Спосіб вирощування гігантської устриці grassostrea gigas у чорному морі

1. Спосіб вирощування гігантської устриці Crassostrea gigas у Чорному морі, що включає формування маточного стада, проведення в розпліднику кондиціонування плідників, стимуляції нересту розчином серотоніну, одержання статевих продуктів, вирощування личинок і спату, осадження личинок на субстрат і дорощування устриць до товарних розмірів у морі, який відрізняється тим, що кондиціонування плідників здійснюють протягом 24 годин шляхом витримування без корму, а серотонін, розчинений у стерильній морській воді, вводять у міжстулкову рідину по 1 мл на особину у концентрації 0,003%, через 15 хвилин після запліднення промивають стерильною морською водою яйцеклітини і підтримують їх щільність на рівні 50 C2 2 76680 1 3 76680 4 після доставки в акваріальну. Дворічних устриць з устрицями перешкоджають лінійному росту мовідсаджували на кондиціонування тривалістю 20 люсків, їхньому диханню і фільтрації. діб, а потім стимулювали нерест. Нерест стимуВ основу винаходу "Спосіб вирощування гігалювали введенням розчину серотоніну нтської устриці Crassostrea gigas у Чорному морі" концентрації 0,02% в м'яз, або в мантійну порожпоставлена задача шляхом розробки оптимальних нину (з одночасним підвищенням температури умов нересту, вирощування личинок І одержання води до 28°С чи без підвищення); або життєздатної молоді в штучних умовах, забезпепідвищенням температури води; або внесенням у чити відродження устрицівництва на Чорному моводу розчину суспензії гонад самців. Після одеррі. жання статевих клітин проводили запліднення в Поставлена задача реалізується таким чином. 20-літрових акваріумах з оргскла. Для очищення У Способі вирощування гігантської устриці воду з гаметами пропускали через шовкове чи Crassostrea gigas у Чорному морі, кондиціонування капронове газ-сито з діаметром вічка 96мкм. плідників здійснюють протягом 24г. шляхом видеЯйцеклітини, що дробляться, переносили в пларжування в воді без корму з постійною аерацією. стиковий лоток об'ємом 100л, а потім на стадії Серотонін, розчинений у стерильній морській воді, трохофори в пластикові басейни об'ємом 5, 6 і вводять у міжстулкову рідину по 1мл/особину у 25м3. Личинок і спат устриць вирощували в басейконцентрації 0,003%. Через 15 хвилин після нах з невеликим протоком води на природному запліднення проводять селекцію яйцеклітин за кормі, без додаткового внесення мікроводоростей. розмірами. При культивуванні ембріонів Як субстрат для осадження личинок використовупідтримують щільність яйцеклітин 50тис.яйц./л, на вали стулки мідій. Коли личинки переходили на ранніх і пізніх стадіях розвитку личинок стадію педівелігеру, колектори виставляли в бавідповідно 20тис.лич./л та 10тис.лич/л, на стадії сейни і протягом тижня відбувалося осідання лиосідання - до 1тис.лич./л. На всіх стадіях розвитку чинок. Через 4 тижня спат розміром 3,5-5,0мм висличинок устриць забезпечують кормом, причому тавляли в море. Дорощування до товарних на ранніх стадіях - корм складається з Isochrysis розмірів проводили в морі на устричному носії, galbana і Chaetoceros calcitrans у концентрації до глибина постановки якого складала 14-20м. 100тис. кл./мл при співвідношенні кліток 2:1, на Відомий спосіб має ряд недоліків: пізніх включають мікроводорості Isochrysis - концентрація серотоніну, що застосовувана galbana, Chaetoceros calcitrans, Phaeodactilum triдля стимуляції, є живильним середовищем для cornutum, Tetraselmis suecica у концентрації корму мікроорганізмів. Тому що від моменту введення до 200тис. кл./мл при співвідношенні кліток розчину до вимету статевих продуктів відповідно 2:1:1:1, а на стадії педівелігеру до відбувається 1-4 години, а швидкість розмноження складу корму додатково вводять мікроводорость мікроорганізмів збільшується з підвищенням темSkeletonema costatum (2 частини) при загальній ператури води, то відбувається інтенсивне концентрації 200-250тис.кл./мл. При запліднення мікроорганізмами середовища і кондиціонуванні плідників обмін фільтрованої яйцеклітин; морської води проводять двічі на добу. Для - запліднені яйцеклітини не промивають стеселекції за розмірами яйцеклітини збирають на рильною морською водою, що є причиною низькомлинарське сито з діаметром вічка 32мкм і промиго виживання личинок на ранніх стадіях розвитку; вають фільтрованою і стерилізованою морською - введення шприцом розчину серотоніну в м'яз водою. Ембріональний розвиток проходить у молюсків травмує м'які тканини і приводить до стерилізованій морській воді з аерацією. загибелі плідників; Переваги застосовуваної стимуляції нересту - тому що діаметр яйцеклітини складає 50полягають в тому, що плідники залишаються жи70мкм, то при очищенні суспензії запліднених яйвими після стимуляції, відбувається нерест тільки цеклітин через газ-сито з діаметром вічка 96мкм зрілих сперматозоїдів і яйцеклітин, що забезпечує проходять яйцеклітини з зайвими сперматозоїдависоке виживання личинок. Розчин серотоніну ми, що приведе до поліспермії і порушень ембріоконцентрації 0,003% є оптимальним для нального розвитку; стимуляції нересту гігантської устриці, тому що розвиток запліднених яйцеклітин концентрація на порядок нижче не викликає відбувається у воді, де проводили стимуляцію нестимуляцію, а на порядок вище - створює живильресту плідників. Вміст біогенів в такій воді значно не середовище для мікроорганізмів, що знахоперевищує гранічно-припустимі концентрації; дяться в мантійній порожнині устриць. Проведення - концентрація мікроводоростей у морській селекції забезпечує проходження раннього воді значно нижча від необхідної для повноцінного ембріонгенезу без порушень, а також сортування харчування личинок і спату устриць. Використуяйцеклітин за розмірами. Багатофакторні експевання води безпосередньо з моря і без здійснення рименти, проведеш авторами, дозволили визначипопереднього очищення приводить до того, що ти оптимальні величини щільності посадки, склад разом з мікроорганізмами надходять личинки зоо- і корму і концентрації мікроводоростей, що забезмеропланктону, що створює харчову конкуренцію печують високе виживання і темпи росту та вплиличинкам устриць і негативно впливає на їхнє вивають на тривалість вирощування. живання; Передбачуваний винахід пояснюється - було отримано 20тис. спату молюсків, що фотографіями. Фіг. 1 - Пластина з харчової пластскладає 0,4% від початкового значення, і це маси - субстрат для осідання личинок гігантської свідчить про дуже низьке виживання; устриці. Фіг. 2 - Колектор із пластмасових чашок - застосовувані в схемі устричного носія рамки для осідання личинок гігантської устриці. Фіг. 3 5 76680 6 садок для підрощування устриць в морі до товарскладу корму вводять ще одну мікроводорость ного розміру. Skeletonema costatum (2 частини). Спосіб реалізується таким чином. Вирощування личинок проводять у Кондиціонування плідників. Дозрівання циліндричних ємкостях із пластику, об'ємом 100л плідників відбувається в природних умовах у садпри постійній аерації і щоденній подачі корму. У ках на глибині 2-3 метра при оптимальній перший тиждень куль" тивування личинок, заміну щільності посадки. Збалансоване харчування і води роблять щодня, у наступні тижні - через дві природний хід температури дають можливість доби. одержати статеві продукти високої якості, що Осідання личинок. Для осідання устриць викозабезпечує високе виживання личинок. ристовують колектори - пластини або чашки з Маткове стадо складають із плідників різного харчової пластмаси (Фіг. 1, 2). Перед осіданням віку для забезпечення балансу статей, оскільки субстрати витримують у морі протягом 4 тижні, серед молодших вікових груп переважають самці, потім проводять очищення і дезінфекцію. Через 2 а серед старших -самки. Для запобігання тижні після осідання, спат розміром 2-3мм виставінбридингу кількість плідників повинна бути не ляють у море для дорощування. Застосовуваний менш 100 екз. У другій декаді червня, коли темпетип субстрату дозволяє розділяти спат без утрат, ратура води на глибині місця розташування устнезалежно від щільності осідання. риць складає 18°С, а місяць входить у фазу повТемп росту спату, прикріпленого до пластин, у нолуння (нерест устриць у природі відбувається 1,6 рази вище, ніж на раковинах мідій. під час приливу), плідників переносять у Проведення осідання. Педівелігерів розмірами розплідник для кондиціонування. Очищених 325мкм переносять у ємкість з підготовленими плідників розподіляють на сітці, яка розміщена в колекторами. Щільність личинок складає 1тис. прямокутній ємкості на висоті 10см від дна. лич./л; концентрація корму - 200-250тис. кл./мл. Ємкість попередньо заповнюється фільтрованою Склад мікроводоростей аналогічний попередньоморською водою температурою 20°С. Плідників му. Інтенсивність аерації води знижена. Повну держать в воді без корму з постійною аерацією. заміну води проводять через дві доби. Осідання Обмін стерильної води проводять двічі на добу. закінчується через 3 доби. Колектори з осілим Протягом цього періоду у плідників очищується спатом переносять у ємність для підрощування. кишечник і зябра, що забезпечує одержання чисПідрощування спату устриць в морі до товартих статевих продуктів. ного розміру. Наприкінці жовтня - початку листоСтимуляція нересту й одержання статевих пада, при досягненні розмірів 35-40мм, спат продуктів. Нерест устриць починається на другий гігантської устриці знімають із субстрату, день. Першими починають нереститися самці; їх розділяють і переносять на дорощування в садки. переносять в ємкість окрему від самок. При Для садків використовують обшиті деллю необхідності термінового одержання статевих пластмасові ящики з отворами. Розміри садків продуктів, чи при неможливості одержання пер37 28 10см (І тип) і 47 28 11см (II тип). Садки шим способом (коли, наприклад, місяць знахопромиваються морською водою з усіх боків, а диться в інших фазах), застосовують стимуляцію устриці вільно відкривають стулки для дихання і нересту плідників. Розчинений у фільтрованій фільтрування; вільне розташування устриць не морській воді серотонін (С14H19N5O2 H2SO4), у заважає їхньому росту. концентрації 0,003%, вводять за допомогою шприПри оптимальних умовах вирощування устриці ца в міжстулкову рідину по 1мл/особииу. Тканини досягають товарного розміру 85-120мм за 1,5-2 устриці-плідника при цьому не травмуються. року. Проведення запліднення Через 15 хвилин Приклад реалізації способу. після запліднення яйцеклітини збирають на У квітні 2003 року з усієї вибірки устриць Crasмірошницьке сито з діаметром вічка 32мкм і проsostrea gigas, вирощуваних на мідійно-устричній мивають фільтрованою морською водою, що фермі в бухті Карантинна, проводили добір плідпройшла стерилізацію. Подальший ембріональний ників різного віку (1-3 року) в кількості 140 екз. розвиток проходить у стерильній морській воді з Устриць розподіляли по садкам (по 35-40 екз.) і аерацією при щільності 50тис.яйц./л. розташували в морі на глибині 2-3м. У червні, при Вирощування личинок гігантської устриці Темпідвищенні температури води до 18°С, половину пература води протягом періоду вирощування плідників перенесли в лабораторію, провели підтримують на рівні 21-24°С, що відповідає теммеханічне очищення раковин від обростання і пературі, при якій відбувається розмноження і розпомістили в ємкість об'ємом 250л. Устриць витривиток личинок у природних умовах. Оптимальною мували без корму протягом 24 годин у стерильній для росту личинок на стадії велигера є щільність морській воді з аерацією при температурі 20,4°С. посадки до 20тис.лич./л. Корм складається із За цей час двічі проводили зміну морської води. Isochrysis galbana І Chaetoceros calcitrans у концеСтимуляція нересту. Одночасно застосували нтрації до 100тис.кл./мл при співвідношенні кліток температурну і хімічну стимуляцію нересту (тому 2:1. що місяць знаходився у фазі росту). Температуру На пізніх стадіях розвитку оптимальною є води підвищили до 23°С. Десятьом устрицям у щільність посадки до 10тис.лич./л, концентрація міжстулкову рідину був введений розчин корму - до 200тис.кл./мл і склад мікроводоростей серотоніну концентрації 0,003% у кількості Isochrysis galbana, Chaetoceros calcitrans, Phaeo1мл/особину. Через 1,5 години першими почали dactilum tricomutum, Tetraselmis suecica у співвіднереститися стимульовані серотоніном самці, ношенні кліток 2:1:1:1. На стадії педівелігеру до потім інші устриці. Самок і самців розсаджували по 7 76680 8 окремим ємкостям. Через годину після початку Виживання педівелігерів до 25%. нересту яйцеклітини зібрали на газ-сито з Осідання личинок. Педівелігерів збирали на розміром вічка 32мкм і перенесли в 10л єкність зі газ-сито з розміром вічка 210мкм і перенесли в стерильною морською водою з аерацією. Туди підготовлену ємкість із субстратами для осідання додали суспензію сперматозоїдів (200мл) молоч(стулки раковин мідії і чашки з харчової пластманого кольору. Через 15хв. запліднені яйцеклітини си). Щільність посадки педівелігерів - 1тис./л; знову зібрали на газ-сито, промили стерильною склад і концентрація корму аналогічні попередньморською водою і перенесли в іншу ємкість. ому. Осідання продовжувалося 3 доби. При повній Ранній ембріональний розвиток устриць проходив заміні води на другу добу було виявлено, що при щільності посадки 50тис.ембріонів/л в об'ємі осідання закінчується. 20 літрів при температурі 22°С. Оцінювали зрілість Підрощування спата. Спат підрощували протяяйцеклітин, а також процес запліднення і раннього гом 2 тижні. Подачу корму здійснювали два рази в ембріонального розвитку за допомогою мікроскопа на добу, сумарна концентрація збільшена в два МБИ-6. рази. Склад мікроводоростей аналогічний попеВирощування личинок. Через добу за допоморедньому. Зміну води проводили щодня. Темперагою газ-сита (56мкм) велігерів перенесли в стетура води - до 25°С. Середньодобовий приріст рильну морську воду з аерацією. Щільність посадспату склав 110-190мкм. При розмірах спату 2ки личинок склала 10тис.лич./л; годували 5мм, колектори були виставлені в море на дорозолотавою мисроводоростю Isochrysis galbana щування. Щоб зберегти спат від опадання і концентрації - 50тис.кл./мл протягом 3 доби, потім виїдання рибами, на колектори вдягали рукава, поступово збільшували концентрацію до пошиті з діли (розмір вічка 1см). 100тис.кл./мл, додаючи одну частину Chaetoceros Поділ спату. Наприкінці жовтня - початку лисcalcitrans. Протягом першого тижня обмін води топада спат знімали із субстрату, розділяли по проводили щодня за допомогою газ-сита (84одному екземплярі і розподіляли по садкам. Деякі 140мкм в залежності від розмірів личинок), потім умови вирощування і лінійно-вагові характеристичерез день. Стадія велігера продовжувалася 8-10 ки представлені в Таблиці. Сумарна кількість спадіб; приріст склав до 10мкм/добу при виживанні та склало близько 65тис. чи 6,5% від початкової личинок 82%. На стадії веліконхі личинок вирощукількості яйцеклітин. вали при щільності посадки 5тис.лич./л і Переваги пропонованого Способу вирощувантемпературі води до 24°С. До складу корму постуня гігантської устриці Crassostrea gigas у Чорному пово вводили інші види мікроводоростей (Phaeoморі полягають у тому, що розроблені оптимальні dactilum tricomutum, Tetraselmis swcica) умови для одержання личинок і вирощування гігаконцентрації від 150 до 200тис. кл./мол. Тривалість нтської устриці в розпліднику. При вирощуванні цієї стадії - 14-17 діб. Середньодобовий приріст проводиться селекція, як плідників, так і личинок і личинок склав 15-19мкм/добу, при виживанні контролюється весь цикл культивування. Завдяки 60,2%. Стадія педівелігера продовжувалася 3-5 оптимізації всіх етапів культивування гігантської доби. До складу корму була введена ще одна устриці С. gigas з'являється можливість створення мікроводорость Sceletonema costatum (2 частини), повноциклічного устричного господарства для виа концентрація корму збільшена до 250тис.кл./мл. робництва товарної устриці в Чорному морі. Таблиця Оптимальні умови утримання гігантської устриці Crassostrea gigas при дорощуванні в морі Вік устриць, рік 0,5 1 1,5 2 Тип садка І II II II Кількість устриць у садку, екз. 250 100 50 25-30 Глибина розміщення Висота раковисадка, м ни, мм 3-4 41,9±3,6 2-3 68,7±3,9 2-3 89,1±3,1 3-4 101,0±3,6 Загальна вага, г 9,77±1,53 24,74±2,36 61,92±5,64 91,04±7,93 9 Комп’ютерна верстка М. Клюкін 76680 Підписне 10 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601