Спосіб підрахунку яєць гельмінтів у фекаліях

Реферат: UA 69062 U UA 69062 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Корисна модель належить до галуз і ветеринарної медицини, зокрема до ветеринарної паразитології, і може бути використана для діагностики гельмінтних інвазій, наприклад стронгілоїдозу чи інших нематодозів травного каналу тварин. Відомий метод Столла підрахунку яєць гельмінтів, в якому в 100-мілілітрову колбочку наливають 56 мл води і на рівні меніска ззовні роблять помітку, потім доливають 4 мл води і знову роблять відмітку, потім воду виливають, а в колбу наливають 56 мл 0,1 н розчину їдкого натрію і додають фекалій стільки, щоб рівень рідини досяг верхньої відмітки - 60 мл. У колбу поміщають 10-15 скляних бусинок і все старанно збовтують. Для визначення кількості яєць в 1 г фекалій відразу після збовтування піпеткою набирають 0,1 мл суміші, наносять на предметне скло і досліджують під мікроскопом. Кількість яєць множать на 150 [1]. Цей метод має суттєві недоліки. Під час проведення досліджень слід проводити багато замірів об'єму рідини, мати додаткове обладнання - бусинки, піпетки, колби, а також метод потребує значних затрат часу - 40-50 хв на одну пробу і є дуже трудомістким. Відомий спосіб підрахунку яєць гельмінтів у фекаліях тварин, запропонований В.Н. Трачем (прототип), при якому 5-грамову пробу фекалій гомогенізують у насиченому розчині кухонної солі у хімічному стакані, відфільтровують від грубих часточок фекалій; гельмінтологічною петлею знімають поверхневу плівку, переносять її на предметне скло і підраховують під мікроскопом яйця гельмінтів; перераховують одержане значення на 1 г фекалій [2]. Недоліком вищенаведеного методу є те, що він також вимагає значних затрат часу на перерахунок кількості яєць, виявлених у краплях суміші з петлі, на їх кількість у пробі з урахуванням розмірів діаметрів площ стакана та гельмінтологічної петлі. Крім того, дослідження потребує значних затрат часу - 30-45 хв, який рекомендується для повноти відстоювання проб фекалій до початку їх дослідження. Задача корисної моделі - розробка швидкої і зручної у застосуванні методики підрахунку кількості яєць гельмінтів у 1 г фекалій без математичних перерахунків. Зазначена задача вирішується тим, що вихідна проба фекалій має масу 1 г; як флотаційну сіль використовують насичений розчин нітрату амонію, а як посудину для зняття плівки використовують пробірку з внутрішнім діаметром 1-1,2 см, практично співпадаючим з діаметром гельмінтологічної петлі. Використання однограмової проби фекалій та збір спливлих яєць практично зі всієї поверхні рідини робить непотрібним будь-які математичні перерахунки, а застосування як флотаційного реагенту насиченого розчину нітрату амонію дозволяє істотно прискорити флотацію яєць гельмінтів як за рахунок більшої густини суміші (відповідно, більшої виштовхувальної сили), так і за рахунок специфічної природи флотаційної солі. Спосіб підрахунку яєць гельмінтів у фекаліях проводиться наступним чином. Поголів'я тварин попередньо клінічно обстежують перед проведенням копрологічних досліджень. Відбирають проби фекалій із прямої кишки або ж щойно виділені, старанно перемішують. Для виконання лабораторних досліджень 1 г фекалій від кожної тварини поміщають у скляний стаканчик, додають 5 мл насиченого розчину амонію нітрату (густина 3 розчину >1,3 г/см ), розмішують до утворення однорідної маси. Переціджують через гельмінтологічне ситечко у чистий стаканчик з «носиком» і отриману суміш зразу ж переливають у невисоку циліндричну пробірку з внутрішнім діаметром 1-1,2 см і у випадку, якщо вона неповна, доливають до рівня горловини насиченим розчином нітрату амонію. Через 20-25 хв. з поверхні суміші фекалій знімають поверхневу плівку за допомогою гельмінтологічної петлі, яка має діаметр 1 см; розміщують краплю з петлі на предметному склі, покривають накривним скельцем і досліджують під мікроскопом на наявність яєць. Підрахована кількість яєць у одній краплі відповідає їх кількості у одному грамі фекалій. Всього виконано 27 порівняльних досліджень проб фекалій від телят віком 3-4 міс, спонтанно уражених гельмінтами, які належали СПП «Чумаки» Дніпропетровського району. Для більшої достовірності отриманих результатів кожне дослідження проводили двічі, повторюючи підрахунки. Результати проведених досліджень представлені у таблиці. 1 UA 69062 U Показники кількості яєць в 1 г фекалій, підрахованих за способами В.Н. Трача та запропонованим Кількість Кількість Кількість яєць Кількість яєць Кількість Кількість яєць яєць за яєць за № за № за № яєць за за методомметодом проби запропонованим проби запропонованим проби методом запропонованим В.Н. В.Н. методом методом В.Н. Трача методом Трача Трача 32 28 30 21 36 29 1 10 19 31 24 33 30 39 36 39 32 38 24 40 38 2 11 20 37 24 36 28 42 37 44 31 38 34 39 35 3 12 21 42 32 37 31 36 33 33 29 37 32 39 24 4 13 22 31 27 34 29 36 31 29 21 39 31 35 22 5 14 23 31 18 41 33 36 29 33 27 37 23 27 22 6 15 24 35 31 35 26 25 16 34 23 36 29 29 27 7 16 25 37 29 38 33 32 29 36 29 43 38 38 31 8 17 26 35 34 39 30 37 23 32 23 27 24 39 36 9 18 27 34 31 29 31 32 29 М±m М±m Всього проб: 27 35,35±6,66 28,20±3,95 5 10 15 20 25 Як свідчать дані таблиці, результати підрахунку яєць по прототипу і пропонованим способом несуттєво відрізняються, однак останній метод більш точний (має меншу похибку). Таким чином, запропонований метод підрахунку кількості яєць у 1 г фекалій з використанням для збору яєць пробірок з діаметром, близьким до діаметра гельмінтологічної петлі, а також насиченого розчину амонію нітрату у якості флотаційного реагенту більш ефективний у порівнянні з прототипом завдяки економії часу на виконання досліджень, зручності виконання, ефективності визначення інтенсивності інвазії. Спрощений метод підрахунку кількості яєць гельмінтів у фекаліях тварин зручний і простий, скорочує затрати часу на виконання підрахунку яєць у 1 грамі фекалій, бо не потребує додаткових складних математичних розрахунків. Крім цього, час відстоювання суміші фекалій значно скорочується - до 20-25 хв (замість 30-45 хв у методі, запропонованому В.Н. Трачем), завдяки чому може бути широко застосованим з практичною метою для зажиттєвої діагностики гельмінтних інвазій травного каналу тварин за масових паразитологічних діагностичних досліджень. Метод, який заявляється, може бути широко застосований у практичній лабораторній діагностиці за масових паразитологічних діагностичних досліджень тварин. Його економічна ефективність пов'язана зі своєчасним виявленням захворювання, а застосування цього методу є гарантією ефективності терапевтичних та профілактичних заходів у господарствах. Список літератури: 1. Секретарюк К.В. Гельмінтологічні дослідження тварин і навколишнього середовища у ветеринарній медицині / К.В.Секретарюк, О.А. Сварчевський, Р.І. Тафійчук. - Львів: Сполом, 2005. - 110 с. 2. Трач В.Н. Рекомендации по применению нового метода учета яиц гельминтов и цист простейших в фекалиях животных / В.Н. Трач. - К.: НПО «ВАСТА», 1992 - с. 16. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 30 35 Спосіб підрахунку яєць гельмінтів у фекаліях тварин, який включає гомогенізацію проби фекалій у насиченому розчині флотаційного реагента, фільтрування суміші від грубих часточок; зняття поверхневої плівки гельмінтологічною петлею і підрахунок яєць гельмінтів під мікроскопом, який відрізняється тим, що вихідна проба фекалій має масу 1 г; як флотаційну сіль використовують насичений розчин нітрату амонію, а поверхневу плівку знімають у пробірці з внутрішнім діаметром, практично співпадаючим з діаметром гельмінтологічної петлі. 2 UA 69062 U Комп’ютерна верстка А. Крулевський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3