-Ж» на молочну продуктивність корів. Сформовано дві однакові за кількістю групи тварин знаходилися в однакових умовах годування і утримування. Коровам дослідної групи щодня в питті вводили препарат «ЭМПРОБИО-Ж» з розрахунку 50 мл на голову. Тривалість досвіду склала 1 місяць. За 30 днів % контролю 18,8 70,3 13,1 6,2 23,1 лактації від корів дослідної групи було отримано на 2061 кг (20,6 %) молока більше в порівнянні з контрольною групою. Середньодобовий надій молока у корів досвідченої групи був вищий в порівнянні з контролем на 68,7 кг (20,4 %) або середньодобовий удій на 1 корову збільшився на 2,3 кг (табл. 2). Таблиця 2 Група Надій за 30 днів, кг Надбавка до плану надою Середньодобовий надій, кг Надбавка до плану надою контрольна дослідна 10089 12150 2061 336,3 405,0 68,7 Так само препарат «ЭМПРОБИО-Ж» позитивно вплинув на якісні показники молока. Аналіз хімічного складу молока показав: жирність молока в групі № 1 залишилася також, в дослідній - збільшилася на 0,1 %, кількості білка в групі № 1 збільшилася на 0,01 %, в досвіді - на 0,08 %, кількість казеїну збільшилася в групі № 1 на 0,01 %, в досвіді - на 0,23 %, сироваткові білки збільшилися з 0,01 % до 0,06 %, цукор збільшився з 0,03 % до 0,2 %, кальцій і фосфор в дослідній групі перевищували аналогічні показники від тварин з групі № 1 відповідно з 0,44 % до 2,29 % і 0,52 % до 2,49 %. Таким чином, застосування препарата «ЭМПРОБИО-Ж» сприяє збільшенню продуктивності молока у корів. Таким чином включення заявленого біопрепарату в технологію вирощування молодняку - найбільш сучасний спосіб профілактики шлункових хвороб, заснований на екологічно безпечних механізмах підтримки високого рівня резистентності колонізації кишечнику. Практика довела, що пробіотики попереджають ризик контамінації кишечнику теплокровних тварин умовно-патогенними бактеріями і знижують частоту їх виділення з органів тварин при забої. Біопрепарат, що заявляється на відміну від антибіотиків не викликає звикання з боку умовно Середньодобовий надій від 1 голови в день 11,2 13,5 патогенних мікроорганізмів. Продукти життєдіяльності бактерій-пробіотів не накопичуються в органах і тканинах тварин і не впливають на товарну якість твариницької продукції. Пробіотики безпечні для навколишнього середовища і обслуговуючого персоналу. Численні досвіди показують, що включення пробіотиків в систему вирощування молодняку тварин знижує захворюваність шлунковокишковими хворобами, скорочує тривалість вирощування, знижує витрати кормів, підвищує збереження поголів'я, дозволяє відмовитися від профілактичної антібіотикотерапії. Пробіотіки покращують забійні і м'ясні якості молодняку свиней і телят. Отримані результати: зменшено тривалість курсу профілактики та лікування дисбактеріозу не менш, як на 1 тиждень. Середньодобовий приріст маси тіла поросят в дослідній групі № 2, що отримувала біопрепарат «ЭМПРОБИО-Ж», склав 327 г, що на 7,7 % вище, ніж в групі № 1, збереження поголів'я в дослідній групі вище на 9,73 %. Таким чином, одержані дані дозволяють рахувати, що заявлений біопрепарат для профілактики та лікування захворювань сільськогосподарських тварин на тлі порушень біоценозу кішечнику, виявляє чітко виражений позитивний вплив як на 9 57842 клінічні показники, так і на лабораторні (імунологічні та біохімічні) показники. Біопрепарат добре переноситься тваринами, не викликає ніяких небажаних побічних реакцій, у тому числі алергічних, прискорює досягнення клініко-лабораторної ремісії та сприяє зменшенню частоти виникнення повторних захворювань, а також сприяє спрощенню технології виробництва біопрепарата, зниженню тривалості отримання готового продукту і його собівартості, а також скороченню курсу профілактики і лікування, і закріплення ефекту результатів бактеріотерапії на тривалий період часу. Що у свою чергу повинне підвищити адаптацію тварин до умов утримовування, що змінюються, режиму харчування, складу комбікормів. Комп’ютерна верстка Д. Шеверун 10 Запропонований біопрепарат для профілактики та лікування захворювань на тлі порушень біоценозу кишечнику у тварин згідно корисної моделі може знайти широке використання, перш за все в тваринництві на державному рівні, а також в усіх приватних відділеннях вирощування сільськогосподарських тварин, наприклад, на фермах овець, корів, свиней, коней та інше. Нині автори цієї корисної моделі мають намір скласти договір з приватною фермою КРХ сел. Скворцово Сімферопольського району на практичне використання заявленого біопрепарату для профілактики на дисбактеріоз телят вже у жовтні 2010 року. Підписне Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601