Спосіб оцінки стану вільнорадикальних процесів та ендогенної інтоксикації в гострому періоді первинного та повторного ішемічного інсульту

Спосіб оцінки стану вільнорадикальних процесів та ступеня ендогенної інтоксикації в гострому періоді первинного та повторного ішемічного інсу 3 картину ушкоджуючої дії АФК на білкові макромолекули. Все це призводить до втрати білками їх біологічної активності та пошкодження обмінних процесів [5]. Окрім того, ОМБ призводить до підвищення подальшого протеолізу білків, які в сучасній літературі називаються молекулами середньої маси (МСМ). Вони впливають на життєдіяльність всіх систем і органів, тому що за своєю будовою близькі до регуляторних пептидів. МСМ здатні з'єднуватись і блокувати рецептори будь-якої клітини, неадекватно впливаючи на її метаболізм і функції. Відомий спосіб оцінки тяжкості перебігу ішемічного інсульту [6], який включає визначення ступеня неврологічного дефіциту за клінікоінструментальними показниками. У прототипі попередньо додатково виконують індуковану біохемілюмінісценцію сироватки крові, а тяжкість перебігу інсульту оцінюють за узагальненим індексом вільнорадикального окислення (ІБХЛ) з використанням формули ІБХЛ=(АБХЛ-Т50/V), де АБХЛ максимальна амплітуда спалахів індукованої хемолюмінесценції, Т50 - тривалість періоду напівзатухання хемілюмінесценції (с), V - швидкість індукованої хемілюмінесценції сироватки крові (спалахів/с), IN - референтне значення показника хемілюмінесценції. Цей спосіб дозволяє підвищити точність оцінки тяжкості перебігу ішемічного інсульту, враховуючи ранні, специфічні для цього захворювання показники перекисного окислення ліпідів та оксидантноантиоксидантної системи, які є інформативними стосовно метаболічних порушень. Однак, критерії, що враховуються, а також узагальнений кількісний показник вільнорадикального окислення, адаптовані для оцінки тяжкості перебігу ішемічного інсульту на початкових стадіях захворювання. Окрім того, спосіб не враховує, що одним із ранніх і найбільш надійних індикаторів ураження тканин при вільнорадикальній патології є окисна модифікація білків. В основу корисної моделі поставлена задача забезпечити підвищення ефективності діагностики стану вільнорадикальних процесів та ступеня ендогенної інтоксикації в гострому періоді первинного та повторного ішемічного інсульту, що надасть можливість більш точно прогнозувати перебіг, наслідки захворювання та диференційовано підійти до патогенетичного лікування ішемічних інсультів з врахуванням глибини метаболічних порушень. Поставлена задача вирішується тим, що у способі оцінки стану вільнорадикальних процесів та ступеня ендогенної інтоксикації в гострому періоді первинного та повторного ішемічного інсульту, що включає визначення показників перекисного окислення ліпідів, згідно з корисною моделлю, додатково в сироватці крові визначають рівень продуктів окисної модифікації білків та концентрацію молекул середньої маси в динаміці гострого періоду на 1-3-ю, 7-10-у та 18-21-у добу і, якщо рівень утворення альдегідних і кетонових похідних 2,4динітрофенілгідразону та концентрація молекул середньої маси перевищують контрольні значення, діагностують інтенсифікацію вільнорадикальних процесів з розвитком ендогенної інтоксикації. 65309 4 Відмінними особливостями способу, що заявляється, є спрямованість на діагностику стану вільнорадикальних процесів та ендогенної інтоксикації в гострому періоді первинного та повторного ішемічного інсульту з визначенням в сироватці крові продуктів окисної модифікації білків та молекул середньої маси, оскільки при ряді патологічних станів саме білки, а не ліпіди або нуклеїнові кислоти, є ефективними пастками для генерованих активних форм кисню і їх окисна модифікація розглядається як один з ранніх і надійних маркерів оксидантного стресу [7]. Вважається, що білки плазматичних мембран більш чутливі до дії активованих метаболітів кисню, ніж ліпіди, а об'єм вільнорадикального пошкодження білків за деяких патологічних станів може сягати 50-70 % від кількості клітинного білка [8]. Продукти ж окислення білків при окислювальних пошкодженнях в тканинах з'являються раніше і є більш стабільні в порівнянні з продуктами ПОЛ, зокрема, білки плазми, які зазнали окислювальної деструкції, мають досить великий період напіврозпаду. У подальшому продукти ОМБ стимулюють ПОЛ, окислювальне пошкодження ДНК, порушення ферментативних процесів в організмі, порушення функціонування іонних каналів і рецепторів клітин, крім того, їм самим властива виражена цитотоксична дія [9]. Збільшення концентрації молекул середньої маси в біологічних рідинах спостерігається при патологічних станах, що супроводжуються ендогенною інтоксикацією і є основним біохімічним маркером, що відображає рівень патологічного білкового метаболізму [10]. Спосіб здійснюють таким чином. Забір крові для дослідження проводять з ліктьової вени натще. Окисну модифікацію білків сироватки крові визначають спектрофотометричним методом в модифікації Е.Е. Дубініної [11]. Оптичну густину утворених 2,4-динітрофенілгідразонів реєструють на спектрофотометрі СФ-46 при таких довжинах хвиль: 356 і 370 нм (альдегідні і кетонні продукти ОМБ нейтрального характеру (АФГНх і КФГНх)), 430 і 530 нм (альдегідні і кетонні продукти ОМБ основного характеру (АФГОх і КФГОх)). Ступінь ОМБ виражають в одиницях оптичної густини на 1 мл біологічного матеріалу (о.г./мл). Вміст МСМ в крові визначають скринінговим методом, запропонованим Н.І. Габріелян та В.І. Ліпатовою [12]. Показники ПОЛ вивчають спектрофотометричним методом [13]. Для кількісної оцінки одержаних результатів використовують величину оптичної густини (ум. од.). В сироватці крові хворих визначають рівень продуктів окисної модифікації білків та концентрацію молекул середньої маси в динаміці гострого періоду на 1-3-ю, 7-10-у та 1821-у добу і, якщо рівень утворення альдегідних і кетонових похідних 2,4-динітрофенілгідразону та концентрація молекул середньої маси перевищують контрольні значення, діагностують інтенсифікацію вільнорадикальних процесів з розвитком ендогенної інтоксикації. У дослідженні брали участь 100 хворих (56 чоловіків і 44 жінки) з первинним ішемічним інсультом, віком від 36 до 80 років (середній вік 61,46±12,34) та 100 хворих (55 чоловіків і 45 жінок) 5 з повторним ішемічним інсультом, віком від 36 до 80 років (середній вік - 64,80±10,19). Групу контролю 1 (КГ І) склали 43 практично здорові особи, з них 20 чоловіків і 23 жінки, віком від 38 до 72 років (середній вік - 57,53±10,17). З метою порівняння, додатково була обстежена група з 39 хворих на гіпертонічну хворобу в поєднанні з церебральним атеросклерозом без церебральних ускладнень (КГ II), з них 20 чоловіків та 19 жінок, віком від 36 до 74 років (середній вік - 56,46±9,89), які перебували на стаціонарному лікуванні в кардіологічному відділенні КМК ЛШМД м. Львова в 2007 році. Хворі з ішемічними інсультами були обстежені у динаміці гострого періоду: на 1-3-ю, 7-10-у та 18-21-у доби захворювання. Відбір хворих з інсультами проводився в групи у випадковому порядку, давністю на момент огляду не більше 72 годин після виникнення неврологічної симптоматики. Діагноз ішемічного інсульту встановлювали відповідно до критеріїв ВООЗ, результатів комп'ютерно-томографічних методів дослідження. Об'єктивізація тяжкості стану хворих в гострому періоді проводилась за шкалою Національного інституту здоров'я США (NIHSS). Статистичну обробку результатів дослідження проводили з використанням пакету статистичних програм Statistica 6.0 (Stat Soft Inc, США). Аналіз отриманих даних показав, що в гострому періоді у сироватці крові хворих з первинним та повторним ішемічним інсультом зростає вміст продуктів ОМБ, МСМ та ПОЛ (дані подані в таблиці). Порівняння показників контрольних груп виявило у пацієнтів КГ II достовірне підвищення в крові АФГНх І АФГОх та посилення процесів ПОЛ. Із наведених у таблиці результатів дослідження видно, що у хворих з первинним ішемічним інсультом в гострому періоді виявлено вірогідно високий рівень АФГНх і КФГНх, АФГОх (р0,05) від показників КГ І та КГ II. При вивченні динаміки показників ОМБ у цих хворих спостерігалося статистично достовірне підвищення рівня АФГНх і КФГНх, АФГОх (р10,05, р*>0,05). Встановлено, що в динаміці гострого періоду повторного ішемічного інсульту відзначалася аналогічна спрямованість змін, які були характерні для первинного інсульту з достовірним зростанням рівня АФГНх і КФГНх, АФГОх (р10,05). Щодо рівня КФГОх, то вірогідне зниження цього продукту ОМБ починалося з 7-10-ї доби. Згідно з отриманими даними досліджень, рівень продуктів ОМБ (АФГНх і КФГНх, АФГОх) був достовірно вищий (р*1