Спосіб оцінки якості компонента консервованої донорської крові – тромбоцитів за параметром кількість клітин тромбоцитів

Спосіб оцінки якості компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів за параметром кількості клітин тромбоцитів шляхом їх підрахунку, який відрізняється тим, що кількість клітин тромбоцитів підраховують в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах, враховуючи об'єм лічильної камери Горяєва, ступінь розведення зразка та об'єм дози компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів за формулою: 2 (19) 1 3 способу є відсутність реєстрації камери Nageotte в Україні. Задачею корисної моделі є контроль якості компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів. Це досягається шляхом підрахунку кількості клітин тромбоцитів в дозі гемосередовища за допомогою камери Горяєва (10). Для оцінки якості компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів за параметром кількість клітин тромбоцитів необхідно: I. Після повної дезагрегації компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів, незалежно від методу їх одержання, необхідно якісно відібрати зразок гемосередовища, дотримуючись наступних вимог: - використовувати для відбору зразка з'єднувальні трубки полімерних плазмоконтейнерів довжиною 10-20 см; - перед відбором зразка ретельно перемішати тромбоцити в контейнері для досягнення їх однорідності; - залишок полімерної трубки заповнювати досліджуваним середовищем не менше чотирьох разів; - для герметизації лабораторного зразка використовувати високочастотний запаювач полімерних трубок; - до відокремлення від контейнера зразок паспортизувати етикеткою, ідентичною до етикетки досліджуваного гемосередовища; - паспортизований зразок супроводжувати направленням. II. Хід виконання: 1) В суху пластикову пробірку відміряти 4,0 мл 0,9 % розчину натрій хлориду. 2) Додати 0,02 мл ретельно перемішаного зразка компонента консервованої донорської крові тромбоцитів. 3) Піпетку промити в верхньому шарі рідини, вміст пробірки ретельно перемішати пластиковою паличкою. 4) Заповнити лічильну камеру Горяєва та лишити в горизонтальному положенні на 1 хвилину при кімнатній температурі. 5) Рахувати кількість клітин тромбоцитів у 5 великих квадратах (80 малих). 6) Провести розрахунок кількості клітин тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах за формулою:    4000  200    10000 , 80 де: X - кількість клітин тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах;  - кількість підрахованих клітин тромбоцитів; 200 - коефіцієнт розведення зразка гемосередовища; 1/4000 - об'єм малого квадрата камери Горяєва, мкл; 80 - кількість малих квадратів. Практично число підрахованих клітин тромбоцитів множать на 10000. Після чого, кількість клітин тромбоцитів в дозі компонента консервованої 64803 4 донорської крові - тромбоцитах розраховують за формулою: В=Х  1000  n, де: В - кількість клітин тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; X - кількість клітин тромбоцитів в 1 мкл дози компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; 1000 - коефіцієнт для переведення, мл; n - об'єм дози компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів, мл. Нормативний показник кількості клітин тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах залежить від методу отримання: - при використанні методу трикратного пере. 9 ривчастого аферезу - не менше 180 10 ; - при використанні методу апаратного аферезу . 9 - не менше 200 10 ; - з окремої дози консервованої крові - не мен. 9 ше 60 10 . Суть корисної моделі характеризується конкретними прикладами виконання Приклад №1 Компонент консервованої донорської крові тромбоцити отримані методом переривчастого (трикратного) аферезу, об'єм дози становить 150 мл. В камері Горяєва підраховано 120 клітин тромбоцитів. Підраховуємо кількість клітин тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові тромбоцитах за формулою:    4000  200    10000 , 80 де: X - кількість клітин тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; α - кількість підрахованих клітин тромбоцитів; 200 - коефіцієнт розведення зразка гемосередовища; 1/4000 - об'єм малого квадрата камери Горяєва, мкл; 80 - кількість малих квадратів; 6 Х=120  10000=1,2  10 /мкл. Підраховуємо кількість клітин тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові тромбоцитах за формулою: B=Х  1000  n , де: В - кількість клітин тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; X - кількість клітин тромбоцитів в 1 мкл дози компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; 1000 - коефіцієнт для переведення, мл; n - об'єм дози компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів, мл; 9 В=1200000  1000  150=180  10 . Висновок: кількість тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах, отриманих методом переривчастого (трикрат9 ного) аферезу, становить 180  10 , що відповідає вимогам наказу МОЗ України від 09.03.2010р. № 211 «Про затвердження Порядку контролю за до 5 триманням показників безпеки та якості донорської крові та її компонентів». Приклад №2 Компонент консервованої донорської крові тромбоцити отримані методом переривчастого (трикратного) аферезу, об'єм дози становить 150мл. В камері Горяєва підраховано 90 клітин тромбоцитів. Підраховуємо кількість клітин тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові тромбоцитах за формулою:    4000  200    10000 , 80 де: X - кількість тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; α - кількість підрахованих клітин тромбоцитів; 200 - коефіцієнт розведення зразка гемосередовища; 1/4000 - об'єм малого квадрата камери Горяєва, мкл; 80 - кількість малих квадратів; 6 Х=90  10000=0,9  10 /мкл. Підраховуємо кількість тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах за формулою: В=Х  1000  n, де: В - кількість тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; X - число тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові -тромбоцитах; 1000 - коефіцієнт для переведення, мл; n - об'єм дози компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів, мл; 9 В=900000  1000  150=135  10 . Висновок: кількість тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах, отриманих методом переривчастого (трикрат9 ного) аферезу, становить 135  10 , що не відповідає вимогам наказу МОЗ України від 09.03.2010р. № 211 «Про затвердження Порядку контролю за дотриманням показників безпеки та якості донорської крові та її компонентів». Приклад №3 Компонент консервованої донорської крові тромбоцити отриманий методом апаратного аферезу, об'єм дози становить 300 мл. В камері Горяєва підраховано 190 клітин тромбоцитів. Підраховуємо кількість клітин тромбоцитів в 1мкл компонента консервованої донорської крові тромбоцитах за формулою:   4000  200     10000 , 80 де: X - кількість тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; α - кількість підрахованих клітин тромбоцитів; 200 - коефіцієнт розведення зразка гемосередовища; 1/4000 - об'єм малого квадрата камери Горяєва, мкл; 80 - кількість малих квадратів; 6 Х=190  10000=1,9  10 /мкл. Підраховуємо кількість клітин тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові тромбоцитах за формулою: 64803 6 В=Х  1000  n, де: В - кількість тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; X - число тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; 1000 - коефіцієнт для переведення, мл; n - об'єм дози компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів, мл; 9 В=1900000  1000  300=570  10 . Висновок: кількість тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах, отриманих методом апаратного аферезу, становить 760  10, що відповідає вимогам наказу МОЗ України від 09.03.2010р. № 211 «Про затвердження Порядку контролю за дотриманням показників безпеки та якості донорської крові та її компонентів». Приклад №4 Компонент консервованої донорської крові тромбоцити отриманий методом апаратного аферезу, об'єм дози становить 400 мл. В камері Горяєва підраховано 65 клітин тромбоцитів. Підраховуємо кількість клітин тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові тромбоцитах за формулою:    4000  200    10000 , 80 де: X - кількість тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; α - кількість підрахованих клітин тромбоцитів; 200 - коефіцієнт розведення зразка гемосередовища; 1/4000 - об'єм малого квадрата камери Горєва, мкл; 80 - кількість малих квадратів; 6 Х=60х10000= 0,60х10 /мкл. Підраховуємо кількість тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах за формулою: В=Х  1000  n, де: В - кількість клітин тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; X - число тромбоцитів в 1 мкл дози компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; 1000 - коефіцієнт для переведення в мл; n - об'єм дози компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів, мл; 9 В=600000  1000  300=180  10 . Висновок: кількість тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах, отриманого методом апаратного аферезу, 9 становить 180  10 , що не відповідає вимогам наказу МОЗ України від 09.03.2010р. № 211 «Про затвердження Порядку контролю за дотриманням показників безпеки та якості донорської крові та її компонентів». Приклад №5 Компонент консервованої донорської крові тромбоцити заготовлений з окремої дози консервованої крові, об'єм дози становить 50мл. В камері Горяєва підраховано 120 клітин тромбоцитів. Підраховуємо кількість тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах за формулою: 7    4000  200    10000 , 80 де: X - кількість тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; α - кількість підрахованих клітин тромбоцитів; 200 - коефіцієнт розведення зразка гемосередовища; 1/4000 - об'єм малого квадрата камери Горяєва, мкл; 80 - кількість малих квадратів; 6 Х=120  10000=1,2  10 /мкл. Підраховуємо кількість тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах за формулою: В=Х  1000  n, де: В - кількість клітин тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; X - число тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; 1000 коефіцієнт для переведення, мл; n - об'єм дози компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів, мл; 9 В=1200000  1000  50=60  10 . Висновок: кількість клітин тромбоцитів в дозі компоненту консервованої донорської крові - тромбоцитах, заготовленого з окремої дози консерво9 ваної крові, становить 60  10 , що відповідає вимогам наказу МОЗ України від 09.03.2010р. № 211 «Про затвердження Порядку контролю за дотриманням показників безпеки та якості донорської крові та її компонентів». Приклад №6 Компонент консервованої донорської крові тромбоцити заготовлений з окремої дози консервованої крові, об'єм дози становить 50 мл. В камері Горяєва підраховано 80 тромбоцитів. Підраховуємо кількість тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах:    4000  200    10000 , 80 де: X - кількість тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; α - кількість підрахованих клітин тромбоцитів; 200 - коефіцієнт розведення зразка гемосередовища; 1/4000 - об'єм малого квадрата камери Горяєва, мкл; 80 - кількість малих квадратів; 6 Х=80  10000=0,8  10 /мкл. Підраховуємо кількість тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах за формулою: В=Х  1000  n, де: В - кількість клітин тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; X - число тромбоцитів в 1 мкл компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах; 1000 - коефіцієнт для переведення, мл; n - об'єм дози компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів, мл; 9 В=800000  1000  50=40  10 . 64803 8 Висновок: кількість клітин тромбоцитів в дозі компонента консервованої донорської крові - тромбоцитах, заготовленого з окремої дози консерво9 ваної крові, становить 40  10 , що не відповідає вимогам наказу МОЗ України від 09.03.2010р. № 211 «Про затвердження Порядку контролю за дотриманням показників безпеки та якості донорської крові та її компонентів». Таким чином, запропонований спосіб оцінки якості компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів за параметром кількість клітин тромбоцитів, заготовлених різними методами: переривчастого (трикратного) аферезу; апаратного аферезу; з окремої дози консервованої донорської крові доступний для використання в усіх закладах служби крові України. Спосіб дає можливість оцінити якість компонента консервованої донорської крові - тромбоцитів і не потребує значних матеріальних витрат. Список використаних джерел 1. Закон України "Про Загальнодержавну програму адаптації законодавства України до законодавства Європейського Союзу" від 18.03.2004 р. №1629-1V // Відомості Верховної Ради. - 2004. №29. - 367 с. 2. Наказ МОЗ України від 09.03.2010р. № 211 «Про затвердження Порядку контролю за дотриманням показників безпеки та якості донорської крові та її компонентів». 3. Директива Комісії 2005 / 62 / РЄ від 30 вересня 2005 р. 4. «Інструкція з фракціонування донорської крові на її компоненти (плазма, еритроцити, тромбоцити, лейкоцити) та їх консервування», наказ МОЗ України від 05.07.99р. №164. 5. Жибурт Є.Б. Стандарти качества в службе крови / Є.Б. Жибурт. - М.: НПЦ ИНТЕЛФОРУМ, 2005р. - С.49-59. 6. «Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components», 5th edition, Council of Europe, 1999р., С.103-109. 7. «Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components», 1 lth edition, Council of Europe, 2005р., С.121-127. 8. Керівництво з приготування, використання та забезпечення якості компонентів крові. Рекомендація № R (95)15.- 11-те видання: Практич. посіб.: Переклад з англ. / За заг. ред. к.м.н. В.П. Івасюка, проф. В.Л. Новака, проф. СМ. Гайдукової, проф. СВ. Видиборця. - Київ -Дніпропетровськ: АРТПРЕС, 2006. -С. 120-131. 9. Magdaleny Letowskiej „Medyczne zasady pobierania krowi, oddzielania jej skladnikow і wydawania, obowiajzujace w jednostkach organizacyjnych publicznej sluzby krwi", Warszawa, 2006, p. - 298 c. (польська) 10. Перфильева Е.А. Совершенствование метода подсчета клеток в компонентах крови / Перфильева Е.А., Плесская Л.Г., Фокина Т.В. / Гематология и трансфузиология - М. : Медицина, 2003. - № 2. - С. 44-46. 9 Комп’ютерна верстка Д. Шеверун 64803 Підписне 10 Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601